阮红 作品数:19 被引量:116 H指数:8 供职机构: 浙江大学城市学院医学与生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 医药卫生 更多>>
紫心甘薯多糖的抗氧化活性研究 被引量:15 2011年 目的探讨紫心甘薯多糖(PPSP)的体内外抗氧化活性。方法采用OH.、DPPH.和还原力反应体系,检测紫心甘薯多糖的体外抗氧化活性,并与维生素C(VC)进行比较。建立链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,测定并比较PPSP组与模型组的肝脏和胰腺内丙二醛(MDA)含量、还原型谷胱甘肽(GSH)和总抗氧化(T-AOC)活性。结果体外抗氧化实验表明,随着紫心甘薯多糖浓度增加,其还原力、OH.和DPPH.清除率均有所增加。当PPSP浓度为250μg/ml时,表现出较强的还原力,对OH.和DPPH.的清除率分别为92.2%和60.2%,其中对OH.清除率明显高于VC,对DPPH.清除率接近VC清除水平。按PPSP低、中、高剂量(分别为100、200和400 mg/kg.bw)灌胃,结果表明大鼠肝脏和胰腺组织内的MDA含量都有明显降低,GSH和T-AOC活性都有明显升高。肝脏切片结果显示中剂量多糖能有效减少糖尿病所致的肝脏细胞损伤。结论紫心甘薯多糖具有较强的体内外抗氧化活性。 高秋萍 阮红 毛童俊 刘森泉 余莹莹 张如意关键词:紫心甘薯 多糖 抗氧化活性 反相高效液相色谱法测定发酵液中β-聚苹果酸含量 被引量:2 2010年 建立了一种利用反相高效液相色谱法测定发酵液中β-聚苹果酸(PMLA)含量的方法。以A(0.01mol/LKH2PO4)∶B(乙腈)=95∶5(体积化)为流动相,采用色谱柱Synergi4uPolar-RP(4.6×250mm,5μm);Agilent1200seires液相色谱系统测定发酵液酸水解前后的苹果酸含量,两者差值间接反映发酵液中聚苹果酸的含量。结果显示,目的峰和杂峰在8min内可以得到完全分离,定量的相对标准偏差为0.6%~1.5%,回收率为98.2%~100%。该法准确度高,重现性好,可作为发酵液中聚苹果酸的检测方法。 刘森泉 阮红 徐玲芬 赵婧 陈忠华关键词:反相高效液相色谱 发酵 γ-聚谷氨酸工程菌株的构建 γ-聚谷氨酸(Polyγ-glutamic acid,γ-PGA)是由谷氨酸的γ-羧基与氨基通过酰胺键连接聚合而成的均聚氨基酸化合物,分子量在1×105-1×107Da范围内。作为一种生物高分子材料,γ-PGA具有生物可... 阮红 曹旭 郑强 范立梅 徐志南关键词:聚谷氨酸 工程菌株 文献传递 紫心甘薯多糖对糖尿病大鼠血糖血脂的调节作用 被引量:15 2010年 目的研究紫心甘薯多糖(PPSP)对糖尿病大鼠血糖、血脂代谢的调节作用。方法观察PPSP对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠血糖、糖化血清蛋白(GSP)、肝糖原、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化(T-AOC)的影响。结果 PPSP可显著提高肝糖原合成能力,增强GSH和T-AOC活性,降低糖尿病大鼠血糖及血清中GSP、TC、TG、MDA的量。结论紫心甘薯多糖具有一定的降血糖、调血脂作用,作用机制可能与调节肝糖原代谢和抗氧化作用有关。 高秋萍 阮红 刘森泉 张如意 余莹莹关键词:紫心甘薯 多糖 脂代谢 紫心甘薯多糖的分离及组分抑癌活性研究 被引量:10 2011年 目的:分离紫心甘薯的多糖(Polysaccharide of purple sweet potato,PPSP)组分,并对其组分的抑癌活性进行初步研究。方法:采用DEAE-Cellulose和CM-Cellulose离子交换柱分离紫心甘薯多糖,收集分离PPSP组分;MTT法检测PPSP各组分对肿瘤细胞的体外抑制活性;薄层层析法分析PPSP各组分的单糖组成;利用傅里叶红外光谱技术检测PPSP组分的结构特征。结果:选用弱阴离子交换柱DEAE-Cellulose分离,并经NaCl溶液梯度分段洗脱,得到4个紫心甘薯多糖组分,分别命名为PPSPⅠ、PPSPⅡ、PPSPⅢ和PPSPⅣ;观察PPSPⅠ、PPSPⅡ、PPSPⅢ对Hela和HepG2肿瘤细胞的抑制作用,检测发现PPSPⅡ、PPSPⅢ组分有一定的抑癌活性。结构分析结果表明,PPSPⅠ主要由葡萄糖和半乳糖这两种单糖组成;PPSPⅡ由葡萄糖组成,并具有β-D-葡萄吡喃聚糖的红外特征吸收峰;PPSPⅢ具有蛋白吸收峰。结论:成功分离得到PPSP的4种多糖组分,其中检测到PPSPⅡ、PPSPⅢ组分对Hela和HepG2肿瘤细胞具有一定的体外抑制作用。推测PPSPⅡ、PPSPⅢ组分抑癌活性可能与其含有β-D-葡萄吡喃聚糖或糖蛋白的结构有关。 