程希平 作品数:20 被引量:85 H指数:6 供职机构: 第四军医大学基础医学部神经科学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 陕西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
EGCG对羟自由基损伤小鼠胚胎海马神经元的保护作用 被引量:2 2005年 为了探讨表没食子儿茶素没食子酸酚(tea polyphenol(-)-epigallocatechin gal-late,EGCG)对羟自由基损伤小鼠海马神经元的保护作用,采用原代细胞培养技术,分离培养18 d小鼠胚胎海马神经元,培养4 d后,加入FeSO4和H2O2进行处理,随后加入不同浓度的EGCG培养24 h,通过观察细胞的形态学变化,四甲基偶氮唑盐(methylthiazolydi-phenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法分析细胞活性,检测神经元中丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)以及培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量的变化,以探讨EGCG对羟自由基损伤神经元的保护作用。结果显示,EGCG能够抑制神经元MDA的产生,降低神经元细胞外液中LDH的含量,增加细胞的活性,从而进一步证明EGCG能够清除羟自由基产生,减轻羟自由基对神经元损伤,对神经元的存活有一定的保护作用,为其用于治疗中枢神经系统病理性损伤的打下实验基础。 杨浩 李静雯 罗娜 程希平 鞠躬关键词:细胞培养 海马 羟自由基 脊髓损伤的炎症和免疫反应 <正> 脊髓损伤是一种后果极为严重的创伤,通常造成伤后即刻脊髓损伤中心不可逆转的原发性损伤。数小时至数天内,原发性损伤启动一系列生化级联反应,导致损伤区组织缺血、炎症和免疫反应、星形胶质细胞反应、兴奋性毒性、轴突损伤及细... 程希平 游思维快速高效质粒转化方法的研制 被引量:5 1998年 肖华胜 程希平 张萍 陈镔复 鞠躬关键词:质粒转化 分子生物学 酪氨信号放大间接免疫荧光组织化学方法 被引量:2 2001年 鲍岚 焦西英 程希平 张旭关键词:荧光抗体技术 激光 显微镜检查 细胞形态学 Nogo-A在成年大鼠脊髓和背根节的分布 被引量:6 2005年 目的研究NogoA在成年正常大鼠脊髓和背根节的分布。方法免疫组织化学方法(ABC法)和免疫荧光双标记法。结果正常成年大鼠的脊髓灰质分布有大量的NogoA免疫阳性的寡突胶质细胞、运动神经元和中间神经元,免疫阳性反应产物主要分布于细胞的胞体和部分突起中。NogoA广泛分布于穿行于脊髓白质的纤维包裹的髓鞘和轴突上。在脊髓前根、后根和坐骨神经的运动和感觉的有髓和无髓纤维也可观察到NogoA的表达。而背根神经节的神经元也大量表达NogoA,其强度由弱至强不等,广泛分布于大、中、小各类感觉神经元的胞质及突起中。结论NogoA在成年大鼠脊髓,背根神经节和外周神经纤维的广泛存在提示其在正常状态下的神经功能中可能起重要作用。 程希平 刘惠玲 宋朝君 金伯泉 焦西英 游思维 鞠躬关键词:背根神经节 外周神经 髓鞘 大鼠NPYY2受体基因的克隆及C端肽的表达和纯化 2000年 Y2受体亚型是早期发现的NPY的两种主要受体亚型之一 ,参与NPY所介导的多种生理和病理功能 .为了制备Y2受体抗体和开展Y2受体的定位研究 ,用RT PCR方法从大鼠海马的总RNA扩增NPY的Y2受体全长基因 ,接着PCR扩增Y2受体的C端片段 ,克隆入表达载体中 ,建立了重组NPYY2受体C端肽的表达菌株 。 程希平 肖华胜 黄文晋 张萍 鞠躬 张旭关键词:克隆 大鼠心脏中神经肽Y的Y1受体样免疫反应物质的定位 被引量:4 2001年 目的 为在细胞水平精确地确定神经肽 Y(NPY)的Y1 受体样免疫反应物质 (- L I)在大鼠心脏中的分布 .