魏玉珍 作品数:42 被引量:159 H指数:6 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “重大新药创制”科技重大专项 国家科技基础条件平台建设计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
蛇足石杉内生细菌多样性 被引量:16 2016年 【目的】探索国家二级保护野生药用植物蛇足石杉内生细菌的物种和生理活性多样性,发现并收集药用植物内生菌资源。【方法】分别从四川和福建等不同生态环境采集蛇足石杉植株,运用纯培养手段,对经过表面消毒处理的蛇足石杉样品进行内生菌的分离、培养;根据菌株16S r RNA基因信息,计算从蛇足石杉不同区系分离获得的内生细菌间的Jaccard指数、多样性指数、优势度指数与均匀度指数等,分析内生菌物种多样性;应用6种筛选模型对分离得到的内生菌进行生理活性测定,初步评价蛇足石杉内生细菌的生理活性多样性和药用价值。【结果】从12份蛇足石杉植物样品中分离获得356株内生菌菌株,菌株16S r RNA基因序列信息显示,分离得到的蛇足石杉内生细菌隶属于放线菌门、厚壁菌门和变形菌门等3个门的26个科、41个属,来源于蛇足石杉地上和地下部位的菌株数目、多样性指数等无明显差异。从中发现了分属于拟无枝酸菌属(Amycolatopsis)、Angustibacter、节杆菌属(Arthrobacter)、短小杆菌属(Curtobacterium)、Frondihabitans、Glaciihabitans、Jatrophihabitans、Luteimicrobium、Massilia、Naumannella和Tardiphaga等11个属的11个潜在新物种,以及皮生球菌科(Dermacoccaceae)的1个新属。在抗菌活性筛选中,356株纯培养物抗粪肠球菌、抗肺炎克雷伯菌、抗耻垢分枝杆菌以及抗水稻白叶枯病菌的阳性率分别是9.0%、1.4%、2.2%、0.8%;抑制SS04生长的降血脂药物筛选模型上的阳性率是8.1%;抗HIV-1的初筛阳性率为4.5%。共计74株菌在一个或多个筛选模型中显示出活性,初筛总阳性率为20.8%。【结论】蛇足石杉内生细菌具有丰富的物种多样性和生理活性多样性,是进一步发掘新型天然产物的理想菌种资源。 孙红敏 魏玉珍 方晓梅 余利岩 张玉琴关键词:蛇足石杉 植物内生菌 多样性 生理活性 东北红豆杉内生真菌代谢产物的化学研究 被引量:35 1998年 在寻找微生物活性代谢产物的过程中,发现东北红豆杉内生真菌TCH68的发酵液能够使细胞有丝分裂停止在中期,从其培养物中分离得到2个新化合物TCH68-1和TCH68-2。经光谱分析确定TCH68-1的结构为2,5-dioxo-3-methyl-8,9,10-trimethoxy-9-chloro-1,106,8-dilactone。TCH68-2的结构为2-[(Z)-1-oxo-2,3-dihydroxy-4-heptenyl]-2-ene-3-methyl-4-oxo-5-hydroxy-6-methoxy-6-benzoyl-ε-caprolactam。 姜威 金文藻 张月琴 魏玉珍关键词:东北红豆杉 内生真菌 代谢产物 紫杉醇 抗癌药 具有HIV-1蛋白酶抑制活性的寡肽化合物及其制备方法和用途 本发明提供了具有氨基酸序列Tyr-Leu-Val-Leu-His(SEQ?IDNO:1)的寡肽化合物,其具有HIV-1蛋白酶抑制活性。本发明的寡肽化合物可以是化学合成的或重组产生的,或可以从微生物(特别是放线菌)提取获得... 