董银苹
- 作品数：11 被引量：65H指数：6
- 供职机构：国家食品安全风险评估中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 乳酸杆菌及嗜热链球菌脉冲场凝胶电泳分子分型方法建立及应用
- 2011年
- 目的 建立乳酸杆菌及嗜热链球菌的PFGE分子分型方法,并对北京市售酸奶中分离的乳酸杆菌及嗜热链球菌进行分子分型.方法 选取ApaⅠ、NotⅠ、sfiⅠ、XbaⅠ和SmaⅠ共5种PFGE分析中常用的限制性内切酶,对从北京市售酸奶中分离到的52株乳酸杆菌、嗜热链球菌以及相应的标准菌株进行酶切,优化PFGE限制性内切酶种类及电泳条件,并用优化出的实验条件对菌株进行分子分型,同时进行聚类分析,与生化鉴定及16s rRNA基因鉴定结果进行对比分析.结果 限制性内切酶NotⅠ对保加利亚乳酸杆菌、发酵乳酸杆菌和德氏乳酸杆菌的酶切效果较好,而限制性内切酶Apa Ⅰ对嗜热链球菌、嗜酸乳酸杆菌及干酪乳酸杆菌的酶切效果较好.24株保加利亚乳酸杆菌被分为8个PFGE型,15株嗜热链球菌被分为8个PFGE型,7株嗜酸乳酸杆菌被分为3个PFGE型,2株德氏乳酸杆菌分属于2个不同的PFGE型.结论 建立的PFGE方法分析结果与生化鉴定及16s rRNA基因鉴定结果高度符合,所建方法适用于乳酸杆菌及嗜热链球菌的分子分型.
- 董银苹崔生辉于红霞李凤琴
- 关键词：细菌分型技术
- 中国和新西兰来源生胞梭菌的动物毒性比较及脉冲场凝胶电泳分子分型研究被引量：3
- 2016年
- 目的分别采用中国和新西兰两国两种不同的试验方法,对我国从相关企业送检的新西兰召回批次浓缩乳清蛋白粉、用问题浓缩乳清蛋白粉生产的婴幼儿配方粉和北京市市售婴幼儿配方粉样品中分离的生胞梭菌,以及新西兰初级产业部从问题批次浓缩乳清蛋白粉分离的11株生胞梭菌对实验动物的毒性作用差异及菌株同源性进行研究。方法将菌株培养物离心过滤除菌后,分别腹腔注射和经口灌胃ICR小鼠,观察小鼠的中毒反应及死亡情况,同时对菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。结果所有菌株培养物腹腔注射小鼠后,小鼠均出现呼吸急促继而猝死的中毒表现,死亡时间多在染毒后10 min内,而经口灌胃小鼠无中毒和死亡;PFGE结果显示,虽然来源不同,但从问题批次浓缩乳清蛋白粉及其相关产品中分离的10株生胞梭菌均为同一PFGE型,而分离自北京市市售婴幼儿配方粉的1株生胞梭菌为另一PFGE型。结论 10株分离自问题批次浓缩乳清蛋白粉及以其为原料生产的婴幼儿配方奶粉的生胞梭菌致动物中毒和死亡表现无差别,且10株生胞梭菌均为同一PFGE型,说明菌株来自同一污染源。
- 董银苹李志刚李凤琴
- 关键词：毒性脉冲场凝胶电泳分子分型同源性
- 乳酸杆菌分离鉴定技术研究进展被引量：20
- 2008年
- 乳酸杆菌(Lactobacillus)作为一种重要的益生菌在食品工业中的应用日益广泛,鉴于乳酸杆菌的作用及其安全性具有株的特异性,菌种的正确使用是保障其产品食用安全性的重要基础。表型和基因型分析是目前乳酸杆菌鉴定的重要技术。本文就乳酸杆菌的分离培养技术及其属、种、株水平上鉴定技术的研究进展进行综述。
- 董银苹于红霞李凤琴
- 关键词：乳酸杆菌食品微生物学
- 乳酸杆菌及嗜热链球菌的种水平鉴定——16SrRNA基因PCR扩增及序列分析被引量：9
- 2010年
- 目的建立鉴定乳酸杆菌及嗜热链球菌的16SrRNA基因PCR方法。方法优化细菌DNA提取方法及PCR反应条件,将细菌16SrRNA基因的PCR产物克隆到质粒载体上并进行序列分析,以对乳酸杆菌酸奶分离株进行鉴定。结果 16SrRNAPCR鉴定方法将50株益生菌酸奶分离株分为7个种,分别为:保加利亚乳酸杆菌24株、嗜热链球菌12株、嗜酸乳酸杆菌7株、干酪乳酸杆菌3株、德氏乳酸杆菌2株、发酵乳酸杆菌1株及巴黎链球菌1株。结论建立的16SrRNA基因PCR方法灵敏、可靠,适用于乳酸杆菌及嗜热链球菌的鉴定。