方法 用免疫组织化学方法对 Y1 受体 - L I细胞进行了检测 .结果 1一些心肌细胞含有 Y1 受体 - L I,可见清晰的 Y1 受体免疫反应性 (- Ir)条纹 ,此类细胞在心脏呈斑点状分布 ,接近外膜侧和室间隔的内膜侧分布较多 ,Y1 受体 - L I主要分布于心肌细胞膜、横小管膜和小泡上 ;2心脏内有 Y1 受体 - L I的心内神经元 ,此类细胞有较长的突起 ,呈离散分布 ,与 Y1 受体 - L I心肌细胞或血管相邻 ,Y1 受体 - L I神经元的外膜和胞质内有较强的 Y1 受体 - L I,尤以其突起明显 .结论 NPY对心脏作用的复杂性可能与 Y1 鲍岚 张平 程希平 张旭关键词:心脏 成年大鼠嗅神经鞘细胞纯化培养的研究 被引量:9 2005年 嗅神经鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)是目前用于神经再生研究较为理想的移植细胞,为了建立一种可以有效获得高纯度、高均一性的OECs培养方法,本实验采用2. 5月的大鼠嗅球为实验材料进行OECs培养,同时结合OECs的生物学特点在培养8d后,通过用硝酸纤维素膜吸附p75抗体,再对培养的OECs进行免疫亲和吸附和对成纤维细胞进行补体杀伤来纯化OECs, 在纯化后分别对培养2、4、6、8d的OECs进行p75免疫组化染色和纯度鉴定。实验结果发现,本研究采用的OECs纯化培养方法所获得OECs纯度在4个不同培养时间点都达到98%以上,说明此方法是一种高效率的纯化培养OECs的方法。 杨浩 鞠冬阳 李静雯 程希平 游思维 鞠躬关键词:成年大鼠 嗅神经鞘细胞 纯化培养 细胞培养 中枢神经系统损伤 神经移植 次声对大鼠大脑皮层神经元型NOS和诱导型NOS mRNA表达的影响 被引量:3 2000年 目的 探讨次声作用于大鼠后 ,大脑皮层神经元型一氧化氮合酶 (n NOS)和诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)表达的变化 .方法 雄性 SD大鼠放入次声舱 ,经 8Hz,12 0 d B作用2 h,每日 1次 ,分别于 1,7和 14d处死动物 ,取大脑皮层提取总 RNA进行 RT- PCR,以未经次声作用的作为对照 ,检测n NOS和 i NOS m RNA表达的变化 .结果 次声连续作用 7,14d后 ,n NOS m RNA表达明显降低 ,次声作用 1d后 ,i N-OS开始表达 ,7d后仍有表达 .14d后未见表达 .结论 次声作用于大脑皮层后 n NOS m RNA表达降低 ,次声可诱导 i-NOS m RNA的表达 . 肖华胜 薛泳涛 张萍 贾克勇 程希平 黄文晋 陈镔复 陈景藻 鞠躬关键词:次声 一氧化氮合酶 NNOS INOS 运用图像处理软件将同视野两种单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法研究 被引量:1 2005年 探讨以计算机图像处理技术将普通荧光显微镜采集的同视野单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法。应用AdobePhotoshop7.0和ImageJ两个图像处理软件,将普通荧光显微镜采集的同视野单标记荧光图像叠加处理成双标记荧光图像,并同激光扫描共聚焦显微镜获得的同一双标记免疫荧光图像进行比较。普通荧光显微镜采集的单标记荧光图像在分辨率及清晰度上逊于激光扫描共聚焦显微镜采集的单标记图像,但显示的脊髓室管膜细胞形态更为完整,细胞突起较长且更连续。因此,在没有激光扫描共聚焦显微镜时,可用AdobePhotoshop7.0或ImageJ图像处理软件将普通荧光显微镜采集的同视野两种单标记免疫荧光图像合成为保持原有特点、简便而清晰的双标记荧光图像。 焦西英 程希平 郎兵 张萍 王百忍 鞠躬 游思维关键词:图像处理软件