赵绪永 作品数:74 被引量:224 H指数:8 供职机构: 河南牧业经济学院 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 国家自然科学基金 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
多重实时定量PCR快速检测PRRSV、CSFV和PCV2混合感染方法的建立 被引量:7 2013年 根据TaqMan复合荧光探针设计原则,应用Primer 5.0和Oligo 6.0软件设计检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的特异性引物和探针,优化反应条件,建立了检测PRRSV、CSFV和PCV2的单项和多重Real-time PCR方法。结果表明,建立的方法具有高度特异性,与其他病原检测无明显交叉反应;对阳性质粒和病毒的最低检测量分别为<101个拷贝和<1TCID50/反应,检测灵敏度比常规PCR检测高100倍。通过对20份临床样本进行检测,多重Real-time PCR检测结果和单项Real-time PCR检测结果一致。建立的多重Real-time PCR方法可用于同时快速检测PRRSV、CSF和PCV2的混合感染,具有灵敏、特异、重复性好并能对样品进行定量检测等优点。 赵绪永 宁豫昌 赵丽 马辉关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 PBL教学模式在高职模具课程教学中的应用 被引量:1 2015年 在分析我国传统教学模式的基础上,通过在高职模具课程教学中采用PBL课堂教学模式,有效地建立了课堂与社会生活的联系,从而使学生更有目的和针对性地进行学习。研究成果对高职模具课程教学具有普遍性,对模具类人才培养模式改革的进行、改革发展趋势,以及我国高等教育模具人才培养有一定的积极意义。 权国辉 潘全喜 赵绪永关键词:PBL 教学模式 模具课程 教学效果 H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化 被引量:9 2008年 利用PCR方法从含禽流感病毒HA基因的质粒T-HA上扩增HA基因,再将其克隆到原核表达载体pET28a中,用E.coliBL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定。Western-blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为60kD,位于包涵体中。包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清特异性反应,具有良好的抗原性。ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV血凝素抗体具有良好的灵敏性。 李清州 郝惠芳 王丽 赵绪永 朱礼倩 张丽萍 邓瑞广 张改平关键词:禽流感病毒 H5N1亚型 原核表达 肠溶兽用二联免疫增强剂的制备方法 本发明属于生物制药技术领域,尤其涉及一种具有增强仔猪和肉鸡的机体免疫力、抗菌、杀菌功效的肠溶兽用二联免疫增强剂的制备方法,从猪血中分离白细胞,从分离的白细胞中通过利息破碎粗提抗菌肽,将抗菌肽用凝胶过滤层析纯化;将抗凝血离... 王永芬 马辉 张震 郭宏伟 郑鸣 赵绪永传染性法氏囊病毒感染鸡胚成纤维细胞机理研究 传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)是一种无囊膜双链RNA病毒,它所引起的鸡传染性法氏囊病(infectious bursal disease,IBD)是鸡的一种急... 赵绪永关键词:鸡胚成纤维细胞 传染性法氏囊病毒 病毒感染 真核表达 单克隆抗体 数字PCR技术在动物疫病诊断中的应用进展 被引量:16 2021年 数字PCR技术是一种能够进行绝对定量的核酸检测技术,与实时荧光定量PCR技术相比,该技术敏感性更高、定量不依赖于标准曲线、对反应抑制物的耐受能力也更高。目前,该技术在转基因检测、物种鉴定、疾病诊断、病原微生物鉴定和精确定量分析等领域具有较广阔的应用前景。论文对数字PCR的发展历史、原理、优缺点及在动物疫病诊断中的应用进行了综述,以期为提高动物疫病诊断能力的提供借鉴。 郭宏伟 赵绪永 李华玮 张震 马辉 郑鸣关键词:动物疫病诊断 实时荧光定量聚合酶链反应 组合式塑料瓶模具 一种组合式塑料瓶模具,包括模具本体,模具本体内设有模腔,所述模腔为上下开口结构,模具本体的下端设有与模腔匹配的磨具底座,所述模腔内设有与模腔内壁匹配的瓶身模具,所述瓶身模具的上端设有与模腔内壁匹配的手柄模具。本实用新型将... 权国辉 赵绪永 潘全喜文献传递 鸡β-防御素-3在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性测定 被引量:7 2009年 采用RT-PCR方法从鸡外周血淋巴细胞中扩增鸡β-防御素-3成熟肽基因,将其克隆到酵母表达载体pPICZα-A的分泌信号肽基因下游。线性化后的重组质粒电击转化毕赤酵母宿主菌GS115,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌。阳性转化菌经甲醇诱导后,SDS-PAGE和western blot鉴定结果表明,在毕赤酵母中得到分泌性表达产物,分子量约为8.9ku,活性检测表明其具有显著的抑菌活性。 赵绪永 马辉 赵丽 朱礼倩 李清州关键词:毕赤酵母 分泌表达 传染性法氏囊病病毒细胞受体研究进展 2009年 综述了国内外IBDV细胞受体的研究情况,概括介绍了近年来的研究进展,以期对IBDV细胞受体的结构和功能研究提供参考。 李乔木 李娅丽 赵绪永 朱礼倩 田小辉 刘运超 王爱萍关键词:传染性法氏囊病病毒 细胞受体 表面免疫球蛋白 mTOR信号通路在调控猪繁殖与呼吸综合征病毒复制中的作用 被引量:2 2022年 【目的】为阐明哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of Rapamycin,mTOR)信号通路在调控猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制过程中的作用,探索防控该病传染的新途径。【方法】PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAMs)24 h后,用蛋白质印迹法检测mTOR信号通路下游信号分子的表达水平及磷酸化水平。【结果】在PRRSV感染PAMs后,mTOR、eIF4E结合蛋白1(eukaryotic initiation factor 4E binding protein 1,4EBP1)及PS6K的磷酸化水平显著增加,表明PRRSV感染激活了mTOR信号通路。用mTOR特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)处理PAMs,发现Rapamycin能够显著抑制PRRSV感染引起的mTOR信号通路下游关键信号分子4EBP1磷酸化,且剂量依赖性和时间依赖性促进了PRRSV的复制。【结论】mTOR信号通路参与调控PRRSV的复制,Rapamycin对4EBP1磷酸化有抑制作用,对PRRSV的复制有促进作用。该研究为后续进一步探索PRRSV复制的翻译起始机制奠定基础。 李华玮 赵绪永 赵绪永 李新锋 姬向波 乔松林关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 信号通路 猪肺泡巨噬细胞 蛋白质印迹法 病毒复制