王新超 作品数:167 被引量:1,393 H指数:22 供职机构: 中国农业科学院茶叶研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 经济管理 更多>>
茶树CsCIPK20基因在提高植物抗寒性中的应用 茶树CsCIPK20基因在提高植物抗寒性中的应用,属于生物基因工程和植物遗传育种技术领域。本发明首次揭示了茶树CsCIPK20基因正调控植物的抗寒性。通过在拟南芥中过表达该基及在茶树中沉默该基因进行生物学功能验证,证明所... 王璐 邸太妹 王新超 杨亚军 郝心愿 李娜娜文献传递 植物SWEET家族糖转运蛋白及其上游调控因子 2024年 SWEET (sugars will eventually be exported transporter)是植物中一类重要的糖转运蛋白,通过调控蔗糖、果糖、葡萄糖、半乳糖等糖类物质的跨膜运输,介导植物根、茎、叶、花、果实、种子等器官中糖类物质的转运、积累和贮存,以参与植物各组织的生长发育和逆境胁迫的响应等生理过程。近年来,随着植物中SWEET蛋白功能的明晰,其上游调控机制的研究逐渐增加,其参与的调控网络也被逐步解析。本文总结了植物中SWEET蛋白的主要功能和近几年来其上游调控因子的研究进展,并对SWEET基因家族的研究提出了展望,旨在为进一步揭示SWEET糖转运蛋白的作用机制及其参与的分子调控网络提供参考。 王洁 吴叶蝶 杨亚军 王新超 王璐关键词:转录因子 茶树胆碱单加氧酶CsCMO的克隆及甜菜碱合成关键基因的表达分析 被引量:15 2013年 【目的】从茶树中克隆甜菜碱(GB)合成途径中的关键酶——胆碱单加氧酶CsCMO,研究不同逆境胁迫和不同抗寒茶树品种间GB合成中关键基因的表达模式,并分析茶树体内GB的含量,为茶树抗性育种奠定基础。【方法】采用反转录PCR结合RACE技术,从茶树中克隆CsCMO的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析,结合前期克隆得到的茶树甜菜碱醛脱氢酶CsBADH,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析这2个基因的表达模式,紫外分光光度计测定GB含量。【结果】克隆得到茶树CsCMO(GenBank登录号:JX050146)的cDNA全长1 558 bp,包含1 305 bp的完整开放阅读框(ORF),编码434个氨基酸,并被定位在叶绿体上。氨基酸序列分析表明,CsCMO含有CMO中保守的Rieske型2Fe-2S结构域和单分子非血红素Fe结合位点,与其它植物CMO序列相似性在50%以上;进化树分析显示,它与枸杞的关系最近。qRT-PCR分析表明,4℃低温、NaCl盐和ABA处理均能诱导CsCMO和CsBADH表达,96 h内随着处理时间的增加,表达量呈增加趋势,但2个基因的表达模式有差异,盐胁迫诱导基因表达更显著;在不同抗寒品种中,2个基因的表达在抗性强的品种中表达量总体要高于抗性弱的品种,且CsBADH的变化比CsCMO的显著。3种胁迫处理48 h后,叶片中的GB含量均增加;低温处理后抗寒性强的品种中GB含量比抗寒性弱的高。【结论】克隆了茶树CsCMO,在低温、NaCl盐以及ABA处理下,GB积累,CsBADH和CsCMO上调表达,且盐胁迫下的表达更明显,表明GB与茶树抵御这3种胁迫关系密切。 曹红利 岳川 郝心愿 王新超 杨亚军关键词:茶树 实时荧光定量PCR 非生物胁迫 茶树1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶特异表达序列标签及其生物芯片 本发明公开了一种茶树1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶特异表达序列标签及其生物芯片。表达序列标签具有SEQ ID No.1所示的序列;所示序列的互补序列或同源序列;所示序列中8~100个连续核苷酸为探针的序列或其互补序列。运... 陈亮 王新超 赵丽萍 高其康文献传递 茶树基因芯片的研制和初步应用 利用EST计划获得的1680个基因片段,制备了国内外首张茶树cDNA芯片, 芯片上每个基因设置一个重复,共含有6912个点,其中6720个靶基因,160个阳性对照,32个阴性对照。4×4矩阵点制,共两个区域,每个区域的芯... 赵丽萍 高其康 陈亮 王新超 姚明哲关键词:茶树 CDNA芯片 基因表达谱 定量PCR 文献传递 茶树己糖激酶CsHXK3基因在调控植物生长发育和增强抗寒能力中的应用 茶树己糖激酶CsHXK3基因在调控植物生长发育和增强抗寒能力中的应用,属于生物基因工程技术领域。