郑子峥 作品数:50 被引量:104 H指数:5 供职机构: 厦门大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省科技重大专项 福建省农科院青年科技人才创新基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
戊型肝炎病毒衣壳蛋白特异性人源单克隆抗体的筛选与鉴定 2018年 目的:建立从外周血快速筛选戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)衣壳蛋白特异性人源抗体的方法,从疫苗免疫者外周血中筛选出相应抗体并进行鉴定。方法:采用分选型流式细胞仪获得外周血中HEV衣壳蛋白特异性的记忆B细胞,通过单细胞RT-PCR的方法获得抗体序列,并进行重组表达,最后对获得的人源单克隆抗体进行初步性质鉴定。结果:成功筛选到识别HEV衣壳蛋白的6株人源单克隆抗体,6株抗体均具有抗原结合活性,4株抗体具有中和活性。结论:成功获得HEV衣壳蛋白特异性人源单克隆抗体序列,并进行真核表达,对抗体的性质进行初步鉴定,为后期研究疫苗免疫的人体内的抗体演化打下基础。 张旭 温桂平 唐自闽 王思令 陈佳昕 应东 刘畅 郑子峥 夏宁邵关键词:戊型肝炎病毒 衣壳 人源单克隆抗体 呼吸道合胞病毒在不同龄期BALB/c小鼠上的感染差异 被引量:1 2016年 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是全世界范围内引起下呼吸道感染的主要病原体,主要高危人群为六个月以下新生儿及65岁以上人群。目前BALB/c小鼠是RSV感染的有效动物模型,但不同周龄BALB/c小鼠感染RSV后的差异性尚未有报道。本研究分别选择10、30、60周龄BALB/c小鼠,在鼻腔接种106及107PFU RSV后,对不同龄期小鼠临床一般症状、体重、鼻/肺部病毒滴度及肺组织炎症病理变化进行检测及比较。结果显示感染106PFU RSV后小鼠未出现明显的体重下降,而107PFU RSV感染后能有效引发小鼠在感染后6-11天出现明显的体重下降。检测结果显示,在107PFU感染的小鼠的鼻、肺组织能够检测到明显的病毒复制,肺部免疫组化显示病毒主要定位于肺泡周围,炎症观察结果显示出明显的肺部炎症细胞浸润及组织病理损伤。同时本研究还观察到随着小鼠周龄的增大,感染后体重下降越明显,并能检测到更为明显的肺部病毒及验证损伤。这些结果显示出本研究成功建立了不同周龄BALB/c小鼠RSV感染差异模型,为不同年龄人群RSV感染免疫机制的深入探讨及RSV相关抗体和疫苗药物的选择、评估提供依据。 詹炉停 赵敏 依含 张伟 曹健力 孙永鹏 张璐婧 司竣宇 夏宁邵 郑子峥关键词:BALB/C小鼠 周龄 支气管炎 戊型肝炎病毒新潜在中和性表位的发现 被引量:1 2010年 目的探讨戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白是否存在除主要免疫优势中和表位aa459~606以外的其他中和表位。方法通过对几株单克隆抗体及其表位的性质进行分析,对比位于主要免疫优势表位区aa459—606和位于该表位N端序列aa394~458区域的数个表位的中和活性。结果发现位于aa423~437的表位对应的单抗具有潜在中和活性,不同于已知的HEV中和性表位(aa459~606),该表位是一个线性非免疫优势表位。结论HEV ORF2 aa423~437为新的潜在的线性非免疫优势中和表位,该发现丰富了对HEV衣壳结构的认识,为HEV预防与治疗提供了新的针对靶点。 郑子峥 唐明 苗季 赵敏 黄慧 李婧娴 俞海 李少伟 张军 夏宁邵关键词:戊型肝炎病毒 衣壳 呼吸道合胞病毒融合蛋白(F蛋白)结构及中和表位的研究进展 被引量:7 2017年 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV),是造成全世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的主要原因之一,2岁前的幼儿几乎全部感染过RSV[1],造成肺炎及毛细支气管炎等呼吸道疾病[2]。0~2个月的婴儿在感染RSV后易出现严重的病症[3]。而在最新的全球疾病死亡率分析中,1月到1周岁的儿童死亡中约有6.7%是由RSV感染造成的[4]。青壮年人群感染后病症较轻,但在老年人群中会出现严重病症及死亡病例[5]。 曹健力 张伟 夏宁邵 郑子峥关键词:呼吸道合胞病毒 中和表位 F蛋白 下呼吸道感染 呼吸道疾病 RSV感染 热休克蛋白90与戊型肝炎病毒重组衣壳蛋白P239相互作用的初步研究 被引量:1 2008年 目的对前期研究中所筛选出的能够与戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)重组衣壳蛋白颗粒P239存在特异性的相互作用的蛋白进行分析验证。