李锦华
- 作品数：19 被引量：51H指数：4
- 供职机构：中山医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金广东省卫生厅资助课题更多>>
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- 逆转录病毒载体介导的同种MHC基因在小鼠胸腺的表达
- 1999年
- 目的:通过胸腺内注射质粒 PXN(N2—B19—H—2K^b),表达外源性主要组织相容性抗原复合物(major histo-compatibility complex,MHC)抗原,为下一步诱导异基因小鼠器官移植耐受作准备.方法:通过 BALB/C 小鼠胸腺内注射质粒 PXN(N2—B19—H—2K^b),将外源性的编码 C57BL/6小鼠MHCI类抗原的H—2K^bcDNA转移到 BALB/C小鼠胸腺,用聚合酶链反应(PCR),反转录聚合酶链反应(RT—PCR),单克隆抗体免疫萤光染色流式细胞仪检测BALB/C小鼠胸腺细胞DNA,mRNA和MHC蛋白质表达,结果:BALB/C小鼠胸腺表面有外源性MHC分子表达,转染效率为5.1%结论:通过胸腺内注射逆转录病毒载体PXN(N2—B19—H—2K^b),小鼠胸腺能表达同种MHC基因,为下一步行异基因小鼠器官移植耐受打下了物质基础.
- 李锦华廖晓星陈永雄张仕光
- 关键词：免疫耐受移植排斥反应MHC基因逆转录病毒
- hIL-10基因转导抑制大鼠心肌细胞诱生炎症细胞因子
- 1999年
- 目的：观察人白细胞介素１０ （ｈｕｍａｎ Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ １０ ，ｈ Ｉ Ｌ１０） 基因转导对脂多糖（ Ｌ Ｐ Ｓ） 诱导大鼠心肌细胞（ Ｃ Ｍ Ｃ） 的炎症细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过重组逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ（ Ｉ Ｌ１０） Ｓ Ｎ 将人 Ｉ Ｌ１０ 基因导入大鼠 Ｃ Ｍ Ｃ，应用 Ｐ Ｃ Ｒ， Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ：①检测 Ｉ Ｌ１０ 基因的整合和表达；②观察 Ｉ Ｌ１０ 基因转导对 Ｌ Ｐ Ｓ诱导的 Ｃ Ｍ Ｃ 肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα） 的ｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达及白细胞介素１β（ Ｉ Ｌ１β） 和 Ｔ Ｎ Ｆα的蛋白质的产生的影响。结果：外源性 Ｉ Ｌ１０ 基因已整合到靶细胞染色体 Ｄ Ｎ Ａ 并有效地表达，并能抑制 Ｌ Ｐ Ｓ诱生 Ｃ Ｍ Ｃ 产生 Ｉ Ｌ１β， Ｔ Ｎ Ｆα。结论：逆转录病毒载体介导的人 Ｉ Ｌ１０ 基因转导能抑制 Ｃ Ｍ Ｃ 炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。
- 李锦华陈永雄张仕光廖晓星
- 关键词：白细胞介素10心肌炎症心肌细胞
- 反义TNF-α寡脱氧核苷酸对感染性休克小鼠死亡率的影响
- 目的观察反义肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)寡脱氧核苷酸对LPS诱导的感染性休克小鼠的影响,为采用反义技术降低感染性休克死亡率的早期临床试验奠定基础。方法通过腹腔注射...
- 唐皓廖晓星李锦华
- 关键词：感染性休克反义技术TNF寡脱氧核苷酸小鼠死亡率
- 文献传递
- MHC基因胸腺转移诱导异基因小鼠皮肤移植免疫耐受被引量：3
- 1999年
- 目的通过胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２Ｂ１９Ｈ２Ｋｂ），表达外源性主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）抗原，以小鼠皮肤移植为模型，诱导移植免疫耐受，为免疫耐受提供理论和实验依据。方法应用逆转录病毒载体介导的基因转移技术，通过ＢＡＬＡ／Ｃ胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２Ｂ１９Ｈ２Ｋｂ），将外源性ＭＨＣ基因转移到胸腺细胞，１４天后行异基因小鼠皮肤移植。应用聚合酶链反应（ＰＣＲ），反转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ），单克隆抗体免疫荧光染色流式细胞仪检测胸腺细胞ＤＮＡ，ｍＲＮＡ和ＭＨＣ蛋白质表达。结果外源性ＭＨＣ基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地转录，胸腺细胞表面有外源性ＭＨＣ分子表达，转染效率为５％，胸腺内注射质粒ＰＸＮ（Ｎ２Ｂ１９Ｈ２Ｋｂ）能明显延长异基因小鼠的皮肤移植时间，平均２７天，对照为１０天（Ｐ＜０００１）。受体鼠脾细胞对ＣｏｎＡ的增殖反应在正常范围。结论供体鼠ＭＨＣ基因转移至受体鼠胸腺诱导了对供体皮肤移植的免疫耐受。
- 李锦华陈永雄余学清张仕光
- 关键词：基因转移免疫耐受皮肤移植组织相容性抗原
- p38信号通路在脂多糖诱导的大鼠系膜细胞产生白细胞介素1β中的作用被引量：9
- 2000年
- 目的探讨p38信号通路在肾小球系膜细胞促炎介质白细胞介素1（IL-1）β表达中的作用。方法采用免疫沉淀法、免疫复合物蛋白激酶测定，Westernblotting检测p38信号通路在脂多糖（LPS）诱导的肾小球系膜细胞炎症反应中的活化程度，应用逆转录-聚合酶链反应（RT－PCR）和ELISA观察p38信号通路抑制剂SB203580对肾小球系膜细胞促炎介质IL－1βmRNA和蛋白质表达的影响。结果脂多糖刺激肾小球系膜细胞引起p38信号通路活化，p38信号通路抑制剂SB203580对肾小球系膜细胞促炎介质表达有显著抑制作用。结论p38信号通路在大鼠系膜细胞炎症反应产生炎症介质IL－1β中可能起主要的作用。
- 余学清李锦华黄凌虹陈永雄顾军
- 关键词：肾小球系膜细胞P38信号通路脂多糖IL-1
- P38信号通道参与巨噬细胞炎症反应
- 目的检测P38信号通道在巨噬细胞参与的炎症反应中的地位和作用,为进一步探讨P38信号通道抑制剂控制炎症反应打下基础。方法采用(1)LPS刺激巨噬细胞,检测P38信号通道在各时点的开放程度及前炎症因子IL-1β和TNF-α...