赵婧 阮红 高秋萍 李梦雅 陶晔琪 郑颖关键词:紫心甘薯 多糖 抗肿瘤 紫草多糖的免疫调节和肿瘤抑制活性研究 被引量:19 2008年 为研究紫草多糖在体外对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性及对肿瘤细胞的细胞毒作用,本实验采用水提醇沉法,经脱蛋白、脱色、透析等方法提取紫草多糖,MTT法检测紫草多糖对淋巴细胞增殖及对HepG2、SPC-A-1肿瘤细胞的杀伤作用.实验结果显示:当质量浓度在121~364μg.mL-1时,紫草多糖能显著的促进ConA刺激的T淋巴细胞增殖(P<0.01),对HepG2肿瘤细胞有显著杀伤作用(P<0.01),对SPC-A-1肿瘤细胞有明显的杀伤作用(P<0.05),且随着浓度的提高,增殖作用或抑制作用增强.在质量浓度为364μg.mL-1时,对HepG2细胞的抑制作用明显高于对SPC-A-1细胞的抑制作用,而在质量浓度为24μg.mL-1时,对HepG2细胞的抑制作用低于SPC-A-1细胞,紫草多糖对HepG2细胞的抑制表现出更强的剂量-效应依赖性.以上结果表明,紫草多糖不仅有免疫调节活性,还对肿瘤细胞具有一定的细胞毒作用. 陈祥娜 阮红关键词:紫草多糖 免疫调节 肿瘤抑制 谷氨酰胺合成酶基因的过量表达有效提高谷氨酸棒杆菌中L-谷氨酰胺产量 被引量:1 2008年 以谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC13032基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小为1434bp的谷氨酰胺合成酶基因glnA.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,将扩增得到的目的基因片段克隆至C.glutamicum Res167,获得重组菌株C.glutamicum Res167/pXMJ19-glnA.在摇瓶发酵水平上,通过IPTG诱导glnA基因的表达,并采用反相高效液相色谱方法测定了发酵液中的L-谷氨酰胺含量.结果显示,与未经诱导的对照菌相比,诱导后的重组菌发酵液中的L-谷氨酰胺产量提高了1.8倍,最高产量达1.54g·L-1. 郑强 阮红 徐志南 杨卫军关键词:谷氨酸棒杆菌 谷氨酰胺合成酶基因 L-谷氨酰胺 重组牛肠激酶轻链在大肠杆菌中的表达和纯化 2007年 密码子优化全基因合成了牛肠激酶轻链基因(sBEKLC),采用pET-39b(+)构建了融合表达载体,在大肠杆菌中进行了成功表达.37℃在含30 mg/L卡那霉素的LB培养基中培养,当细胞密度(D600)达到0.5时,降低温度到28℃,加入终浓度为0.1 mM的异丙基硫代-βD-硫代半乳糖苷诱导外源蛋白表达,继续培养6 h后收集菌体,融合蛋白(DsbA-sBEKLC)产量达到151.2mg/L,相当于80.6 mg/L sBEKLC.使用渗透冲击技术从细胞周质中提取sBEKLC,经过亲和层析可从每升发酵液中得到6.8 mg sBEKLC,经检测sBEKLC具有生物活性. 黄磊 阮红 徐志南 顾玮彦 岑沛霖关键词:肠激酶 纯化 生物活性 β-聚苹果酸高产菌株的筛选及鉴定 被引量:8 2012年 目的:从自然界筛选β-聚苹果酸(PMLA)高产菌株,并对其进行菌种鉴定。方法:从自然界取样,经过单菌落分离,根据菌落形态特征、聚苹果酸的定性检测和核酸序列分类鉴定手段,筛选PMLA高产菌株。结果:分离得到一株PMLA高产菌株,编号为Ⅱ04,经形态学研究和ITS序列分析,确定为短梗霉菌Aureobasidium pullulans,命名为Aureobasidium pullulans ZUCC-41。该菌在25℃,220 r/min振荡培养7 d,采用高效液相色谱法(HPLC)进行产物定量分析,检测到PMLA产量可达26.23 g/L。结论:从自然界中分离得到一株PMLA高产菌株,经鉴定为短梗霉菌Aureobasidium pullulans,其发酵产量可达26.23 g/L。 徐玲芬 陈忠华 赵婧 阮红 刘森泉关键词:聚苹果酸 高产菌株 紫心甘薯多糖提取工艺研究 被引量:11 2009年 为了开发利用紫心甘薯资源,对紫心甘薯中多糖的提取工艺进行研究。对热水浸提法中影响紫心甘薯多糖提取率的参数(料液比、提取温度、提取时间、提取次数、pH值、醇沉浓度)分别进行单因素试验,在单因素试验的基础上,对其中3个主要影响因素(料液比、提取温度、提取时间)进行正交试验,进一步比较几种粗多糖脱蛋白和脱色的方法。最终确定紫心甘薯多糖最佳提取条件为料液比1:15(m/V)、提取温度70℃、提取2h、提取2次、pH值中性、85%乙醇醇沉、3%三氯乙酸法脱蛋白、硅藻土脱色。 高秋萍 阮红关键词:紫心甘薯 水溶性多糖