陈荣富
- 作品数:11 被引量:15H指数:3
- 供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:重庆市卫生局医学科研项目重庆市卫生局科研项目重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 应力环境组织培养法保存的人骨软骨移植物中胶原和基质金属蛋白酶组织抑制剂3被引量:3
- 2011年
- 背景:应力可以对体内外软骨组织或软骨细胞产生多种影响。目的:观察应力环境对普通组织培养基体外保存的骨软骨移植物保存质量的影响。方法:将正常人的骨软骨移植物分成3组:对照组即新鲜移植物,普通组移植物采用普通组织培养法保存,应力组用摇床作为动态加载装置对普通组织培养法保存的骨软骨移植物进行持续周期性应力加载。结果与结论:储存移植物2周时,Western blot法和透射电镜观察显示,与静态环境下保存相比,动态加载环境使关节软骨细胞外基质中基质金属蛋白酶组织抑制剂3的表达明显提高(P<0.01),能更好地保护基质中胶原成分的超微结构。结果证实,应力环境有利于保存人同种异体移植物软骨细胞和胶原的超微结构,动态非接触加载可提供一种更好的库存人同种异体骨软骨移植物的方法。
- 杨健黄伟宋国立梁熙陈浩陈荣富谢静
- 关键词:软骨移植物
- 应力环境对组织培养法保存的人骨软骨移植物的影响
- 2011年
- 目的研究应力环境对普通组织培养基体外保存的骨软骨移植物的保存质量的影响,从而改进组织培养法保存软骨的效果。方法用摇床作为动态加载装置对体外保存的骨软骨移植物进行持续周期性应力加载,以模拟体内关节软骨的应力环境。摇床在37℃的孵箱中工作,频率设置为1Hz。在储存2周时,用Western bloting的方法对关节软骨中的肌动蛋白β—actin进行半定量分析,用透射电镜观察胶原的超微结构,并与对照组比较。结果与静态环境下保存相比,动态加载环境使关节软骨细胞外基质中β—actin的表达水平明显提高,并能更好地保护基质中胶原成分的超微结构。结论应力环境有利于保存人同种异体移植物软骨细胞和胶原的超微结构。动态力学加载可提供一种更好的库存人同种异体骨软骨移植物的方法。
- 杨健黄伟宋国立梁熙陈浩陈荣富谢静
- 关键词:关节软骨移植物应力
- 骨髓间充质干细胞促进前交叉韧带重建后腱-骨愈合的生物力学研究被引量:3
- 2013年
- 目的观察骨髓间充质干细胞( bone marrow- derived mesenchymal stem cells,,bMSCs)移植对兔前交叉韧带(anteriorcruciateligament,ACL)重建后移植物与骨道愈合的影响。方法选择24只新西兰大白兔,取自体同侧部分腓肠肌腱作为移植物,构建ACL重建模型,双后肢均纳入研究,一侧使用混合bMSCs的纤维蛋白胶包裹移植物(bMSCs组),对侧后肢单纯使用纤维蛋白胶包裹移植物(对照组)。分别于术后2,4,6,8周取材检测腱-骨界面的断裂强度和刚度。结果bMSCs组和对照组腱-骨界面的断裂强度和刚度均随修复时间延长呈上升趋势,其中实验组腱-骨界面的断裂强度和刚度自第6周始明显高于对照组(P〈0.05)。结论bMSCs移植可明显提高兔ACL重建后早期腱-骨界面的断裂强度和刚度,促进移植物与骨道早期愈合。
- 周维锋童松林徐建杰陈荣富许凌华庞显伦
- 关键词:前交叉韧带间充质干细胞腱-骨愈合
- 共培养下后交叉韧带成纤维细胞中赖氨酰氧化酶的基因表达被引量:2
- 2013年
- 背景:后交叉韧带对人膝关节结构的稳定以及功能的发挥起着重要作用。与内侧副韧带相比,损伤后的后交叉韧带难以很好的自我愈合,甚至会导致半月板撕裂和软骨损伤。为了提高后交叉韧带的愈合能力,这就需要寻找新的途径来再生和修复损伤的后交叉韧带。近年来的研究表明,赖氨酰氧化酶在组织损伤修复过程中起到非常重要的作用,但其在后交叉韧带修复过程中的分子机制研究尚未涉猎。目的:观察与滑膜细胞共培养后交叉韧带成纤维细胞中赖氨酰氧化酶基因的表达。方法:将第4代的后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞分别种植于6孔板和Tanswell中。实验分为2组,即后交叉韧带成纤维细胞与滑膜细胞共培养组和后交叉韧带成纤维细胞单层培养组。培养6h后,提取总RNA,通过半定量PCR和实时定量PCR检测单层培养组和共培养组中后交叉韧带成纤维细胞中赖氨酰氧化酶基因表达。结果与结论:与单层培养组相比,赖氨酰氧化酶、赖氨酰氧化酶样蛋白1、赖氨酰氧化酶样蛋白2、赖氨酰氧化酶样蛋白3和赖氨酰氧化酶样蛋白4的基因表达在共培养的后交叉韧带细胞中都明显升高,分别增加了1.1,1.4,1.1,1.3,1.1倍(P<0.05)。单层培养组家族成员在单层培养和共培养中表达情况的差异性,说明细胞之间的相互作用会影响后交叉韧带组织的损伤修复,对后交叉韧带损伤修复的机制研究有极其重要的参考价值。
