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非洲猪瘟预警系统与快速检测技术: 花群义徐自忠周晓黎秦智锋吕建强董俊杨建明杨云庆詹爱军林庆燕曾少灵阮周曦陈兵陶虹; 该课题研究已按照合同规定的研究内容和考核指标，完成了项目的主要研究任务，达到了预期目标：1、根据Genebank中非洲猪瘟VP73基因序列，人工合成的VP73全基因克隆至pMD 18-T克隆载体质粒中，再进行亚克隆插入p...; 关键词：; 关键词：非洲猪瘟预警系统

鸽源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针: 发明名称：鸽源性成分实时荧光PCR检测方法及检测用引物和探针。技术领域：本发明涉及动物物种和动物源性成分鉴定技术领域，具体涉及一种鸽源性成分的检测方法；尤其涉及一种鸽源性成分的实时荧光PCR检测方法。本发明旨在鉴别肉食品...; 张彩虹宗卉曹琛福杨俊兴吕建强陶虹; 文献传递

一种非洲猪瘟抗原及其制备的荧光纳米晶试纸条: 本发明公开了一种非洲猪瘟重组抗原及利用其制备的非洲猪瘟抗体检测荧光纳米晶试纸条。本发明利用基因工程的方法，获得非洲猪瘟病毒的特异性结构蛋白VP73蛋白作为重组抗原，其基因序列如序列表所示。将纯化后的VP73蛋白划线包被在...; 吕建强花群义杨俊兴张彩虹曹琛福孙洁刘建利陶虹宗卉廖立珊唐金明曾少灵阮周曦黄超华; 文献传递

H5N8亚型流感病毒双重实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价: 2018年; 流感病毒变异迅速,为研究和建立一种针对H5 N8亚型流感病毒核酸准确灵敏的检测方法,分别选择H5 N8亚型流感毒株序列相对保守的HA基因和NA基因作为H5 N8亚型流感病毒检测的靶序列,设计两套特异性的引物和探针,选择两种不同的荧光标记,建立基于TaqMan探针的双重荧光RT-PCR快速检测H5 N8亚型禽流感病毒检测方法。实验结果表明,所建立的H5 N8亚型流感病毒real time RT-PCR检测方法 HA基因检测的灵敏度为10-5,NA基因检测的灵敏度为10-5,重复性好,特异性佳。结果表明:本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测H5 N8亚型流感病毒,耗时短,可很快作出判定结果,适用于H5 N8流感病毒的分子生物学检测和监测。对于控制流感流行,减少经济损失,最大限度保护社会人群健康具有很大意义。; 孙洁廖立珊廖立珊于力刘建利刘建利杨俊兴陶虹杨俊兴曾少灵林彦星黄超华

应用SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线同时检测两种致病菌被引量：3: 2009年; SYBR GreenⅠ是一种特异结合双链DNA的染料,已被证明能灵敏地检测核酸。采用SYBRGreenⅠ荧光PCR熔解曲线,通过摸索、优化PCR反应条件及反应体系,扩增出两条不同大小、Tm值不同的目的核酸片段,表现在熔解曲线上出现两个独立的波峰,建立了用SYBR GreenⅠ荧光PCR熔解曲线来检测多个基因的方法,从而实现不用核酸探针,简单、经济、快速的多重荧光PCR方法检测沙门菌和产单核细胞李斯特菌。; 曹琛福花群义秦智锋吕建强曾少灵陶虹张彩虹宗卉; 关键词：SYBR 沙门菌产单核细胞李斯特菌

非洲猪瘟病毒VP73蛋白特异性多克隆抗体的制备方法及应用: 本发明公开一种非洲猪瘟病毒VP73蛋白小鼠腹水多克隆抗体的制备方法，旨在提供一种腹水效价高，亲和力高，抗原用量少、操作简便的新型多克隆抗体的制备方法。所述的非洲猪瘟病毒多克隆抗体的制备包括：对ASFV VP73基因序列P...; 陶虹花群义吕建强曹琛福刘建利靳雯雯杨俊兴张彩虹孙洁唐金明廖立珊; 文献传递