- 董银苹崔生辉李凤琴于红霞
- 关键词：乳酸杆菌嗜热链球菌RRNAPCR
- B型婴儿肉毒中毒的实验室诊断被引量：5
- 2016年
- 目的对1例疑似肉毒毒素中毒的婴儿病例灌肠液样品进行实验室检测并确证。方法对患儿的灌肠液样品进行肉毒梭状芽胞杆菌分离及肉毒毒素检测。结果患儿灌肠液样品TPGY培养物腹腔注射小鼠后可致小鼠出现类似肉毒毒素中毒表现(竖毛、呼吸困难并出现典型的蜂腰、四肢麻痹)继而死亡。培养物经胰酶处理后小鼠仍出现中毒并死亡,但培养物经100℃加热处理后再次染毒动物,小鼠不出现中毒和死亡。A、B、C、D、E、F六种混合型肉毒毒素诊断血清及B型单价肉毒毒素诊断血清可对小鼠起到保护作用。患儿灌肠液样品中分离到梭状芽胞杆菌,该菌经表型、生化、PCR肉毒毒素产毒基因鉴定,结果为产B型肉毒毒素的肉毒梭状芽胞杆菌。结论患儿疾病与B型肉毒毒素中毒相关。
- 董银苹李颖徐进王伟江涛韩春卉闫韶飞张迪李凤琴
- 关键词：肉毒毒素食源性致病菌食源性疾病基因检测
- 浓缩乳清蛋白粉及其制品中梭状芽胞杆菌的分离及鉴定被引量：14
- 2015年
- 目的采用多种方法对新西兰进口浓缩乳清蛋白粉及其制品、市售婴幼儿配方粉样品中分离的梭状芽胞杆菌进行鉴定。方法根据分离菌株的生长特性、革兰氏染色、生化反应、普通显微镜和电子显微镜下形态特征等表型特征,结合16S rRNA基因克隆测序及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等结果,对分离菌株进行综合鉴定。结果 78份样品中有16份(20.5%)被梭状芽胞杆菌污染,其中2份为浓缩乳清蛋白粉及其制品,14份为婴幼儿配方粉样品。共分离到梭状芽胞杆菌17株,包括生胞梭菌12株、拜氏梭菌2株,丁酸梭菌2株和第三梭菌1株。结论新西兰进口浓缩乳清蛋白粉及其制品中厌氧微生物污染严重,经鉴定污染的主要微生物为生胞梭菌。
- 董银苹徐进王伟白莉胡骁甘辛闫韶飞李志刚余东敏李凤琴
- 关键词：RRNA基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱婴幼儿配方乳粉
- 生孢梭菌代谢产物对ICR小鼠的毒性研究被引量：7
- 2014年
- 目的研究生孢梭菌代谢产物对ICR小鼠的毒性作用。方法将分离自浓缩乳清蛋白粉及其制品样品中的生孢梭菌分别培养在庖肉肉汤及TPGY肉汤培养基中,将过滤除菌及处理后的培养液分别经灌胃和腹腔注射给予ICR小鼠,观察其中毒及死亡情况。结果生孢梭菌培养液及处理后的培养液经腹腔注射ICR小鼠后均对其有毒性作用,中毒症状表现为小鼠急促呼吸后猝死,死亡时间多集中在10 min内,平均为5~7 min,A-F多价抗肉毒毒素诊断血清对小鼠无保护作用。结论生孢梭菌代谢产物中含有不同于肉毒毒素的有毒代谢产物,腹腔注射可导致ICR小鼠猝死。
- 董银苹韩春卉江涛张宏元王佳慧韩小敏甘辛白莉王伟胡豫杰李凤琴徐进
- 关键词：代谢产物毒性试验食品安全ICR小鼠
- 北京市售酸奶中益生菌的分离鉴定及耐药性检测被引量：9
- 2010年
- 目的对北京市售酸奶中添加的益生菌种类及浓度、益生菌酸奶分离株对6种抗生素(青霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、万古霉素、克林霉素及红霉素)的耐药性进行检测。方法采用直接稀释法分离酸奶样品中的益生菌并进行活菌计数,对分离到的菌株进行革兰染色和生化反应鉴定,同时采用肉汤稀释法测定分离菌株对6种抗生素的最小抑菌浓度。结果用MRS培养基、(36±1)℃、厌氧培养条件下从31种北京市售酸奶样品中共分离出52株菌,其中革兰氏阳性杆菌37株,革兰阳性球菌15株。生化反应鉴定结果将52株菌分为乳酸杆菌和嗜热链球菌2大类共6个种;活菌计数结果显示,12份样品(38.7%)中益生菌计数低于国家标准规定的1×106cfu/ml(g);19份样品(61.3%)中活菌计数符合国家标准规定;所有酸奶样品分离菌株对青霉素,氨苄青霉素均敏感,而对庆大霉素的敏感性较低,1株菌对克林霉素和红霉素耐药,4株菌对万古霉素耐药。结论采集的北京市售酸奶样品大部分产品中添加的益生菌种类及活菌数符合国家标准规定,部分产品生产用菌种对一种或多种抗生素耐药。
