韩变梅
- 作品数：12 被引量：60H指数：5
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划首都医学发展科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠骨髓间充质干细胞条件培养液促进心肌细胞肥大
- 2007年
- 体外模拟心肌缺血微环境,研究骨髓间充质干细胞(MSCs)的旁分泌作用对心肌细胞的影响。以大鼠MSCs各时间点的条件培养液刺激心肌细胞,观察心肌细胞蛋白含量、[3H]-Leu掺入、ANF-荧光素酶(luciferase)表达和心肌细胞面积的变化。MSCs条件培养液处理心肌细胞后,与对照组相比较6h及9h时间点的条件培养液可明显增加心肌细胞蛋白含量、[3H]-Leu掺入、ANF-荧光素酶表达以及心肌细胞面积,其中以6h时间点条件培养液的作用最为显著(P<0.01)。MSCs条件培养液能够通过旁分泌作用刺激心肌细胞肥大,此现象提示移植入心肌缺血区MSCs可能通过旁分泌作用影响心肌细胞,从而参与细胞移植后心功能的改善。
- 徐瑞霞陈曦陈静海韩瑜韩变梅
- 关键词：骨髓间充质干细胞条件培养液心肌细胞肥大旁分泌
- 心肌胶原及代谢被引量：16
- 2006年
- 1981年,Borg和Caulfield应用扫描电镜对心脏间质进行系统研究,提出心脏纤维胶原网络的新概念。胶原网在心肌中有重要作用,它将心肌细胞和血管固定,相互连接呈一体,直接影响它们的收缩、舒张和在完整组织中的形态,而胶原在这个网络中占有举足轻重的作用,心肌纤维化的形成是胶原合成与分解代谢失衡的结果。
- 韩瑜韩变梅柳明洙陈曦
- 关键词：胶原细胞外基质
- 溶血磷脂酸及其受体在大鼠心肌重塑中的作用被引量：7
- 2005年
- 目的研究溶血磷脂酸(LPA)及其受体对心脏成纤维细胞增殖的影响及与心肌重塑的关系,探索LPA在心脏组织的生物学作用。方法采用3H-TdR或3H-Leu掺入法测定LPA对心脏成纤维细胞DNA及蛋白质合成的影响;用Northern杂交检测c-FOSmRNA的表达;RT-PCR测定大鼠急性心梗心肌组织LPA受体基因表达。结果LPA以浓度依赖方式刺激乳鼠心脏成纤维细胞DNA合成和蛋白质合成;LPA刺激成纤维细胞c-FOSmRNA表达呈时间与剂量依赖性;G-蛋白偶联受体阻断剂苏拉明(suramin)能有效抑制LPA诱导的成纤维细胞DNA合成及c-FOSmRNA表达上调。大鼠急性心梗5周后,心肌梗死区LPA受体mRNA表达上调。结论LPA通过G-蛋白偶联受体诱导c-FOS基因表达增加,从而刺激心脏成纤维细胞增殖,参与急性心梗后心肌重塑的形成和发展。LPA在心脏组织中有重要的生物学功能。
- 何兰杰韩变梅马睿李虹伟沈潞华陈曦
- 关键词：溶血磷脂酸心肌重塑急性心梗
- 溶血磷脂酸受体基因在大鼠心肌细胞的表达分析及3型受体亚型的克隆鉴定
- 2012年
- 目的确定5种亚型溶血磷脂酸受体(LPAR)基因在大鼠心肌细胞中的表达,针对主要分布亚型LPAR3基因构建重组质粒。方法利用实时荧光定量PCR和Western Blot检测LPA受体亚型在原代培养乳鼠心肌细胞的表达量;克隆LPAR3基因的编码区全序列,构建重组质粒。结果在5种LPAR亚型中,LPAR3在心肌细胞中的表达最高,其次为LPAR1,LPAR4和LPAR5在心肌细胞中的表达较低,而LPAR2则未检测到;Western Blot检测显示LPAR3的表达明显高于LPAR1的表达。对LPAR3基因进行序列分析,结果显示GenBank中序列号为NM_023969.1的序列与其它物种的该序列比较,缺失了一段保守的碱基片段;根据另一条序列(AB051164.1)设计引物,成功扩增LPAR3全基因片段,构建重组质粒。结论 LPAR3是大鼠心肌细胞中主要的溶血磷脂受体亚型;GenBank中序列号为NM_023969.1的LPAR3基因序列存在碱基缺失,大鼠中编码LPAR3的正确序列为AB051164.1。
