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N-甲基-D天冬氨酸受体2B亚基重组腺病毒穿梭载体的构建及鉴定被引量：1: 2006年; 目的:构建携带N-甲基-D天冬氨酸(NMDA)受体2B亚基(NR2B)基因的腺病毒5型(Ad5)穿梭载体,为NR2B重组腺病毒镇痛疫苗的包装做准备。方法:以限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切质粒pcDNA3.1-NR2B获得目的基因NR2B;将NR2B定向克隆入腺病毒穿梭载体pDC515,并行酶切及DNA测序鉴定。在脂质体介导下将pDC515-NR2B转染293细胞,并以RT-PCR及W estern b lot分别从转录水平和翻译水平检测目的基因NR2B的表达。结果:经酶切和DNA测序证实目的基因NR2B被成功克隆入载体pDC515-NR2B中,RT-PCR及W estern b lot检测NR2B可在293细胞表达。结论:成功构建NR2B重组Ad5穿梭载体pDC515-NR2B,该载体可用于NR2B重组Ad5载体镇痛疫苗的包装。; 王公明田玉科田学愎陈建平安珂杨辉; 关键词：基因重组

利用基因工程细胞移植和RNA干扰技术促进神经髓鞘及轴突再生: 郭守刚屈传强汪春娟王公明张洪涛胡亚伟刘光云; 该项目属于临床医学神经系统疾病领域。实现神经再生的关键难题是：如何实现髓鞘和轴突的持续稳定修复，且形成具有信号传导功能的有效突触连接。课题组前期研究发现：髓鞘修复和轴突在很大程度上取决于宿主中生长促进因子(NT-3)与生...; 关键词：; 关键词：神经系统疾病细胞移植基因工程

N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基基因重组腺病毒镇痛疫苗的构建被引量：1: 2007年; 目的构建携带N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（NR2B）基因的重组腺病毒镇痛疫苗。方法以携带NR2B基因的腺病毒穿梭质粒pDC515-NR2B和腺病毒骨架质粒pBHGfrt（del）E1，3FLP共转染腺病毒包装细胞293细胞，连续观察细胞的形态学。取形成病毒空斑的293细胞，分别采用PCR、RT-PCR及Western blotting的方法从基因水平、转录水平和蛋白水平对病毒空斑筛选和鉴定，对鉴定正确的病毒空斑进行扩增和纯化。结果转染后12d可观察到细胞病变效应，15d后形成病毒空斑。NR2B基因不仅正确插入重组腺病毒载体，而且可在293细胞正确表达NR2B蛋白。鉴定正确的病毒空斑命名为NR2B基因重组腺病毒5型镇痛疫苗，滴度为5×10^11VP／ml，纯度100％。结论成功地构建了NR2B基因重组腺病毒镇痛疫苗，可用于疫苗镇痛的研究。; 王公明陈建平杨少兵田学愎高峰杨辉安珂田玉科; 关键词：受体腺病毒科疫苗镇痛

双套囊定量气管导管: 本实用新型涉及医疗麻醉器械领域，具体提供一种双套囊定量气管导管。其结构包括管体及套囊，其特点是，所述套囊包括低压套囊及限量套囊，低压套囊和限量套囊自远及近依次设置在管体远端，管体上设置有分别与低压套囊和限量套囊相连通的低...; 牛新环陈杰张孟元平萍王公明; 文献传递

