许纪玲 作品数:15 被引量:32 H指数:3 供职机构: 南京红十字血液中心 更多>> 发文基金: 南京市医学科技发展项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 政治法律 更多>>
RhD和HBsAg双表达载体的构建与表达研究 被引量:1 2016年 人类Rh血型系统是临床上最重要的血型系统之一,是人类红细胞血型系统最具有多态性的血型系统。到目前为止已发现了至少49种不同抗原,其中与临床相关的主要抗原为D、C、E、c和e等5种。Rh血型抗原定位于人类1号染色体短臂1p34.3-lp36.1,分别编码2个非糖基化的疏水性跨膜蛋白质RhD和RhCE。 许纪玲 蔡杰 陆玉婷 蔡旭兵 杨永林关键词:血型系统 红细胞血型 血型抗原 RHD 抗原抗体 抗原活性 大容量样本病毒浓缩HCV核酸检测方案的研究 被引量:3 2014年 目的对大容量样本中丙型肝炎病毒(HCV)进行浓缩提取,采用自行设计引物进行实时HCV荧光定量检测,验证病毒浓缩的效率以及病毒浓缩对检测的影响。方法采用PEG法高速离心进行病毒浓缩,一步法逆转录荧光定量PCR验证病毒浓缩效果。结果该方案用于HCV RNA检测,能得到良好的扩增曲线,不同病毒载量样本病毒浓缩的效率均在70%以上。结论大容量样本HCV病毒浓缩可提高病毒荧光PCR检测的灵敏度。 蔡杰 许纪玲 陆玉婷 杨永林 蔡旭兵关键词:丙型肝炎病毒 核酸检测 荧光定量 HBV血液大样本浓缩核酸检测方案研究 被引量:3 2014年 目的采用实时荧光定量检测方法,验证病毒浓缩的效率以及病毒浓缩对检测的影响。方法模拟48人份样本混和后浓缩提取HBV DNA,聚乙二醇沉淀法进行病毒浓缩,进行HBV DNA实时荧光定量PCR检测,并分析浓缩效率及检测水平。结果 10 mL样本中HBV病毒浓缩的效率近90%,病毒检测水平优于100 copies/mL。结论大样本混样后病毒浓缩效率理想,能有效提高病毒的检出度及血液安全并降低检测成本。 周静宇 蔡杰 许纪玲关键词:乙型肝炎病毒 核酸检测 南京地区疑难配血患者不规则抗体分析 目的通过分析南京地区疑难配血患者不规则抗体特点,寻求快速有效的安全输血对策。方法对2013年1月-2016年6月南京地区各医院,送检后确认存在不规则抗体的776例疑难配血标本进行回顾性分析,分别按照患者的性别、年龄分布、... 乔海石 许纪玲 杨永林 傅强 蔡旭兵文献传递 HEV保护性抗体的制备与功能研究 被引量:1 2017年 目的研究基于戊型肝炎病毒中和表位(p179)的小鼠单克隆抗体的HEV中和保护作用。方法构建含HEV中和表位p179基因的真核表达质粒venus-179,以尾静脉注射方法对BALB/c小鼠实施基因免疫,ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗体应答水平,通过单克隆抗体的方法制备HEV抗体,通过C3A细胞株人HEV细胞感染模型,采用RT-PCR法检测中和试验后保护性抗体的中和活性。结果成功制备了6株针对戊型肝炎病毒中和表位(p179)的抗体,其中抗体株2G8F9能有效中和HEV病毒,证实其产生的特异性抗体能够有效阻断HEV感染易感细胞C3A,具有中和HEV的活性。结论戊型肝炎病毒中和表位(p179)的基因疫苗venus-179免疫小鼠制备的单克隆抗体具有中和作用的免疫应答。 许纪玲 蔡杰 何苗 杨永林关键词:戊型肝炎病毒 基因免疫 中和表位 一种全自动样本试管在线冰箱控制系统 本发明属于样本控制技术领域,具体公开提供的一种全自动样本试管在线冰箱控制系统,该系统包括:放置信息导入模块、样本状态监测模块、放置状态分析模块、样本失效处理终端、环境差异分析模块、信息库和环境调控执行终端。本发明通过根据... 张立波 许纪玲 马成平 赵爱美 张建新短串联重复序列亲子鉴定技术用于细胞融合的检测 被引量:1 2016年 目的尝试将基于短串联重复序列(STR)技术的亲子鉴定技术应用于科研中融合细胞的检测和确认,评价其可行性。