袁聪俐
- 作品数：40 被引量：124H指数：7
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科委重大科技攻关项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 用于猪流行性腹泻病毒检测的引物、探针及试剂盒和方法
- 本发明中公开了用于猪流行性腹泻病毒PEDV检测的引物、探针及试剂盒，同时公开了利用该引物、探针或试剂盒对PEDV检测的RPA‑LFD方法，即利用特异性引物和探针进行重组酶聚合酶扩增RPA，在37℃下反应20min，获得稳...
- 杨志彪廖卓韵周洁文蒋霁捷李晨袁聪俐
- 嗜血支原体：病原学及流行情况研究综述
- 嗜血支原体由附红细胞体及血巴尔通氏体组成，是一种在哺乳动物中广泛传播的一类人兽共患病原。嗜血支原体属于多形态的革兰氏阴性菌，它专性寄生在红细胞表面引起红细胞变形破裂，从而导致贫血黄疸发热等症状。感染附红细胞体的动物引起生...
- 杨志彪袁聪俐余飞华修国
- 关键词：嗜血支原体病原学人兽共患病红细胞
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因荧光定量PCR检测方法及其引物
- 一种生物技术领域的猪传染性胃肠炎病毒S基因荧光定量PCR检测方法及其引物。PCR扩增目的片段，鉴定为阳性的PCR产物，克隆到pMD18-T载体并转化到DH5α感受态细胞，蓝白斑筛选挑取阳性克隆，并进行测序鉴定。提取阳性重...
- 杨志彪顾江萍袁聪俐崔立华修国
- 半套式PCR方法检测猪附红细胞体病的建立被引量：13
- 2006年
- 建立一种客观敏感的附红细胞体病早期实验室诊断方法。本实验采用已公布的附红细胞体序列设计半套式引物进行PCR扩增,对扩增出得特异性条带进行序列分析。镜检结果阳性率为75%,PCR检测结果阳性率为90%,测序结果与已公布的序列同源性达99.9%。半套式PCR方法比镜检高效准确,适合附红细胞体病的早期诊断。
- 袁聪俐杨志彪朱建国崔立华修国
- 关键词：附红细胞体感染率
- 五日热巴尔通体RPA检测方法的建立被引量：1
- 2023年
- 五日热巴尔通体(B.quintana)病原通过人虱的叮咬在人群中传播,导致间歇性发热,头痛及杆菌样血管瘤等临床症状。本研究以五日热巴尔通体gltA为靶标基因,建立重组聚合酶快速扩增方法(RPA)。通过与Bartonella henselae,Bartonella tribocorum,Bartonella vinsonii,Bartonella washoensis及Bartonella grahamii等不同菌种进行对比检测,证实本研究建立的RPA检1测方法仅特异性识别五日热巴尔通体,无种间无交叉反应,该方法检测敏感性为10 copies/μL,与实时荧光PCR检测敏感性相同。因此,本研究建立的五日热巴尔通体RPA检测方法具备高特异性及敏感性的特点,对五日热巴尔通体菌的检测及疾病临床诊断具有重要意义。
- 丁田耘陈琦蔡雨豪王蒙王春艳张浩然袁聪俐
- 关键词：特异性灵敏性
- 自噬抑制细胞焦亡对脓毒症肺损伤的保护作用被引量：9
- 2019年
- 为研究自噬抑制细胞焦亡对脓毒症肺损伤的保护作用,研究先于体外使用盲肠内容物刺激小鼠腹腔巨噬细胞使其发生炎性反应,通过乳酸脱氢酶检测法、酶联免疫吸附(ELISA)法及Western blottin法检测雷帕霉素激活自噬对巨噬细胞发生细胞焦亡的影响。结果发现激活自噬能降低巨噬细胞炎性小体的活化及炎性细胞因子的释放,抑制细胞焦亡。随后对健康C57小鼠构建脓毒症模型,观察雷帕霉素预处理对各组小鼠死亡率的影响,并通过Western blotting检测肺组织中LC3蛋白表达变化,HE染色观察肺组织形态学改变,发现雷帕霉素预处理能够减轻脓毒症小鼠肺组织病理损伤,降低小鼠死亡率。结果表明自噬能够抑制细胞焦亡,对降低脓毒症急性肺损伤具有重要意义。
- 王振霞袁聪俐李岩
- 关键词：脓毒症雷帕霉素自噬肺损伤
- 猪流行性腹泻病毒Nsp8与宿主细胞互作蛋白的筛选及鉴定被引量：3
- 2021年