蓝舌病和鹿流行性出血病新型快速鉴别检测技术: 杨俊兴阮周曦陶虹吕建强张彩虹曹琛福孙洁陈兵胡运发叶奕优刘建利周晓黎秦智锋卢体康花群义; 蓝舌病(BLU)和鹿流行性出血病(EHD)是重要的动物虫媒病，均为世界动物卫生组织(OIE)规定的重要动物传染病.近年来，随着全球气候的变化、生态环境的改变、世界经济一体化进程的加快、人员交往频繁和国际间动物贸易的逐年增...; 关键词：; 关键词：蓝舌病诊断试剂

单一引物标记LUX荧光RT-PCR鉴别BTV和EHDV被引量：1: 2010年; 采用在线LUXTM专业软件,根据BTV-NS3基因序列和EHDV-NS3基因序列,通过特异性单一引物序列3′末端的荧光标记,分别设计出两对BTV和EHDV的LUX荧光PCR引物,并采用BLAST软件对各引物进行匹配性和特异性分析,根据分析结果选择合适的引物合成。经过各反应条件的优化和特异性、敏感性试验,并对BTV、EHDV、VSV、PPRV、BVDV、AKV的BHK-21细胞培养物和临床样品检测,与常规RT-PCR进行对比检测,建立了能同时鉴别检测BTV和EHDV的二重LUXTM荧光PCR方法。该二重LUXTM荧光PCR的BTV和EHDV各自引物只对相应的病毒呈阳性反应,两者没有交叉反应现象,对健康牛、羊和猪基因组DNA、BKH-21细胞对照,以及其他几种相似疾病如VSV、PPRV、BVDV、AKV均呈阴性反应。该法对病毒的细胞培养液鉴别检测敏感性可达1TCID50C以上,比常规RT-PCR敏感性提高10倍以上,从样品核酸纯化到完成二重LUXTM荧光PCR反应和熔解曲线分析,仅需3h,在进出口动物检验检疫中快速鉴别BTV和EHDV具有实际应用价值。; 张彩虹花群义阮周曦杨俊兴曾少灵陶虹陈兵曹琛福林庆燕周晓黎; 关键词：蓝舌病病毒

伪狂犬病病毒实时荧光PCR的建立和应用被引量：6: 2010年; 伪狂犬病是世界范围内严重影响养猪业发展的重要动物疫病,快速检测是有效防控该病的重要措施之一。为了建立该病的快速分子生物学检测方法,根据GenBank中登录的伪狂犬病病毒gD基因序列,选择高度保守区域设计引物和TaqMan荧光探针,通过对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立了用于检测伪狂犬病病毒的实时荧光PCR方法。特异性试验结果表明,该检测方法只能检测到目的病毒,表明其具有良好的特异性。灵敏性试验发现,其最低检测限可达1.42pg/μL的总DNA,与PCR方法的灵敏度对比试验表明,其敏感度比PCR至少高10倍。对同一样品进行重复性检测,在组内及组间检测的荧光扩增曲线基本重叠,证实其重复性好。对180份临床样品进行伪狂犬病病毒核酸检测,结果发现有52份阳性样品。结果表明,所建立的实时荧光PCR方法可对伪狂犬病病毒进行准确、快速的检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性好的优点,是开展伪狂犬病的临床检测和疫情监测工作的有力工具。; 吕建强何云蔚卢体康花群义秦智锋陶虹杨俊兴阮周曦; 关键词：伪狂犬病病毒实时荧光PCR

PCR－mtDNA检测鹌鹑源性成分的扩增引物及其检测试剂盒和使用方法: 本发明主要涉及禽类源性成分的检测，尤其涉及鹌鹑源性成分的检测。一种用于检测鹌鹑源性成分的特异性PCR－mtDNA扩增引物，其主要特点是上下游长度均为18bp的核苷酸，序列为上游引物AF(18bp)：5，－TGAGCTCA...; 宗卉张慧霞张利平阮周曦吴建平李丽娟陶虹; 文献传递

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陶虹