陈小萍
- 作品数：18 被引量：146H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>
- F磁珠对血液样本中EB病毒的富集方法
- 2023年
- 目的设计表达一种全新的重组蛋白(重组Ficolin-2蛋白,F蛋白)并包被磁珠,实现多种抗凝血中EB病毒的富集效果。方法通过体外基因合成重组F蛋白基因片段,该片段包括人IL-2信号肽、his标签、人IgG1 Fc、人Ficolin-2颈区及纤维蛋白原样区域(fibrinogen-like domain,FGD);并整合进表达质粒pCDNA^(TM)3.1(+)载体中,通过转染HEK293F细胞,实现上清中的分泌表达;通过镍柱纯化蛋白后包被到蛋白A磁珠上构建F磁珠;最后,收集三种不同抗凝剂(分别为ETDA、肝素、柠檬酸钠)抗凝的临床EB病毒血样本,并且比较了F磁珠和课题组前期开发的重组甘露聚糖结合凝集素磁珠(M磁珠)对三种抗凝剂抗凝血液中EB病毒富集的效果。结果M磁珠对肝素和柠檬酸钠抗凝血液中EB病毒富集效果均较好(P<0.01),但是对EDTA抗凝血EB病毒没有富集作用;而F磁珠对三种抗凝血中EB病毒的富集效果均较好(P<0.01)。结论F磁珠可以实现多种抗凝血中EB病毒的富集作用。
- 郑皓卢金星陈小萍
- 关键词：EB病毒检测
- 血流感染病原体分子检测技术研究进展被引量：1
- 2020年
- 血流感染(BSI)的发病率在世界范围内有逐年升高趋势,早期识别与诊断BSI对临床治疗意义重大。快速诊断BSI的分子学方法分为2类,即全血检测方法和依赖于血培养的检测方法。与血培养方法相比,全血检测方法缩短了检测时间,可以检测难培养的病原菌,但敏感性仍需提高。本研究对BSI病原体分子检测技术的研究进展予以综述。
- 郑皓陈小萍卢金星
- 关键词：血流感染脓毒症分子检测
- SIRT1抑制细菌脂多糖耐受THP-1细胞中IL-1βmRNA的转录被引量：1
- 2011年
- 目的研究细菌脂多糖（LPS）耐受的THP-1细胞中沉默信息调节因子1（SIRTl）对IL-1β转录的调节作用。方法使用LPS耐受的人单核细胞THP-1模型，染色体免疫沉淀和real-timePCR定量研究IL-1β启动子区SIRT1结合情况和组蛋白H3lys9／H4lysl6的乙酰化情况。结果在LPS耐受的THP～1细胞中，SIRT1对IL-1β启动子区的结合增加约5倍左右（P〈0．05），同时伴随着组蛋白H3lys9／H4lysl6乙酰化的低水平状态（与正常细胞相比P〈0．05）。SIRT1沉默使IL-1β的转录恢复到正常细胞的68％（P〈0．05），同时伴随着组蛋白H3lys9／H4lysl6乙酰化的增加（P〈0．05）。然而，正常细胞和耐受细胞p65lys310乙酰化水平无明显差异。结论SIRT1抑制LPS耐受的THP—1细胞中IL-1βmRNA的转录，其作用与p65lys310乙酰化无关，但是与IL-1β启动子区乙酰化有关。
- 陈小萍李明慧从美丽康雁君郭文平张永振
- 关键词：组蛋白乙酰化
- 血液中念珠菌重组人甘露聚糖结合凝集素蛋白磁珠富集联合重组酶辅助聚合酶链式反应检测方法的建立被引量：1
- 2023年
- 目的建立重组人甘露聚糖结合凝集素蛋白(M1蛋白)磁珠富集病原体结合重组酶辅助聚合酶链式反应(RAP)巢式核酸扩增技术检测血液中白色念珠菌和热带念珠菌的方法,以实现对白色念珠菌血症和热带念珠菌血症的早期诊断。方法针对白色念珠菌和热带念珠菌的内转录间隔区的高度保守区域的设计引物探针,建立检测白色念珠菌和热带念珠菌的RAP检测方法;用梯度稀释的标准菌株核酸和临床常见的血流感染病原体核酸检验灵敏度、重复性、特异性;用模拟样本进行M1蛋白磁珠富集血浆白色念珠菌和热带念珠菌RAP和实时荧光PCR的检测,并对结果进行比较。结果建立的双重RAP方法灵敏度为2.4~2.8拷贝/反应,重复性好,特异性高;M1蛋白磁珠富集病原体结合双重RAP方法可在4 h内完成对血浆中白色念珠菌和热带念珠菌的检测,<10 CFU/ml的病原体富集后进行RAP检测样本数较PCR检测样本数多。结论本研究建立了检测血液中白色念珠菌和热带念珠菌的双重RAP方法,该检测方法具备准确、快速、减少污染物的优点,在念珠菌血症快速检测中具有较好的应用潜力。
- 张梦怡陈小萍孙秀丽马学军申辛欣郭彦言
- 关键词：念珠菌血症
- 中国淮阳山地区由新蜱传布尼亚病毒引起的出血热被引量：21
- 2011年
- 病毒性出血热是一种临床症状表现为急性发热和出血的疾病。病原体为人兽共患及节肢动物携带传播的RNA病毒，包括丝状病毒科（如埃博拉出血热、马尔堡出血热）、沙粒病毒科（拉沙热）、黄病毒科（如登革出血热、黄热病）和布尼亚病毒科（如克里米亚一刚果出血热、肾综合征出血热）。