- 董银苹崔生辉李凤琴于红霞
- 关键词：酸奶益生菌耐药性
- 我国食品中大肠埃希菌O157耐药及PFGE分子分型特征分析被引量：6
- 2014年
- 目的了解我国食品中分离的110株大肠埃希菌O157的耐药及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型特征,完善我国食品中大肠埃希菌O157菌株特征的基础信息,为该菌的风险评估提供依据。方法使用琼脂稀释法对确认的110株大肠埃希菌O157进行药敏试验,完成耐药特征的分析。参照美国疾病预防控制中心PulseNet试验方法,对110株大肠埃希菌O157,运用XbaⅠ酶进行酶切并完成PFGE分析,利用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析。结果 1110株菌中,43株菌至少对一种抗生素有抗性。耐药率最多的前三种抗生素依次是四环素(30.0%,33/110),磺胺甲恶唑(29.1%,32/110),萘啶酸(26.4%,29/110);2一共有24个耐药谱,耐两种以上抗生素的菌株有34株,耐3种以上抗生素的多重耐药菌株有32株。最常见的三种耐药谱依次是SMX(6),AMP-NAL-SMX-SXT-TET(6),AMP-CHL-NAL-SMX-SXT-TET(4)/AMP-SMX-SXT-TET(4)/TET(4);3大肠埃希菌O157非H7(O157∶hund)对所测试的抗生素的耐药率明显高于大肠埃希菌O157∶H7(χ2=72.010 P<0.05)。其中37株携带了志贺毒素基因的大肠埃希菌O157∶H7仅对磺胺甲恶唑(2.7%,1/37)、萘碇酸(2.7%,1/37)有耐药,没有多重耐药菌株;4通过不同种类食品中大肠埃希菌O157菌株耐药率比较发现,从生猪肉、生禽肉中分离的菌株耐药率相对高于其他食品种类;5PFGE分子分型研究显示菌株具有基因多态性,且可以很好将大肠埃希菌O157非H7和大肠埃希菌O157∶H7菌株区分开。结论我国食品中分离的大肠埃希菌O157耐药现象严重。我们应加强养殖环节和零售环节食源性致病菌,特别是大肠埃希菌O157(包括产志贺毒素大肠埃希菌O157)菌株药敏特征的监测,探明食品与养殖环节菌株耐药的传播关系,并为国家制定科学的养殖业抗生素用药提供依据。
- 白莉郭云昌董银苹王伟杜春明徐进李凤琴
- 关键词：药敏试验脉冲场凝胶电泳耐药分子分型
- 2005-2007年中国食品中大肠埃希菌O157亚碲酸钾抗性基因簇的分布和抗性水平的研究被引量：1
- 2011年
- 目的了解中国2005-2007年食源性疾病监测网分离的大肠埃希菌O157亚碲酸钾抗性基因簇的分布和抗性水平的关系。方法运用PCR方法进行基因检测,使用平皿法检测亚碲酸钾抗性水平。结果在所检测的89株大肠埃希菌O157中,共51株菌携带亚碲酸钾(ter)基因簇:在42株大肠埃希菌O157∶H7中,41株菌具有ter基因簇;6株携带flicH7基因、无动力O157∶NM(non-mobile)都具有ter基因簇;在41株不携带flicH7基因、无动力O157∶NM和O157∶hund(具有动力,无法判定H型别)中仅有4株菌具有ter基因簇。ter基因簇阳性的51株大肠埃希菌O157,其亚碲酸钾抗性水平为64～512μg/ml。ter基因簇阴性菌株共有38株,亚碲酸钾抗性水平大多数介于2～16μg/ml,仅1株为128μg/ml。29株携带志贺毒素基因的大肠埃希菌,共有28株具有该基因簇和较高水平的亚碲酸钾抗性。结论食品来源的大肠埃希菌O157具有不同亚碲酸钾抗性水平,高水平的亚碲酸钾抗性与携带亚碲酸钾基因簇具有很高的相关性。
- 白莉董银苹郭云昌
- 关键词：最小抑菌浓度