- 王芳聂宇杨晋静韩变梅丛祥凤陈曦
- 关键词：心肌细胞基因序列分析
- 常规TRIzol法提取血清microRNA的改良被引量：13
- 2011年
- 目的:对现有常规提取血清microRNA的方法进行改良。方法:运用常规TRIzol法和改良后的血清microRNA提取方法分别提取健康人血清中的microRNA;利用反转录茎环引物及TaqMan探针进行实时荧光定量PCR检测miR-16和miR-21的含量,通过比较miR-16和miR-21的Ct值以鉴定不同提取方法对microRNA检测的影响。结果:改良后的血清microRNA提取方法可明显降低PCR检测中miR-16和miR-21的Ct值。结论:改良的血清microRNA提取方法可有效提高目的microRNA的检出水平。
- 聂宇张洋韩变梅王恺隽丛祥凤陈曦
- 提高干细胞移植治疗缺血性心脏病效果关键问题的应用基础研究
- 陈曦丛祥凤侯剑峰徐瑞霞陈静海朱伟铨韩变梅刘学文胡盛寿刘学彬李宗伟魏华邓琳子聂宇王芳
- 该成果属于医药卫生技术领域。围绕提高干细胞移植治疗缺血性心脏病疗效的关键问题，以改善缺血心肌微环境为研究重点，应用“预处理策略”从细胞和活体动物两个水平开展系统研究，主要技术创新点包括：1.模拟急、慢性心肌梗死微环境特点...
- 关键词：
- 关键词：干细胞移植缺血性心脏病
- 溶血磷脂酸受体与大鼠急性心肌梗死后早期心肌细胞凋亡的关系被引量：3
- 2005年
- 目的:本研究以急性心肌梗死为心肌损伤的诱发因素,检测急性心肌梗死后早期(48h)大鼠溶血磷脂酸3种不同受体亚型表达谱,分析其与心脏细胞的病理学特征及心功能的关系。方法:①冠状动脉结扎术后24h存活的16只雌性SD大鼠作为心肌梗死组,另设假手术组为对照组。②术后48h行血流动力学测定、称重及病理切片分析心肌肥厚状况;原位末端标记法和DNA凝胶电泳检测心肌细胞凋亡。③反转录聚合酶链反应方法检测溶血磷脂酸3种受体亚型基因表达谱。结果:①与假手术组相比,心肌梗死组左心室收缩压和左心室内压最大上升下降速率均显著降低(P<0.05～0.01),左心室舒张末压显著升高(P<0.05)。②病理切片分析心肌梗死后48h,无明显的左室扩张与心肌肥大。③DNA凝胶电泳与原位末端标记法的结果显示大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡指数显著升高犤梗死区与梗死边缘区凋亡指数分别为(21.286±15.575)%,(19.816±12.000)%,假手术组(1.270±1.070)%,P<0.01犦。④反转录聚合酶链反应结果显示,与假手术组相比,心肌梗死后早期重塑过程中溶血磷脂酸1、溶血磷脂酸2受体基因表达无显著差异,而溶血磷脂酸3受体表达增加40%(P<0.01)。结论:大鼠急性心肌梗死后早期出现左心室功能异常,早期重塑过程中(术后48h)有大量心肌细胞凋亡,但无明显的左室扩张与心室壁肥厚,而同时溶血磷脂酸3受体表达显著增加,提示溶血磷脂酸3与心肌梗死后心肌细胞凋亡相关,可能主要介导溶血磷脂酸在心肌梗死后早期的凋亡通路的调节。
- 陈静海陈跃峰韩变梅朱伟铨蔡艳杨跃进陈曦
- 关键词：细胞凋亡心肌梗塞
- 血管紧张素Ⅱ促进培养的新生鼠心肌细胞表达TNF-α被引量：12
- 2003年
