王灿
- 作品数：32 被引量：49H指数：4
- 供职机构：上海市食品药品检验所更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 唾液酸对人卵泡刺激素生物活性评价的影响被引量：2
- 2020年
- 为了研究唾液酸对人卵泡刺激素(hFSH)生物活性的影响,本试验采用基于人卵巢颗粒样肿瘤细胞(KGN)的体外生物活性测定法和雌幼大鼠卵巢增重的体内生物活性测定法,测定经唾液酸酶酶切处理前后的重组人卵泡刺激素(rhFSH)和高纯度尿提取人卵泡刺激素(uhFSH)的体外、体内生物活性。结果表明,经唾液酸酶酶切处理后的rhFSH和uhFSH体内生物活性均丧失,并且唾液酸含量与hFSH体外生物活性呈负相关。通过进一步研究唾液酸酶酶切前后hFSH刺激与转染卵泡刺激素受体的中国仓鼠卵巢细胞(FSHR-CHO)中环磷酸腺苷(cAMP)生成量的关系,观察到唾液酸含量越低,cAMP生成量越高,为研究hFSH中唾液酸含量对其生物活性的影响提供参考。
- 汪泓王灿王自强陈钢邵泓
- 关键词：唾液酸体外生物活性
- 利用SIE转录活性荧光素酶报告基因系统检测白细胞介素6受体拮抗剂的生物活性
- 目的：利用SIE转录活性荧光素酶报告基因系统检测白细胞介素6受体拮抗剂的生物活性.
方法：采用脂质体转染法将含有SIE转录因子组件及荧光素酶报告基因的质粒pGL4.47转入293T细胞,并通过潮霉素压力筛选获得...
- 王自强王灿董闪闪邵泓陈钢
- 关键词：药物化学生物活性
- 利用SIE转录活性荧光素酶报告基因系统检测白细胞介素6受体拮抗剂的生物活性
- 2018年
- 目的:利用sis诱导元素(sis-inducible element,SIE)转录活性荧光素酶报告基因系统检测白细胞介素6(IL-6)受体拮抗剂的生物活性。方法:采用脂质体转染法将含有SIE转录因子组件及荧光素酶报告基因的质粒pGL 4.47转入293T细胞,并通过潮霉素压力筛选获得稳定转染细胞株。加入IL-6激活稳转细胞株中的荧光素酶报告基因,构建SIE转录活性荧光素酶报告基因系统,并进一步建立基于此系统的IL-6受体拮抗剂药物的生物学活性定量检测方法。结果:IL-6可激活293T-SIE稳定转染细胞中的荧光素酶报告基因,且具有量效关系。对此系统检测IL-6受体拮抗剂药物的生物学活性进行方法学验证,显示本检测方法准确性及重复性均较好。结论:建立了一种基于荧光素酶报告基因系统的IL-6受体拮抗剂药物生物学活性检测方法,与现有方法相比,具有耗时少、准确性高、重复性好的优势。
- 王自强王灿董闪闪邵泓陈钢
- 关键词：荧光素酶报告基因生物学活性
- HL60-IL6单核细胞活化反应测定法在细菌内毒素工作标准品效价测定中的应用
- 2020年
- 目的将HL60-IL6单核细胞活化反应测定法应用于细菌内毒素工作标准品的效价测定中。方法将细菌内毒素国家标准品作为标准品,细菌内毒素工作标准品作为待标品,按《美国药典》<1033>生物检定方法验证指导原则进行方法学验证,验证指标包括专属性、相对准确度、精密度、线性和范围。采用经验证的HL60-IL6单核细胞活化反应测定法对细菌内毒素工作标准品进行效价测定,并比较与其标示量的一致性。结果专属性考察结果符合可接受标准。相对偏差的置信区间均在-11%~12%内,直线回归方程斜率在0.8~1.25内,中间精密度均低于20%,线性相关系数为0.967,大于0.95,均符合可接受标准。相对效价水平范围为0.64~1.56。采用经验证的HL60-IL6法进行7次效价测定结果的平均值为每支81.9 EU,置信区间为每支75.04~89.36 EU,与标示值(每支80 EU)一致。结论采用HL60-IL6法进行内毒素工作标准品效价测定的结果与其标示量一致,该法可用于细菌内毒素工作标准品的效价测定。
- 王鸣人段徐华王灿郑璐侠邵泓陈钢
- 关键词：效价测定《美国药典》
- ELISA法测定甲型H1N1流感病毒裂解疫苗中卵清蛋白含量的不确定度分析被引量：3
- 2012年