- 猪流行性腹泻病毒Nsp8是RNA依赖的RNA聚合酶辅助因子,在病毒基因组复制中具有重要作用。为了从宿主细胞蛋白角度了解PEDV Nsp8蛋白的作用,本研究以PEDV感染的宿主细胞LLC-PK1为研究对象,提取LLC-PK1细胞总RNA,利用SMART技术经过反转录、扩增和纯化获得双链cDNAs,将其与pGADT7-Rec和carrier DNA共同转化至酵母Y187菌株,构建LLC-PK1 cDNA酵母文库,对该文库容量及质量进行鉴定。结果显示:本研究构建的LLC-PK1 cDNA文库库容量为2.1×10^7 CFU/mL,插入cDNA片段长度为500~2500 bp;将构建的诱饵质粒pGBKT7-Nsp8与LLC-PK1 cDNA酵母表达文库进行杂交,筛选阳性克隆菌株并测序分析,共获得了8个潜在互作蛋白;将8个蛋白分别与诱饵质粒pGBKT7-Nsp8进行酵母回复杂交验证,有4种宿主蛋白与Nsp8蛋白共转化后能在含X-α-Gal的DDO/X/A和QDO/X/A选择培养基中形成蓝色菌落;选择其中出现频率最高的LDHB蛋白与Nsp8,分别构建含有Flag标签和HA标签的真核表达载体,利用不同的标签抗体进行Co-IP鉴定,发现Nsp8与LDHB蛋白可以发生免疫共沉淀;通过激光共聚焦显微镜观察发现,Nsp8和LDHB蛋白在细胞质中存在明显共定位。本研究结果表明,Nsp8与宿主蛋白LDHB存在相互作用,推测LDHB蛋白可能通过与PEDV Nsp8蛋白在细胞质中的相互作用参与病毒复制的生物学过程。
- 周书亭丁思嘉凌悦廖卓韵王子泓邹霭萱罗渝宵黄梓鑫陈宇翔袁聪俐朱建国崔立杨志彪
- 关键词：猪流行性腹泻病毒CDNA文库蛋白相互作用
- 大鼠盲肠结扎与穿刺脓毒症模型的建立与分析被引量：9
- 2017年
- 脓毒症是重症监护病房(ICU)的一种常见疾病,目前临床上对脓毒症的治疗效率不高。更为严重的是脓毒症患者的死亡率仍然很高,其内部的病理生理过程尚不清楚。许多种类的脓毒症的动物模型已经建立,其中盲肠结扎穿孔(CLP)模型,代表临床脓毒症最理想的模型。然而就CLP模型造模的死亡率、炎症反应以及病理变化而言不同的实验室之间结果有较大差异。目的:为了建立在有限实验条件下稳定性重复性好的大鼠模型,为后续的研究打下了基础。方法:1、确定了实验条件下盲肠结扎程度与大鼠死亡率之间关系。2、收集组织切片,确定其病理改变。3、在相同造模程度下,2种不同麻醉(水合氯醛和异氟烷)分别麻醉的大鼠,观察CLP大鼠死亡率的影响。结果:1、成功确定模型中大鼠盲肠结扎的程度。2、组织病理切片显示脓毒症的典型病理组织损伤,符合进一步研究的需要。3、在研究中发现相同造模程度下异氟醚麻醉组CLP大鼠死亡率为25%;水合氯醛麻醉组CLP大鼠死亡率达68.75%。
- 韩靖杜玉明袁聪俐华修国李岩
- 关键词：脓毒症麻醉剂死亡率
- 多重PCR方法检测猪链球菌主要致病血清型及其毒力因子被引量：21
- 2010年
- 根据猪链球菌基因序列,设计合成10对引物,通过在3个反应体系Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ中的组合优化,建立涵盖7种猪链球菌主要毒力因子mrp、epf、sly、gdh、gapdh、orf2和fbps及猪链球菌主要致病性血清型(2、7、9型)的快速敏感的多重PCR检测方法。对不同菌株检测结果显示,该多重PCR方法特异性强、敏感性高,能快速检测出猪链球菌2、7、9型及其毒力因子表型,可用于快速诊断及猪链球菌的分子流行病学调查。
- 郑升博华修国陆伟芳袁聪俐杨志彪崔立
- 关键词：猪链球菌多重PCR血清型毒力因子
- 不完全睡眠剥夺对青春期SD大鼠生长发育的影响被引量：4
- 2017年
- 目的观察不完全睡眠剥夺对青春期大鼠生长发育的影响,从而为充足睡眠对青少年生长发育的重要性提供实验参考依据。方法 4周龄SD大鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组和三个睡眠剥夺实验组(睡眠9 h、睡眠6 h、睡眠3 h)。采用"小平台水环境"方法建立睡眠剥夺模型,观察SD大鼠在整个青春发育期(4~8周龄),实验组与对照组大鼠间体质量、体长、行为习惯及大脑海马发育情况等方面的变化。结果实验组大鼠体质量、体长增长减缓(P<0.01);行为躁狂易激惹、精神状态差甚至出现死亡;性腺周围脂肪明显减少,性激素分泌减少。结论长期不完全睡眠剥夺可能造成青春期SD大鼠发育迟缓。
- 朱寅秋汪雅荻严国锋周晶汪静袁聪俐马政文
- 关键词：睡眠剥夺青春期生长发育性激素