- 李锦华
- 关键词：信号通道巨噬细胞P38炎症反应
- 文献传递
- P38MAPK在脂多糖诱导人单核细胞产生肿瘤坏死因子中的作用被引量：6
- 2000年
- 目的 :探讨 P38信号通道 (P38MAPK)在脂多糖 (L PS)诱导人单核细胞表达肿瘤坏死因子 (TNFα)中的作用。方法 :采用免疫沉淀法、免疫复合物蛋白激酶测定法、Western blotting检测 P38MAPK在 L PS诱导的人单核细胞产生 TNFα中的激活程度 ,应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)和酶联免疫吸附法(EL ISA)观察 P38信号通道抑制剂 SB2 0 35 80对单核细胞 TNFα m RNA和蛋白质表达的影响。结果 :L PS刺激单核细胞引起 P38MAPK激活和 TNFα表达明显增多 ,P38MAPK抑制剂 SB2 0 35 80对单核细胞 TNFα表达有显著抑制作用。结论 :P38MAPK可能是 L PS诱导人单核细胞表达
- 卢应民李锦华顾军
- 关键词：P38信号通路脂多糖单核细胞
- 反义TNF_(-α)寡脱氧核苷酸降低感染性休克小鼠死亡率被引量：2
- 1999年
- 目的：观察反义肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－ａｌｐｈａ，ＴＮＦ－α）寡脱氧核苷酸对ＬＰＳ诱导的感染性休克小鼠的影响，为采用反义技术降低感染性休克死亡率的早期临床试验奠定基础。方法：通过腹腔注射ＬＰＳ建立感染性休克小鼠模型。采用腹腔注射方法，通过ＤＯＴＡＰ转染导入系统，使反义ＴＮＦ－α寡脱氧核苷酸（ｏｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＯＤＮ）作用于小鼠单核吞噬细胞系统；采用ＲＴ－ＰＣＲ，ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦ－α的ｍＲＮＡ和蛋白质的表达水平。结果：反义ＴＮＦ－αＯＤＮ降低了ＬＰＳ诱导的感染性休克小鼠的ＴＮＦ－α的释放，降低了感染性休克小鼠的死亡率，而正义ＴＮＦ－αＯＤＮ和错配ＴＮＦ－αＯＤＮ与对照组相比，对ＴＮＦ－α的释放无影响，未能降低感染性休克小鼠的死亡率。结论：反义ＴＮＦ－αＯＤＮ以序列特异性方式抑制了ＬＰＳ诱导的感染性休克小鼠的ＴＮＦ－α的释放，降低了感染性休克小鼠的死亡率。
- 李锦华唐皓余学清
- 关键词：寡核苷酸类TNFΑ反义感染性休克小鼠
- 反义TNF-α寡脱氧核苷酸降低多器官功能不全综合征大量死亡率
- 目的观察反义肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)寡脱氧核苷酸对酵母多糖A(zymosan A)诱导的多器官功能不全综合征(multiple organ dysfuncti...
- 廖晓星李锦华
- 关键词：多器官功能不全综合征TNF死亡率寡脱氧核苷酸
- 文献传递
- 白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子被引量：10
- 1999年
- 目的：通过建立白细胞介素１０（ＩＬ－１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统，观察ＩＬ－１０对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓｅｎｇｉａｌｃｅｌ，ＧＭＣ）中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过构建的重组逆转录病毒载体ｐＬＸ（ＩＬ－１０）ＳＮ将外源基因ＩＬ－１０转移至大鼠ＧＭＣ：（１）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ），反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－１０基因的整合和表达；（２）以ＲＴ－ＰＣＲ观察ＩＬ－１０基因转移对ＬＰＳ诱导的ＧＭＣ肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的ｍＲＮＡ表达的影响，以ＥＬＩＳＡ测定白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和ＴＮＦ－α的蛋白质表达。结果：外源性ＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达，它能抑制ＬＰＳ诱生ＧＭＣ过度产生ＩＬ－１β，ＴＮＦ－α。结论：外源性ＩＬ－１０基因可以转移到ＧＭＣ并稳定表达，它能抑制ＧＭＣ炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。
- 李锦华余学清陈永雄张仕光
- 关键词：白细胞介素10肾小球系膜炎症