- 目的 观察血管紧张素Ⅱ对培养心肌细胞表达TNF α的影响。方法 采用新生大鼠心肌原代培养和免疫组化 ,RT PCR评价用 10 -7M血管紧张素Ⅱ ,10 0ng/ml脂多糖 (LPS)对心肌细胞表达TNF α的影响。结果 TNF α的免疫组化染色在对照心肌细胞呈阴性 ,10 0ng/ml脂多糖和 10 -7M血管紧张素Ⅱ作用心肌细胞 2 4小时、4 8小时后 ,心肌细胞胞浆中出现棕色颗粒 ,随着作用时间的延长有增强趋势。与单纯培养的对照心肌细胞相比 ,10 -7M血管紧张素Ⅱ ,10 0ng/ml脂多糖刺激心肌细胞 2 4小时后心肌细胞TNF α表达的mRNA显著增高 ,刺激 4 8小时 ,TNF αmRNA进一步增高。结论 正常情况下培养的新生大鼠心肌细胞表达的TNF α在蛋白质水平和mRNA水平均极低 ,10 -7M血管紧张素Ⅱ可以促使培养的心肌细胞表达TNF α 。
- 李世英倪新海陈曦韩变梅党爱民刘国仗
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α心肌细胞
- 溶血磷脂酸对幼年大鼠心肌细胞收缩和钙瞬变的影响
- 2013年
- 目的我们前期的研究发现LPA受体在幼年大鼠心脏的表达显著高于成年的表达,提示LPA信号在心脏收缩功能尚未成熟时可能具有更为重要的调节作用。本研究通过观察LPA对此未成熟阶段心肌细胞钙瞬变和收缩力的作用,探讨LPA信号对幼年心肌兴奋-收缩耦联的影响。方法 Langendorff装置逆向灌流胶原酶分离获得不同发育阶段大鼠心肌细胞;采用IonOptix细胞收缩和钙离子浓度同步测定系统进行心肌细胞收缩力和钙瞬变的测定;Western blot检测不同发育阶段心肌细胞LPA受体的表达。结果 LPA对出生后14天和21天大鼠心肌细胞的收缩和钙瞬变均没有显著影响,表明LPA信号并不参与出生后14-21天大鼠心肌细胞的兴奋-收缩耦联过程和心肌细胞收缩。在大鼠出生后发育过程中,LPA受体在心肌细胞的表达在出生后14天已显著下调,不同于在整体心脏表达下调的时间点(P21d),这可能是LPA对此发育阶段心肌细胞的收缩和钙瞬变均不产生影响的原因,提示在出生后14天LPA信号对心肌细胞的发育调节功能可能即已减弱或消失。结论 LPA信号对出生后14天及之后心肌收缩和钙瞬变无显著影响,但尚不能排除LPA对出生后更早期的未成熟心肌细胞收缩和兴奋-收缩耦联的作用。
- 王芳韩变梅刘学文蔡琳丛祥凤陈曦
- 关键词：溶血磷脂酸未成熟心肌钙瞬变
- 大动脉转位候选基因DYNC2LI1的发现与功能分析
- 2021年
- 目的通过遗传学分析及功能学实验发现新的大动脉转位候选基因。方法对381例散发大动脉转位患者进行全外显子组测序,利用基因负荷分析筛选候选基因。针对患者中发现的不同突变,进行突变功能分析:构建体外表达质粒,并采用实时荧光定量PCR及Western blot检测mRNA及蛋白质的表达情况。在NIH3T3成纤维细胞中敲低目的基因,并对表达谱进行通路富集分析。结果与人群突变相比,大动脉转位组中DYNC2LI1基因突变负荷显著增加,提示DYNC2LI1基因突变与大动脉转位的发生存在必然联系。相比于野生型质粒,DYNC2LI1基因突变c.A239C,p.D80A的mRNA及蛋白的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.0001,P<0.01);c.T240A,p.D80E和c.T389C,p.L130R的mRNA的表达量同样明显降低(P<0.001,P<0.05),但蛋白表达没有明显差异(P>0.05)。对DYNC2LI1敲低后的细胞转录组分析发现,伪结构组装相关通路的基因显著上调;而与心脏结构发育及体轴形态等通路相关的基因发生下调。结论与纤毛结构和功能相关的DYNC2LI1基因是大动脉转位的潜在致病基因。
- 崔金慧陈文刘宣雨李文轲韩变梅刘学文逄坤静李守军周洲
- 关键词：先天性心脏病大动脉转位纤毛