方法用20%聚乙醇-6000(PEG)进行人骨髓瘤细胞株和健康人外周血单个核细胞(PBMC)进行融合,经次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷(HAT)筛选亚克隆。通过细胞形态、DNA含量、STR等位基因信息等对融合细胞进行检测。结果融合后细胞形态较原骨髓瘤细胞株稍大,增殖周期未发生显著变化,融合后细胞DNA含量呈两倍增加,STR检测融合细胞包含原亲本细胞遗传信息。结论DNA亲子鉴定技术可用于融合细胞的检测和确认,其方法可靠易行。 杨永林 陆玉婷 蔡杰 许纪玲 傅强 蔡旭兵关键词:串联重复序列 血型鉴定和交叉配血 细胞融合 一个能特异性识别HBsAg多个抗原表位的单克隆抗体及其应用 本发明属于基因工程领域,涉及一个能特异性识别HBsAg多个抗原表位的单克隆抗体及其应用。一株杂交瘤细胞,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2014年9月16日,保藏编号为CCTCC?NO:C2014151。一种能够... 杨永林 蔡杰 许纪玲 汪林娣 蔡旭兵文献传递 献血者HEV感染后VP13抗体的免疫应答研究 被引量:3 2017年 目的调查南京地区献血者的HEV感染情况,对感染者的VP13抗体免疫水平进行分析研究;利用VP13抗体的型特异性,进行毒株分型。方法采用ELISA法,检测献血者标本的HEV-IgM、HEV-IgG;对筛选到的HEVIgM阳性标本进行HEV RNA核酸检测;使用Ⅰ-Ⅳ型HEV-VP13抗原包被ELISA板,检测患者血清中VP13抗体型别;对VP13抗体阳性的标本进行western blot验证,确证标本中VP13抗体的特异性。结果 ELISA检测献血者合格标本5 256份,其中HEV-IgM阳性为99份(1.88%),HEV-IgG阳性为1 624份(30.9%),HEV-IgM和HEV-IgG合并阳性为72份(1.37%)。HEV-IgM阳性标本中,检测到HEV RNA阳性标本1份(0.019%);HEV-VP13抗体阳性42份,占HEV-IgM阳性比42.4%。全部为基因Ⅰ型和Ⅳ型,Ⅰ型13例(30.9%),Ⅳ型37例(88.1%),Ⅰ型、Ⅳ型合并感染者8份(19%)。结论南京地区献血人群的合格血液中,能检测到HEV的多项标志物,存在HEV的传染风险。基于Ⅰ-Ⅳ型VP13抗体的免疫学检测,可用于区分HEV毒株的型别,对HEV感染确认具有重要意义。 蔡杰 许纪玲 何苗 杨永林关键词:戊型肝炎病毒 献血者 血液安全 应用分子生物学技术检测及蛋白质模型预测1例弱D型54 2023年 目的对1例血型血清学检测为RHD变异型的样本进行基因分型,并进行家系调查分析。方法运用血型血清学检测方法对先证者及其家系样本进行RHD确认及RH血型抗原表位检测,用序列特异性引物PCR(sequence specific primer PCR,PCR-SSP)法分析RHD基因外显子的表达,运用Sanger和SMRT(single molecule real-timesequencing)测序法对先证者及其家系样本进行RHD基因的1~10外显子测序分析。通过AlphaFold模拟构建蛋白质三级结构,将突变前后的蛋白质结构进行叠合以观察结构内分子间相互作用力的改变。结果先证者为RHD弱表型,其他抗原为Ccee,直接抗人球蛋白试验、抗体筛查、抗体鉴定试验均为阴性,PCR-SSP初步分型为RHD阳性。其父母血型血清学及PCR-SSP结果均为RHD阳性。SMRT测序结果显示先证者母亲为RHD^(+)/RHD^(-)杂合子。Sanger测序结果显示,先证者父亲携带弱D型54等位基因。AlphaFold建模预测揭示,p.Ser122Leu突变不能与146位GLU形成氢键相互作用。结论该样本为弱D型54,p.Ser122Leu突变导致氨基酸内部分子间作用力发生改变,从而引起突变后蛋白质结构和功能的部分改变。 芮雪 张钰 蔡杰 许纪玲 傅强 何成涛关键词:弱D型 血型血清学 家系研究