- 张艳君梅虎蒋稼欢谢静尹琳陈荣富许春明王春莉宋国立
- 关键词:半月板后交叉韧带内侧副韧带滑膜共培养赖氨酰氧化酶
- 钛颗粒和炎症因子对人滑膜细胞MMP-2表达的影响
- 2013年
- 目的研究钛颗粒和炎症因子(TNF-α、IL-1β)对人滑膜细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达及活性的影响,探讨滑膜在钛磨损颗粒诱导的金对金人工关节假体周围骨溶解中的可能机制。方法用钛颗粒和TNF-α、IL-1β处理体外培养的人膝关节滑膜细胞,处理后12、24、48、72 h收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果直径最小的钛颗粒(≤5μm)能刺激人滑膜细胞MMP-2蛋白表达4倍于对照组;与对照组相比,钛颗粒、TNF-α、IL-1β及相互联合作用均明显增加了MMP-2的表达(P<0.01),三者联合作用更明显(P<0.01)。钛颗粒和TNF-α、IL-1β能够刺激人膝关节滑膜细胞增加MMP-2蛋白活性,并具有协同效应。结论金对金人工关节置换术后,磨损钛颗粒可能和炎性因子协同刺激滑膜细胞,增加骨细胞外基质的降解,导致假体的骨性支持结构力学性能下降,促使假体无菌性松动的发生。
- 符纯锋黄伟梁熙胡宁宋国立谢静陈荣富王春莉林良波王志强陈诚
- 关键词:钛颗粒滑膜炎症因子无菌性松动
- 前列腺素E_2对滑膜细胞基质金属蛋白酶-2活性的影响及其信号通路研究被引量:1
- 2012年
- 目的:观察前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)对滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)活性的影响及其信号通路的研究,从而探讨PGE2对前交叉韧带(Anterior cruciate ligament,ACL)的损伤或修复可能的影响。方法:用不同浓度的PGE2处理体外培养的滑膜细胞,处理后12、24、48 h和72 h明胶酶谱法检测培养液中MMP-2的活性;再用合适浓度的PGE2单独或分别与7种信号通路特异性抑制剂同时处理滑膜细胞,明胶酶谱法检测MMP-2的活性,并对其进行相对定量。结果:PGE2呈浓度和时间依赖性地增高滑膜细胞MMP-2的活性。p38、ERK、PKA通路抑制剂SB203850、PD98059、KT5720对PGE2诱导滑膜细胞MMP-2活性的增高无明显抑制作用;而JNK、AP-1和核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)通路抑制剂SP600125、姜黄素(Curcumin)和Bay11-7082/7085显著抑制了PGE2诱导MMP-2活性的增高,分别使72 h时MMP-2的活性降至43%、25%和16%、11%(P<0.01)。结论:PGE2诱导滑膜细胞MMP-2活性的增加可能是ACL损伤后难以自行修复的原因之一。JNK、AP-1和NF-κB通路可能参与调控PGE2对MMP-2活性的诱导;其中以NF-κB作用最显著,可能为ACL损伤的治疗提供一种新思路。
- 陈荣富黄伟梁熙谢静宋国立王春莉符纯锋
- 关键词:前列腺素E2滑膜细胞基质金属蛋白酶-2前交叉韧带
- 应力环境对组织培养法保存的人骨软骨的代谢特点的影响
- 目的:同种异体骨软骨移植是一种公认的治疗关节软骨损伤的方法.但是,在移植物储存过程中,细胞外基质的降解影响了其生物力学性能,从而影响了移植效果.由于软骨细胞易受环境中机械力的影响,而且关节软骨的营养也需依靠应力环境.因此...