rAd5／NR2B镇痛疫苗对神经病理性痛大鼠认知功能的影响被引量：1: 2010年; 目的评价N-甲基-D天冬氨酸受体2B亚基（NR2B）基因重组腺病毒（rAd5／NR2B）对神经病理性痛大鼠认知功能的影响。方法雌性SD大鼠40只，体重180～200g，随机分为4组（n=10）：对照组（C组）、rAd5／NR2B镇痛免疫组（rAd5／NR2B组）、神经病理性痛组（SP组）和rAd5／NR2B镇痛疫苗＋神经病理性痛组（rAd5／NR2B＋SP组）。C组和rAd5／NR2B组分别胃内灌注生理盐水0．1ml和rAd5／NR2B镇痛疫苗1×10^8 PFU，2周后重复灌注。SP组制备神经病理性痛模型，1周后腹腔注射生理盐水0．1ml。rAd5／NR2B＋SP组胃内灌注rAd5／NR2B镇痛疫苗1×10^8 PFU，2周后重复灌注，再1周后制备神经病理性痛模型。测定大鼠机械缩爪阈值（MWT）。行Morris水迷宫实验测定大鼠认知功能，记录潜伏期和游泳速度。采用免疫组织化学法检测大鼠海马NR2B的表达水平。结果（1）与C组比较，rAd5／NR2B组MWT差异无统计学意义（P〉0．05），SP组和rAd5／NR2B＋sP组MWT降低（P〈0．05）；与SP组比较，rAd5／NR2B＋SP组MWT升高（P〈0．05）。（2）各组游泳速度比较差异无统计学意义（P〉0．05）；与C组比较，rAd5／NR2B组潜伏期差异无统计学意义（P〉0．05），SP组和rAd5／NR2B＋SP组潜伏期延长（P〈0．05）；与SP组比较，rAd5／NR2B＋SP组潜伏期差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）与C组比较，rAd5／NR2B组和rAd5／NR2B＋SP组海马NR2B表达差异无统计学意义（P〉0．05），SP组海马NR2B表达上调（P〈0．05）；与SP组比较，rAd5／NR2B＋SP组海马NR2B表达下调（P〈0．05）。结论rAd5／NR2B疼痛疫苗对神经病理性痛大鼠认知功能无明显影响。; 杨少兵王公明杨辉高峰田学愎刘希江罗婷田玉科; 关键词：腺病毒科神经痛

NR2B多肽疫苗对神经病理性痛大鼠的镇痛效应被引量：2: 2008年; 目的评价NR2B多肽疫苗对神经病理性痛大鼠的镇痛效应。方法成年雌性SD大鼠，体重180～200g，制备保留性神经损伤（SNI）模型，7d后选取SNI模型制备成功的大鼠18只，随机分为3组（n=6），NR2B组沿背部两侧皮下多点注射NR2B多肽疫苗50μl（含NR2B100μg）3次，每隔2周注射1次；PBS组和KLH组分别给予PBS50μl和匙孔虫戚血蓝蛋白100μg，均用弗氏佐剂稀释至100μl。分别于制备SNI前1d（基础值）、第1次免疫前1d及第3次免疫后14d时测定机械痛阈；分别于制备SNI前1d及第3次免疫后14d时取血清和脑脊液，测定NR2B抗体滴度，然后处死大鼠，取L3-5，脊髓组织，其中3只采用免疫组化法测定脊髓背角胶质纤维酸性蛋白表达水平，反映星形胶质细胞激活程度；另外3只采用Western blotting法测定脊髓背角NR2B蛋白表达水平。结果NR2B组第3次免疫后14d时血清及脑脊液中均可检测到NR2B抗体，而SNI前1d时未检测到NR2B抗体，PBS组及KLH组各时点均未检测到NR2B抗体。与基础值比较，各组机械痛阈均降低（P〈0．05）；与PBS组和KLH组比较，NR2B组第3次免疫后机械痛阈升高，脊髓背角星形胶质细胞激活程度降低，NR2B蛋白表达下调（P〈0．05）。结论NR2B多肽疫苗对神经病理性痛大鼠具有镇痛作用，其机制与进入脊髓的NR2B抗体下调了NR2B蛋白表达有关。; 冯颢王公明王红陈建平杨少兵许爱军曹菲田玉科; 关键词：N-甲基-D-天冬氨酸神经痛