本发明包括茶树己糖激酶CsHXK3基因在调控植物生长发育和增强抗寒能力中的应用;一种利用茶树己糖激酶CsHXK3基因调控拟南... 李娜娜 王璐 张可欣 王新超 杨亚军安吉白茶正常与白化叶片基因表达差异的初步研究 被引量:17 2008年 用mRNA差别显示技术(DDRT-PCR)研究了茶树温敏突变体——安吉白茶正常叶片和白化叶片的基因表达差异。从58个差异表达的片段中通过半定量RT-PCR鉴定出12个阳性片段,其中5个片段在正常叶片中特异表达,4个在白化叶片中特异表达,1个在绿色叶片中上调表达,2个在白化叶片中上调表达。通过与GenBank BLASTX比对分析,5个基因片段比对出相似序列,分别为拟南芥的血红素结合蛋白家族中心区域基因、甜菜的甲硫氨酸合酶基因、苜蓿的一个逆转座子基因、人类20号染色体上的一段3-磷酸甘油醛脱氢酶假基因和玫瑰的ACC合成酶基因,其余7个片段未比对上同源序列,可能为新基因。 王新超 赵丽萍 姚明哲 陈亮 杨亚军关键词:安吉白茶 白化 基因表达差异 MRNA差别显示 茶树钙依赖性蛋白激酶基因CsCDPK17的鉴定及表达分析 被引量:8 2019年 钙依赖型蛋白激酶(Calcium-dependent protein kinases,CDPKs或CPKs)是植物细胞中重要的钙离子信号受体,普遍参与了植物生长发育和胁迫响应等调控过程。本研究从茶树龙井43中克隆到1条CDPK基因,经测序验证该序列包含1611bp的完整ORF,编码536个氨基酸。结合序列比对和进化分析发现该蛋白N-末端具有豆蔻酰化位点,具备钙依赖性蛋白激酶的保守结构域,并且与拟南芥AtCDPK17的同源关系最近,因此命名为CsCDPK17(Genbank登录号为:MK238482)。蛋白质理化特性分析发现其蛋白分子量为59.9kD,理论等电点pI为5.43,属无跨膜结构域的亲水性蛋白。使用水稻原生质体和烟草叶片两种瞬时表达的方法均证明CsCDPK17是细胞质膜和细胞核双定位蛋白。对克隆到的CsCDPK17上游2000bp的启动子区分析发现了多个与基因转录、光、激素(ABA、SA、MeJA等)相关的顺式作用元件。表达分析显示,CsCDPK17在成熟叶和种子中表达水平较高,而在根中的表达水平最低;在龙井43、大面白等4个品种冷驯化过程中,该基因的表达随着冷驯化过程显著上调,随着脱驯化过程下调;同时还发现CsCDPK17能够不同程度地响应低温(最高5.1倍)、干旱(最高2.3倍)、渗透(最高2.4倍)胁迫。本研究的结果表明CsCDPK17在茶树的生长发育和低温、干旱、渗透等非生物胁迫响应的过程中均发挥一定的调控作用。 雷蕾 王璐 姚丽娜 郝心愿 曾建明 丁长庆 王新超 杨亚军关键词:茶树 亚细胞定位 非生物胁迫 茶树甜菜碱醛脱氢酶基因(CsBADH1)的全长cDNA克隆与表达分析 甜菜碱是一种能在逆境下大量积累的无毒性渗透相溶物质,而甜菜碱醛脱氢酶(BADH)是甜菜碱合成途径中的关键酶之一。本实验采用SMART-RACE技术获得了茶树甜菜碱醛脱氢酶基因的全长cDNA序列,命名为CsBADH1 (G... 曹红利 郝心愿 岳川 马春雷 王新超 杨亚军关键词:茶树 冷驯化 茶树CsASR基因的克隆及其表达分析 被引量:3 2017年 逆境胁迫影响茶树生长发育及茶叶品质,ASR(abscisic acid,stress,ripening-induced)基因在植物抗逆响应中具有重要功能。本研究以龙井43品种茶树为材料,从中克隆了CsASR基因的全长cDNA序列、基因组序列及其启动子序列,分析了该基因的生物信息学特征及在组织间和不同胁迫处理下的表达模式。结果显示,CsASR的cDNA序列全长875 bp,含有546 bp的ORF序列,编码181个氨基酸,蛋白质分子量19.89 kD,理论等电点5.69;CsASR蛋白结构序列中74.5%的序列为无序结构,是一种无序蛋白;CsASR的C-端含有ABA/WDS功能结构域,主要定位于细胞质和细胞核中;茶树CsASR与海枣的ASR相似性最高,为87%,而在进化树中与枣的关系最近。CsASR基因含2个外显子,第1个外显子长363 bp,第2个外显子长183 bp,内含子较大为2 750 bp,内含子中含7种简单重复序列和2种DNA转座子序列。克隆获得起始密码子ATG上游2 554 bp的启动子区序列,该启动子上含有干旱、低温、高温以及ABA等相关的顺式作用元件。CsASR在根中的表达量最低;ABA抑制CsASR的表达,而干旱、NaCl和低温胁迫能够显著上调CsASR的表达。表明CsASR基因可能与茶树抗逆密切相关。 岳川 曹红利 郝心愿 郭玉琼 叶乃兴 王新超 杨亚军关键词:茶树 逆境胁迫 基因克隆