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陈琦: 作品数：14 被引量：145H指数：7; 供职机构：上海医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海市高等学校科学技术发展基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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血小板衍生性生长因子对体外培养人肾小球系膜细胞生长的影响被引量：7: 1997年; 目的观察血小板衍生性生长因子（ＰＤＧＦ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）生长、基质合成和分泌以及ｃ┐ｍｙｃ癌基因表达的影响。方法体外培养的ＭｓＣ培养液中掺入５┐溴脱氧尿嘧啶（ＢｒｄＵ），采用ＢｒｄＵ单克隆抗体免疫组化法检测ＭｓＣ的增殖情况；应用［３Ｈ］脯氨酸掺入酶消化法测定ＭｓＣ细胞内、外胶原蛋白总量；采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测纤维连接蛋白（ＦＮ）、Ⅳ型胶原、核癌基因ｃ┐ｍｙｃｍＲＮＡ表达结果。结果（１）ＢｒｄＵ掺入法的阳性细胞标记指数在对照组为１９．５％，ＰＤＧＦ组为３４．５％（Ｐ＜０．０１）；（２）ＭｓＣ经ＰＤＧＦ作用后，细胞内、外胶原蛋白量分别为２．６９±０．６０％和３．８７±０．６５％，较正常对照组１．２５±０．５０％和１．６１±０．５１％明显增加（Ｐ＜０．０１）；（３））Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法显示ＰＤＧＦ组细胞的ＦＮ、Ⅳ型胶原及ｃ┐ｍｙｃｍＲＮＡ的表达明显高于正常组。结论ＰＤＧＦ不仅可刺激肾小球ＭｓＣ的增殖和胶原蛋白合成，而且可从基因转录水平增加ＦＮ、Ⅳ型胶原及ｃ┐ｍｙｃ癌基因的表达。由此推断ＰＤＧＦ在肾小球疾病的发生。; 陈广平郭慕依张月娥张锦生张志刚张秀荣陈琦; 关键词：肾小球疾病肾小球系膜细胞 PDGF 体外培养

肝素抑制大鼠Thy-1肾炎病变的实验研究被引量：4: 1997年; 经连续4次大鼠尾静脉注射免抗大鼠thy－1抗血清（ATS），建立大鼠thy－1系膜增生性肾小球肾炎模型。与此同时注射肝素，通过肾小球细胞计数、增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞数及a一平滑肌肌动蛋白（a－SMA）免疫酶标染色，以观察肝素对肾小球系膜细胞增生的影响；用过碘酸六胺银（PASM）和Ⅳ型胶原（ColⅣ）免疫酶标染色观察肝素对肾小球系膜基质的作用。结果发现肝素组与正常组之间，上述指标均受到明显的抑制，提示肝素对大鼠thy—1至肾炎有良好的治疗效果。; 陈广平郭慕依张月娥张秀荣陈琦; 关键词：肝素肾小球肾炎增殖细胞核抗原 THY-1

β_1型转化生长因子对大鼠肝Ito细胞整合素α_5、β_1表达的调节被引量：3: 1997年; β１型转化生长因子对大鼠肝Ｉｔｏ细胞整合素α５、β１表达的调节周晓虹张月娥张秀荣朱虹光陈琦刘学松肝纤维化过程中，纤维连接蛋白（ＦＮ）的沉积是胶原沉积的前奏，肝Ｉｔｏ细胞－肌纤维母细胞－成纤维细胞是主要的胶原生成细胞系统［１］。目前，对于Ｉｔｏ细胞是否...; 周晓虹张月娥张秀荣朱虹光陈琦刘学松; 关键词：ITO细胞纤维连接素转化生长因子

血小板源性生长因子对肺纤维母细胞前胶原合成的影响被引量：20: 1996年; 观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）对肺纤维母细胞增殖、胶原合成的影响。以改良Ｋｕｍａｒ法，分离培养了大鼠肺纤维母细胞，并采用ＭＴＴ、免疫细胞化学、原位分子杂交等方法。结果：ＰＤＧＦ对肺纤维母细胞具有促增殖作用，其浓度在１～１０μｇ／Ｌ之间呈剂量依赖性。ＰＤＧＦ作用下的纤维母细胞胞浆内线粒体和粗面内浆网明显增多，树状突起和棘状突起也较对照组增多，ＰＤＧＦ作用２４ｈ，肺纤继母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强，作用４８ｈ胞浆内布满Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型前胶原蛋白，作用７２ｈ，大量前胶原则被分泌到细胞外基质中。结论：ＰＤＧＦ不仅可以促进大鼠肺纤维母细胞增殖、合成代谢旺盛和信息传递活跃，而且使其Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型前胶原合成增加。其调控机制之一是在转录水平上增强了前胶原ｍＲＮＡ表达的结果。; 吴浩张月娥许祖德张锦生杜卫东朱虹光陈琦; 关键词：PDGF 前胶原细胞培养肺纤维化