- 张永振周敦金田俊华覃新程李明慧李振军熊衍文陈小萍贺永文孙强正余滨李娟代永安金东崔志刚罗雪莲李伟卢珊王文彭劲松郭文平张少敏陈晨王艳Menno D.de Jong徐建国
- 关键词：布尼亚病毒
- 北京市昌平区西伯利亚立克次体的分离和鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的对北京市昌平区中国疾病预防控制中心园区内刺猬携带的中华革蜱进行斑点热群立克次体(SFGR)的分离和鉴定。方法采用形态学和分子生物学方法对SFGR进行鉴定,并进行系统进化特征分析。结果 SFGR对DH82细胞产生明显细胞病变;Gimenez染色后,可见较多清晰的立克次体被染成紫红色;细菌16S基因测定后,西伯利亚立克次体246株和西伯利亚立克次体BJ-90株相应核苷酸序列的同源性均为100%;系统进化分析显示,SFGR位于西伯利亚立克次体进化分支内,确认其为西伯利亚立克次体。结论北京市昌平区存在西伯利亚立克次体,该地区存在北亚热自然疫源地的可能性。
- 贺金荣李明慧陈小萍李辞修
- 布尼亚病毒科病毒及其相关疾病被引量：13
- 2010年
- 介绍布尼亚病毒科的病毒构成与分类、病毒的基因结构及其编码的蛋白;布尼亚病毒科病毒在全球的地理分布及主要传播媒介;布尼亚病毒科病毒引起的相关人畜疾病.介绍我国已发现和新发的布尼亚病毒科病毒及相关疾病.
- 覃新程周敦金陈小萍徐建国张永振
- 关键词：病毒疾病
- 白藜芦醇对细菌脂多糖耐受的THP-1细胞TNF-α启动子区的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨白藜芦醇对细菌脂多糖(LPS)耐受的人原单核细胞THP-1细胞中TNF-α启动子区的影响。方法:首先建立LPS耐受THP-1细胞模型后,然后用LPS分别刺激正常THP-1细胞(对照组)、LPS耐受THP-1细胞(耐受组)、白藜芦醇处理的LPS耐受THP-1细胞(耐受+白藜芦醇组),检测各组细胞TNF-α mRNA的表达及TNF-α启动子区各转录因子的结合情况。结果:LPS刺激后,TNF-α mRNA表达在对照组细胞迅速升高,耐受组缓慢升高,而耐受+白藜芦醇组略微升高,表达量明显低于前两组(均P<0.05)。染色体免疫沉淀(ChIP)分析显示,LPS刺激前,耐受组与耐受+白藜芦醇组p65及乙酰化p65(ace-p65)、Rel B、G9a对TNF-p启动子区的结合量均明显高于对照组(均P<0.05),而p50的结合量各组细胞间无统计学差异(P>0.05);LPS刺激后,p65和ace-p65对TNF-α启动子区的结合量在对照组明显增加,而在耐受+白藜芦醇组明显降低,G9a结合量在对照组量明显降低(均P<0.05),其余转录因子较刺激前无明显改变(均P>0.05)。结论:白藜芦醇可以抑制LPS耐受的THP-1细胞中TNF-α mRNA的表达,可能部分通过抑制p65/ace-p65对TNF-α启动子区的结合。
- 李文革陈小萍
- 关键词：白藜芦醇脂多糖类
- 基于M1磁珠富集血液中念珠菌快速检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 目的建立3种基于重组人甘露聚糖结合凝集素(MBL)蛋白(M1蛋白)磁珠富集技术的血液微量念珠菌快速检测方法(荧光定量PCR法、微培养法、铺板培养法)。方法根据荧光定量PCR方法的扩增效果,比较3种裂解液(酵母裂解液、LSTE和TXTE)提取微量念珠菌DNA的效果;通过检测液体培养后的菌量,比较5种微培养液(PBS、SA、YPD、LB和BHI)的增菌效果;使用人血浆模拟样本评价建立的3种方法和标准血培养法对血液中微量念珠菌的检测效果。结果与TXTE和LSTE相比,酵母裂解液提取微量念珠菌DNA的效果最佳。SA、YPD、LB和BHI 4种微培养液中的菌量随时间延长均有上升趋势,特别是BHI增菌效果最佳。人血浆模拟样本中,荧光定量PCR法虽然能够在最短时间内(3.75 h)检测到病原菌,但不能检出全部阳性样本。与传统血培养法相比,微培养法和铺板培养法可分别提前至少39 h和22 h获得检测结果,灵敏度为10菌落形成单位/mL(CFU/mL)。结论与传统血培养法相比,荧光定量PCR法、微培养法和铺板培养法均能有效缩短检测时间,并且有较高的特异性和灵敏度。
- 郑皓李文革卢金星陈小萍
- 关键词：念珠菌念珠菌血症
- 我国75株艰难梭菌多位点序列分型分析
- 目的 通过对国内不同地区及来源的艰难梭菌的多位点序列分型，了解我国艰难梭菌的主要流行基因型别，及基因多态性的分布情况。并揭示不同地区和不同宿主人群来源菌株的遗传分支情况及其之间可能存在的联系，为我国艰难梭菌的起源及进化分...
- 刘笑舒李文革陈小萍车洁于栓宝卢金星吴媛