中医护理干预在社区慢性病健康管理中的效果分析被引量：6: 2019年; 目的探讨中医护理干预在社区慢性病健康管理中的临床效果.方法选择杭州市下城区中医院2016年3月至2017年4月诊治的慢性病患者200例为研究对象,采用随机数字表法分为两组.对照组100例,实施常规护理;观察组100例,予以中医护理干预.观察两组生化指标达标情况、生活行为改变情况及患者满意度.结果干预前,两组各项生化指标差异均无统计学意义(均P>0.05);干预后,观察组血压、血脂及血糖达标率分别为92.0%、100.0%、98.0%,均高于对照组的75.0%、88.0%、77.0%,两组差异均有统计学意义(x^2=10.49、12.77、20.16,均P<0.01).干预前,两组生活行为情况差异均无统计学意义(均P>0.05);干预后,观察组健康饮食、适当运动、保持心情舒畅及遵医嘱用药率分别为93.0%、88.0%、98.0%、90.0%,均高于对照组的75.0%、60.0%、77.0%、70.0%(x^2=12.06、20.37、20.16、12.50,均P<0.01);观察组患者总满意率(95.0%)高于对照组(77.0%)(x^2=13.46,P<0.01).结论在社区慢性病健康管理中,中医护理干预应用效果较佳,可显著改善患者生活行为,利于病情康复.; 王爱芬王公明; 关键词：慢性病社区保健护理健康管理

用于包装复制缺陷性腺病毒的低代次293细胞的培养被引量：2: 2006年; 目的:建立体外培养低代次293细胞的方法。方法:细胞复苏,将冻存的低代次293细胞于37℃水浴中快速融解,移入75cm^2细胞培养瓶中,加入10mL低代次293细胞培养基,6～8h细胞贴壁后更换培养基。细胞传代,吸出培养基,用1×柠檬酸盐细胞消化液洗2遍,留取0.5mL37℃消化5～10min,待细胞脱壁后加入3mL培养基,轻轻吹匀以1∶2比率传代培养。细胞冻存,以1×柠檬酸盐细胞消化液消化5～10min,细胞脱壁后加入5mL细胞培养基中和消化液,离心收集细胞,以1mL的细胞冻存液(90%FBS+10%DMSO)重悬、冻存。结果:细胞传代后8h细胞完全贴壁;以腺病毒感染质粒感染293细胞14d后可观察到腺病毒空斑形成。结论:该方法操作简便,对细胞损伤小且保持细胞生物学特性不变。; 王公明田玉科田学愎陈建平安珂杨辉; 关键词：细胞培养技术

右旋美托咪啶复合颈丛阻滞在颈椎前路手术中的应用: 目的观察右旋美托咪啶复合颈丛阻滞对颈椎前路手术的麻醉效果。方法择期颈椎前路手术患者30例,随机分为两组,对照组(盐水组)和DEX组,每组15例。DEX组首先给予DEX 0.5μg/kg负荷量,再以0.3μg·kg·h维持...; 王公明; 文献传递

携带NR2B抗原表位的表达载体的构建与鉴定: 2006年; 目的构建携带N-甲基-D-天门冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)2B亚基抗原表位的表达载体并进行初步鉴定。方法在获得NMDAR2B(NR2B)抗原模拟表位碱基序列TCGCATCCGCCTGTGATGCCTTGGCC-TACTTCGACT的基础上,设计两条含起始密码子、终止密码子、双酶切位点的互补引物,应用PCR技术合成该表位,与表达载体pDC515重组为pDC515/nr2b,采用限制性内切酶酶切及DNA测序进行鉴定。结果经限制性酶切鉴定及DNA测序分析证实pDC515/nr2b含有NR2B抗原模拟表位片段。结论成功构建了含有NR2B模拟抗原表位的表达载体,为进一步研制NR2B抗原表位的DNA疫苗及其镇痛效应奠定了实验基础。; 陈建平田玉科王公明田学愎; 关键词：N-甲基天冬氨酸表位受体基因表达

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王公明

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