大鼠肝纤维化Ito细胞纤维连接蛋白受体α5β1的表达被引量：3: 1997年; 目的研究纤维连接蛋白受体α５β１在大鼠肝纤维化中的作用。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及免疫组化方法观察大鼠实验性纤维化肝组织和离体Ｉｔｏ细胞纤维连接蛋白（ＦＮ）及其受体α５β１表达的变化。结果（１）α５β１主要分布于血窦壁的内皮细胞和部分结蛋白（ＤＭ）阳性细胞（Ｉｔｏ细胞）。实验组ＤＭ阳性细胞α５β１表达增强，１０周时达高峰。ＦＮ的变化与之同步。（２）实验组肝组织ＦＮ、α５和β１ｍＲＮＡ含量增高，峰值在第６周；离体Ｉｔｏ细胞三种ｍＲＮＡ含量实验组高于对照组。结论结果提示：Ｉｔｏ细胞表达α５β１，肝纤维化时Ｉｔｏ细胞的激活，可导致ＦＮ、α５和β１ｍＲＮＡ表达增强，应用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ印迹杂交技术检测ＦＮ及其受体ｍＲＮＡ的表达，从基因水平了解Ｉｔｏ细胞激活和增生状态，能更敏感地反映肝纤维化的发展倾向。; 周晓虹张月娥周筱梅周筱梅张锦生杜卫东朱虹光陈琦; 关键词：杂交免疫组织化学

应用BrdU单抗免疫组化染色观察大鼠系膜细胞生长情况被引量：11: 1996年; 应用ＢｒｄＵ单抗免疫组化染色观察大鼠系膜细胞生长情况陈广平，郭慕依，陈琦，张锦生，张秀荣，张月娥（上海医科大学基础医学院病理学教研室２０００３２）细胞动力学研究是细胞生物学领域的一个重要内容，早先应用较多的方法是利用氚标记的胸腺嘧啶掺入以及放射自显影...; 陈广平郭慕依陈琦张锦生张秀荣张月娥; 关键词：单克隆抗体染色

肝素和PDGF对人肾小球系膜细胞基质合成和分泌的影响被引量：2: 1998年; 目的：探讨肝素和血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）对体外培养的人肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）胶原合成和分泌以及纤连蛋白（ＦＮ）、α１（ＩＶ）型胶原ｍＲＮＡ表达的影响。方法：应用３Ｈ－脯氨酸掺入、胶原酶消化法测定胶原含量；采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＦＮ、α１（ＩＶ）型胶原ｍＲＮＡ。结果：对照组、肝素组及ＰＤＧＦ组细胞内胶原含量分别为（１．２５０±０．５０１）％，（０．８０９±０．１６１）％和（２．６９０±０．５９７）％，而其培养液中的含量分别为（１．６０８±０．５１２）％，（０．１２２±０．０８９）％和（３．８７０±０．６４７）％。上述结果显示肝素对该细胞合成和分泌胶原有抑制作用（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），而ＰＤＧＦ则具有明显促进作用（Ｐ均＜０．０１）。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析结果显示肝素可抑制ＭｓＣＦＮ、α１（ＩＶ）型胶原ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ则可明显增强其表达。结论：肝素对人肾小球ＭｓＣ基质的合成和分泌有抑制作用，而ＰＤＧＦ则具有促进作用，其作用机制均发生在基因转录水平上。; 陈广平郭慕依张月娥张锦生周筱梅张秀荣陈琦; 关键词：肾小球系膜细胞肝素 PDGF 基质合成分泌

肝素对大鼠肾小球系膜细胞的抑制作用被引量：12: 1995年; 通过观察肝素对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）生长、超微结构、细胞外基质合成及癌基因表达的影响，探讨肝素减轻以ＭｓＣ增生为特征的肾小球病变的可能性，分离培养的ＭｓＣ经鉴定后，分为肝素组和对照组进行观察，结果发现肝素可明显抑制ＭｓＣ生长，此作用具有剂量依赖性，电镜发现肝素使ＭｓＣ微丝减少，内质网和高尔基体扩张，次级溶酶体增多，髓样小体形成。免疫组化法证实肝素能抑制ＭｓＣ纤维连接蛋白和层联蛋白的合成，并抑制十四酚佛波乙酸酯（ＰＭＡ）刺激所致的ｃ～ｆｏｓ，ｃ－ｊｕｎ蛋白产物的表达。结合近年来肝素对ＭｓＣ抑制作用的体内研究，证实肝素对ＭｓＣ的增殖和代谢活性均有一定抑制性，为肝素治疗肾小球硬化性疾病提供了实验依据。; 张明郭慕依金惠铭陈琦; 关键词：肾小球肾炎肝素膜细胞

大鼠肝Ito细胞的体外培养及肝素对其抑制作用的观察被引量：32: 1996年; 用胶原酶，ＰｒｏｎａｓｅＥ灌流消化肝脏及Ｎｙｃｏｄｅｎｚ等密度离心成功地分离正常大鼠肝Ｉｔｏ细胞（ＮＩｔｏ）及肝纤维化大鼠Ｉｔｏ细胞（ＣＩｔｏ），并培养传代。刚分离的细胞在紫外线照射下可见很快消退的自发荧光；胞质内有大量脂滴，随培养时间延长，胞质内脂滴减少，微丝增加，内质网扩张、增多；结蛋白（Ｄｍ）免疫组化染色阳性。上述结果证实，分离细胞为Ｉｔｏ细胞。经观察，ＣＩｔｏ比ＮＩｔｏ生长快，体积大，表达α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ），Ⅰ及Ⅳ型前胶原能力强。肝素在体外不但抑制Ｉｔｏ细胞的生长，而且抑制其表达α－ＳＭＡ，Ⅰ及Ⅳ型前胶原。; 袁桃霞张锦生张月娥陈琦; 关键词：ITO细胞肝纤维化细胞培养肝素

利用新型表达载体pcDNA3.1/Myc-His表达sIL-4受体被引量：5: 2000年; 陈琦陈广平郭慕依张秀荣朱虹光; 关键词：分子生物学基因载体

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