方法使用pull-down、MALDI-TOF-MS、免疫共沉淀技术及免疫荧光技术对与P239有潜在相互作用的蛋白进行鉴定和进一步分析。结果MALDI-TOF-MS及免疫共沉淀技术,均表明该蛋白为热休克蛋白90(HSP90)并与P239相互作用。随后,对P239进入细胞的过程中胞内HSP90蛋白量及其分布的变化做了初步研究。发现虽然HSP90在蛋白总量上并没有发生明显的变化,但其定位却伴随着P239在胞内的迁移发生了由细胞膜向细胞核核周的转移。结论HSP90可能参与了P239入胞后的转运并介导了HEV入胞后向效应细胞器的转运,为研究HEV的感染机制及对HEV的预防和控制提供了有益的线索。 郑子峥 苗季 吴小成 何水珍 唐明 孙媛媛 王颖彬 杜海莲 张军 夏宁邵关键词:戊型肝炎病毒 热休克蛋白90 蛋白相互作用 识别RSV pre-F蛋白的抗体以及应用 本发明涉及免疫学领域和分子病毒学领域,特别是RSV的预防和治疗领域。具体而言,本发明提供了能够特异性结合pre‑F蛋白上<Image file="DDA0003798637810000011.GIF" he="53" i... 郑子峥 孙永鹏 雷思雨 强宏生 陈莉 夏宁邵稳定呼吸道合胞病毒融合蛋白的方法 本申请涉及稳定呼吸道合胞病毒(RSV)的融合蛋白的方法。具体而言,本申请涉及一种灭活RSV且稳定所述RSV中的pre‑F蛋白的方法,以及通过该方法获得的经灭活的RSV病毒。此外,本申请还涉及一种制备含有pre‑F蛋白的免... 郑子峥 张伟 张璐婧 孙永鹏 夏宁邵文献传递 小鼠抗人呼吸道合胞病毒磷蛋白(P蛋白)单克隆抗体的制备和鉴定 2019年 目的制备抗人类呼吸道合胞病毒(HRSV)磷蛋白(P蛋白)单克隆抗体,并对其进行鉴定。方法以原核表达系统表达的HRSV P蛋白重叠肽段作为免疫原,采用杂交瘤技术筛选P蛋白单克隆抗体,Western blot法验证筛选获得的单克隆抗体与P蛋白的结合活性,免疫荧光细胞化学染色确定获得的单克隆抗体能否用于RSV感染后HEp-2细胞中P蛋白的检测。结果筛选出反应性好、特异性识别HRSV P蛋白的单克隆抗体P181-15A3、P211-16D8。获得的单克隆抗体通过Western blot法验证可与P蛋白结合,并可用于RSV感染后HEp-2细胞中P蛋白的免疫细胞化学检测。结论成功制备了小鼠抗HRSV P蛋白的单克隆抗体。 司竣宇 詹炉停 依含 赵敏 张伟 张伟 孙永鹏 郑子峥关键词:单克隆抗体 戊型肝炎病毒感染实验室诊断方法研究进展 被引量:7 2016年 戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E Virus,HEV)引起的急性病毒性肝炎,已经成为威胁人群健康的公共卫生问题。HEV主要通过消化道传播,但随着HEV输血传播病例的报道,HEV给输血安全带来的风险也受到人们的重视。通过分析戊型肝炎现有的诊断手段,以对献血员的HEV筛查提供借鉴作用,这对输血安全中戊型肝炎的预防和控制具有重大意义。目前常用的戊型肝炎检测指标主要包括:HEV RNA、HEV抗原、抗-HEV IgM、抗-HEV IgG。核酸检测是戊型肝炎诊断的"金标准",对于慢性戊型肝炎患者、免疫缺陷人群及无肝炎症状的HEV感染者都有着特别优势。HEV抗原作为HEV现症感染指标,对于血站HEV筛查和急性戊型肝炎诊断有很好的应用价值。抗-HEV IgM是HEV近期感染的标志,不能作为HEV现症感染的单一指标。而抗-HEV IgG只能指示HEV既往感染,不适用于急性戊型肝炎的诊断。目前,献血员HEV检测主要以核酸检测为基础,而HEV抗原检测可能弥补HEV RNA的检测不足。在未来,抗原检测和抗体检测对于献血员HEV筛查的价值还有待更多的研究评价。 纪文芳 温桂平 唐自闽 夏宁邵 郑子峥关键词:戊型肝炎病毒 核酸检测 抗原检测 抗体检测 人肝细胞内戊型肝炎病毒结合蛋白的酵母双杂交筛选 被引量:5 2006年 为进一步深入研究戊型肝炎病毒(HEV)感染机制以及致病机理,用酵母双杂交系统从人肝细胞cDNA文库中筛选与戊型肝炎病毒衣壳蛋白E2相互作用的蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,4个克隆与E2相互作用,其中一个克隆与P38IP高度同源,细胞免疫共沉淀实验结果显示:在哺乳动物细胞水平仍能够检测到E2与P38IP片段的特异的相互作用。 何水珍 林亦伟 郑子峥 吴小成 张军 夏宁邵关键词:酵母双杂交