胡红梅
- 作品数:4 被引量:8H指数:1
- 供职机构:泸州医学院更多>>
- 发文基金:四川省教育厅资助科研项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 精原干细胞在成骨培养条件下的生物学特征被引量:1
- 2007年
- 目的:观察小鼠精原干细胞在成骨培养条件下的生物学特征,为探讨精原干细胞的多向分化能力提供实验依据。方法:实验于2006-03/2007-01在泸州医学院医学分子生物学实验室完成。①实验材料:生后6~8d左右昆明系小白鼠,雌雄均可,由泸州医学院动物科提供。②实验方法:取7~10d小白鼠双侧股骨和胫骨,制备骨髓基质饲养层。取6~8d雄性小鼠,脱颈椎处死后,无菌取出睾丸,进行精原干细胞分离、培养与鉴定。取培养3d的精原干细胞,分为两组:对照组用基本培养液(IMDM+100U/mL青霉素+100U/mL链霉素+10%胎牛血清)培养,实验组用条件培养液培养(基本培养液中添加50mmol/Lβ-甘油磷酸钠、10-6mol/L地塞米松、50mg/L维生素C、50nmol/L胰岛素、20nmol/L碱性成纤维细胞生长因子)培养。③实验评估:在倒置显微镜下观察细胞的形态学变化、紫外分光光度仪动态检测上清液中碱性磷酸酶活性变化、免疫荧光法检测细胞内Ⅰ型胶原的表达。结果:①细胞形态学特征变化:实验组精原干细胞在成骨条件培养液中较对照组细胞贴壁生长快,条件培养3~6d后见细胞生长迅速,呈集落样增长,细胞立体感增强,但未见明显细胞间桥;诱导培养15d见细胞增殖达高峰,增殖细胞的胞质间桥仍不明显。②Ⅰ型胶原免疫荧光检测结果:实验组细胞浆内出现绿色荧光,呈阳性反应,对照组细胞呈阴性反应。③培养上清液碱性磷酸酶活性变化:实验组与对照组培养上清液中的碱性磷酸酶活性开始很低,以后逐渐增强。实验组培养上清液的碱性磷酸酶活性每个时间段都明显高于对照组(P<0.05)。结论:小鼠精原干细胞在成骨诱导培养条件下能快速增殖,增殖过程中表现出成骨细胞的某些生物学特征,这为进一步研究精原干细胞的多向分化潜能提供实验参考。
- 胡红梅徐富翠李伟吴绍华
- 关键词:精原干细胞细胞培养成骨细胞生物学特征
- 小鼠睾丸支持细胞的体外分离和纯化被引量:6
- 2006年
- 目的寻求简便经济的方法分离纯化小鼠睾丸支持细胞,提高其获取量。方法用0.1%的胶原酶和0.25%的胰蛋白酶次第消化准备7-8天小鼠生殖细胞悬液,置于37℃,5%CO2孵箱内培养,4小时后换液,24小时后向培养板内加入20 mmol Tris-HCl低渗处理3分钟,去除精原细胞,即得到高纯度的支持细胞。结果在小鼠睾丸支持细胞的分离培养中,支持细胞占培养细胞90%以上。结论应用本实验方法分离小鼠睾丸支持细胞获得成功并简化了国内现行的分离方法。
- 周燕吴绍华余鸿胡红梅
- 关键词:小鼠支持细胞纯化
- 精原干细胞在成骨培养条件下生物学特征的研究
- 目的:研究小鼠精原干细胞在成骨培养条件下的生物学特征变化,为探讨精原干细胞的多向分化能力提供实验依据。方法:(1)骨髓基质细胞饲养层制备:选取生后7~10 d 昆明系小白鼠(雌雄不限),断头处死后,用1 ml 注射器冲出...
- 徐富翠胡红梅吴绍华
- 文献传递
- 生长因子对精原干细胞增殖、分化影响的研究现状被引量:1
- 2006年
- 胡红梅李伟吴绍华
- 关键词:干细胞增殖分化精原干细胞睾丸曲细精管有丝分裂CELL