- 目的:对ELISA法测定甲型H1N1流感病毒裂解疫苗中卵清蛋白含量不确定度进行评定分析。方法:按照卵清蛋白检测试剂盒说明书对甲型H1N1流感病毒裂解疫苗中卵清蛋白含量进行测定。根据《测量不确定度评定与表示》(JJF1059-1999)中有关规定对测量结果中带来的各个不确定度进行分析、评定和量化。结果:量化各个不确定度分量,提出了该法的合成不确定度评估结果。结论:该法测定甲型H1N1流感病毒裂解疫苗中卵清蛋白含量的扩展不确定度U=0.68 ng.mL-1(k=2)。
- 王灿陆明吴利红邵泓陈钢
- 关键词：酶联免疫吸附试验甲型H1N1流感病毒裂解疫苗不确定度
- 肝水解肽生物学活性测定方法的应用
- 2013年
- 目的:评价近年上市的肝水解肽生物学活性质量及其活性测定方法的应用。方法:应用正常人肝L02细骨包/WST-8比色法测定不同厂家的肝水解肽生物学活性,比较各个厂家产品质量以及评价该生物学活性测定法的应用情况。结果:共测定了10个厂家43批肝水解肽生物学活性,其中35批产品具有促进肝细胞生长的生物学活性,4个厂家的8批产品无促进肝细胞生长的生物学活性。不合格产品中有1个厂家的2批产品已过效期,3个厂家的6批产品均在效期内。结论:该法可用于肝水解肽生物学活性的测定,是否在有效期内对样品的活性无明显影响。
- 王灿吴利红林上炎邵泓陈钢
- 关键词：肝水解肽
- HL60-IL6法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用研究被引量：1
- 2020年
- 目的探讨HL60-IL6单核细胞活化反应法在注射用胶原酶和尿激酶热原检测中的应用。方法参照中国药典2015年版通则1193,确定注射用胶原酶和尿激酶最小有效稀释浓度。通过细胞增殖抑制试验、热原干扰试验和白介素-6(interleukin-6,IL-6)干扰试验探讨对HL60细胞生长,对热原和IL-6测定无影响的供试品浓度,进而确定适用于注射用胶原酶和尿激酶体外热原测定的HL60-IL6方法。用该方法对2批注射用胶原酶、19批注射用尿激酶供试品进行热原测定。结果注射用胶原酶最小有效稀释浓度为0.04U·mL^-1,当浓度≤60U·mL^-1时对HL60细胞生长无影响,浓度≤6 U·mL^-1时对IL-6和热原测定无影响。注射用尿激酶最小有效稀释浓度为100 U·mL^-1,当浓度≤1 000 U·mL^-1时对HL60细胞生长无影响,浓度≤500U·mL^-1时对IL-6和热原测定无影响。因此,适合HL60-IL6单核细胞活化反应法的注射用胶原酶和尿激酶浓度分别为6,500U·mL^-1。用该方法对供试品进行热原测定,结果均未检出热原。结论 HL60-IL6方法适用于注射用胶原酶和尿激酶热原测定。
- 王灿王鸣人郑璐侠邵泓陈钢
- 关键词：胶原酶尿激酶
- 酶联免疫法检测绒促性素和尿促性素中乙肝表面抗原的规范化被引量：1
- 2011年
- 目的:规范检测绒促性素(HCG)和尿促性素(HMG)中乙肝表面抗原(HBsAg)的酶联免疫方法。方法:用5个厂家生产的HBsAg诊断试剂盒,按各厂家试剂盒说明书进行操作,分别检测3个厂家生产的11批HCG和2个厂家生产的8批HMG中的HBsAg,同时进行回收率试验。结果:5个厂家生产的试剂盒检测HCG中HBsAg的回收率为66%～125%,平均回收率为88%,HMG中HBsAg的回收率为64%～101%,平均回收率为84%。结论:用HBsAg诊断试剂盒(酶联免疫法)检测HCG和HMG中HBsAg的同时必需进行回收率试验,回收率符合要求前提下的检测结果才是可信的。
- 吴利红王灿邵泓陈钢
- 关键词：酶联免疫法乙肝表面抗原
- 一种细胞系法检测热原的方法及其试剂盒
- 本发明公开了一种细胞系法检测热原的方法和试剂盒。所述的方法包括以下的步骤：(1)制备热原物质的标准溶液和待检样品的溶液；(2)将步骤(1)所述的热原物质的标准溶液或待检样品的溶液分别加入含有HL‑60细胞的细胞培养液中培...
- 陈钢王灿邵泓吴利红董闪闪
- 文献传递
- 一种细胞系法检测热原的方法及其试剂盒
- 本发明公开了一种细胞系法检测热原的方法和试剂盒。所述的方法包括以下的步骤：(1)制备热原物质的标准溶液和待检样品的溶液；(2)将步骤(1)所述的热原物质的标准溶液或待检样品的溶液分别加入含有HL-60细胞的细胞培养液中培...
- 陈钢王灿邵泓吴利红董闪闪
- 文献传递