- 黄伟杨健陈浩陈荣富梁熙胡宁
- 关键词:关节软骨赖氨酰氧化酶基质金属蛋白酶
- 前列腺素E_2干预后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞的迁移被引量:2
- 2012年
- 背景:细胞迁移是组织损伤后修复过程中的重要环节之一,但是膝关节交叉韧带损伤后局部产生的细胞因子前列腺素E2对后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞迁移的影响尚未见报道。目的:在后交叉韧带成纤维细胞与滑膜细胞单培养和共培养的条件下,研究前列腺素E2对此2种细胞迁移的影响。方法:体外培养人后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞,分别进行2种细胞的单培养和Transwell共培养,并用质量浓度10μg/L的前列腺素E2干预。比较单培养和共培养下细胞生长状态;细胞划痕试验检测24h时细胞的迁移率。结果与结论:共培养使后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞的迁移率较单培养增高128%和48%。前列腺素E2分别使单培养下后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞的迁移率降低了28%和14%;使共培养下细胞的迁移率较相应的共培养组未处理细胞下降37%和24%。证实,在前列腺素E2的刺激下,后交叉韧带成纤维细胞和滑膜细胞迁移率均明显降低,尤其对共培养下后交叉韧带成纤维细胞迁移率的抑制更显著。
- 陈荣富王春莉谢静黄伟梁熙宋国立符纯锋陈诚
- 关键词:细胞迁移后交叉韧带共培养滑膜细胞前列腺素E2
- 钛颗粒和TNF-α对人膝关节滑膜细胞MMP-1、2、3表达的影响
- 2013年
- 研究钛颗粒和肿瘤坏死因子(TNF-α)对人滑膜细胞基质金属蛋白酶(MMP-1、2、3)表达及活性的影响,从而探讨滑膜在钛磨损颗粒诱导的金对金人工关节假体周围骨溶解中的可能机制。用钛颗粒和TNF-α处理体外培养的人膝关节滑膜细胞,在处理后2h提取总RNA;逆转录PCR、荧光实时定量PCR对人滑膜细胞MMP-1、2、3基因的表达进行半定量和定量分析。处理后12、24和48h收集培养上清液,用明胶酶谱法检测MMP-2的活性。结果显示,与对照组相比,钛颗粒、TNF-α均明显增加了MMP-1、2、3基因的表达(P<0.05),两者联合作用更明显(P<0.01)。MMP-2蛋白水平和基因表达趋势基本一致,钛颗粒和TNF-α处理分别增加MMP-2活性1.3倍和1.5倍(P<0.05),联合处理作用更为明显,增加1.7倍(P<0.01)。钛颗粒和TNF-α能够刺激人膝关节滑膜细胞MMP-1、2、3基因表达的增加以及MMP-2蛋白活性。本研究表明,金对金人工关节置换术后,磨损钛颗粒可能刺激滑膜细胞,增加骨细胞外基质的降解,导致假体的骨性支持结构力学性能下降,促使假体无菌性松动的发生。
- 符纯锋谢静陈荣富王春莉许春明陈诚王志强林良波黄伟梁熙宋国立
- 关键词:钛颗粒无菌性松动滑膜肿瘤坏死因子基质金属蛋白酶
- 共培养下前交叉韧带成纤维细胞中LOXs与MMPs的基因表达情况被引量:3
- 2013年
- 前交叉韧带(ACL)损伤修复的研究进展表明,膝关节内覆在ACL上的滑膜组织对ACL损伤修复起到非常重要的作用。为探讨滑膜细胞对ACL成纤维细胞中影响组织修复的关键酶即赖氨酰氧化酶(LOXs)与基质金属蛋白酶(MMPs)表达及活性的影响,本文通过建立体外ACL成纤维细胞与滑膜细胞共培养体系,采用RT-PCR与明胶酶谱(zemography)技术定量分析比较单培养与共培养ACL成纤维细胞中LOXs与MMP-1、2、3基因的表达情况及MMP-2蛋白酶的活性。结果显示:(1)共培养促进ACL成纤维细胞中的LOXs与MMP-2的基因表达,但降低MMP-1、MMP-3的基因表达。(2)与单培养组相比,在不同时间点,共培养组都促进ACL成纤维细胞中MMP-2蛋白酶的表达及其活化程度。以上结果表明:ACL细胞和滑膜细胞之间存在密切的交流影响了LOXs与MMP-1、2、3的基因表达,为后续探索ACL损伤修复的机制及治疗方法提供了理论依据。
- 王春莉梅虎谢静蒋稼欢陈荣富尹琳符纯锋陈诚宋国立
- 关键词:前交叉韧带滑膜共培养赖氨酰氧化酶基质金属蛋白酶