司书毅 陶佩珍 刘晓 姜威 董飙 章天 蒋建东 余利岩 魏玉珍 白硕可 樊秀勇文献传递 灰黄青霉、由其产生的抗菌活性化合物及应用 本发明提供了一种灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)CPCC400528,其保藏号为CGMCC NO.5752,由其发酵制备产生的抗菌活性化合物,其分子式为C<Sub>7</Sub>H<Sub>6... 余利岩 王莉宁 张志明 张涛 游雪甫 胡辛欣 刘红宇 魏玉珍文献传递 以SecA为靶点的新型抗绿脓杆菌药物细胞水平筛选模型的建立和应用 被引量:9 2008年 Sec途径(即分泌途径secretion pathway)是蛋白质转运的主要途径。其中,最为关键的组分之一是SecAATP酶,是蛋白质转运途径中的"动力泵",通过ATP的水解循环驱使蛋白质前体穿过细菌内膜,在细菌中是不可缺少的。我们推测抑制SecAATP酶活性的化合物,必然会在一定程度上抑制蛋白质的转运和分泌。通过绿脓杆菌与大肠杆菌SecA蛋白的互补作用,利用本实验室构建的高效表达SecA蛋白的基因工程菌,建立了SecA蛋白ATP酶活性抑制剂的细胞水平筛选模型。利用所纯化的绿脓杆菌SecA蛋白的ATP酶活测定体系,验证了所建立的细胞水平筛选模型具有一定的特异性。研究结果表明其中两个酯相组分在细胞水平和蛋白水平均具有活性,值得进行深入的研究。 赵莉莉 李秋萍 魏玉珍 张玉琴 余利岩关键词:药物筛选 绿脓杆菌 蛋白转运 一种筛选PknB抑制剂的反应体系及其筛选方法 本发明提供一种用于筛选PknB抑制剂的反应体系,以及利用该体系筛选PknB抑制剂的方法。本发明的筛选方法包括配置反应体系、设置反应组、制备荧光素酶反应液和筛选。本发明PknB抑制剂的筛选方法简单可靠,效率高,成本低,是一... 余利岩 黄彬 赵莉莉 苏静 李秋萍 魏玉珍 张玉琴文献传递 以蛋白激酶A为靶点的抗结核药物高通量筛选模型的建立和应用 被引量:3 2014年 目的建立以蛋白激酶A为靶点的抗结核药物高通量筛选模型,应用该模型筛选具有特异性酶活抑制活性的微生物发酵液粗提物样品。方法以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,扩增目的基因片段pkn A,构建表达载体p ET43.1a-pkn A,在大肠杆菌中克隆表达了重组MTB Pkn A蛋白;采用三步级联的反应方法 ,利用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸到氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸这一反应最大吸光值波长的变化,建立和优化蛋白激酶A抑制剂高通量药物筛选模型。结果成功构建了表达载体p ET43.1a-pkn A;建立了稳定灵敏,可用于靶向结核分枝杆菌蛋白激酶A的抗结核药物高通量筛选模型;利用该模型对4000个微生物发酵液粗提物样品进行筛选,最终得到21个抑制蛋白激酶A活性的阳性样品,阳性率0.53%;以耻垢分枝杆菌和海分枝杆菌为检定菌,平板纸片法检测阳性样品的抗分枝杆菌活性,然后对阳性样品的细胞毒性和酶活抑制特异性进行评价后,最终得到8个阳性样品,其中I10AA-02916、I09AA-02717、I09AB-02729、I08AB-00801这4个阳性样品酶活抑制特异性、抗菌活性均较好,且细胞毒性较低。结论建立了高稳定性的以蛋白激酶A为靶点的抗结核药物高通量筛选模型,应用该模型所得到的发酵液阳性样品值得进一步研究。 罗睿 徐建 魏玉珍 李海龙 刘红宇 苏静 赵莉莉 张玉琴 余利岩关键词:抗结核药 高通量筛选 以SecA动力泵为靶点的抗革兰氏阴性细菌药物筛选模型及用途 本发明涉及一种高效表达革兰氏阴性细菌例如绿脓杆菌secA基因的secA缺失的温度敏感型重组大肠杆菌,一种以SecA动力泵为靶点的新型抗革兰氏阴性细菌药物微生物细胞水平筛选模型,其利用高效表达绿脓杆菌secA基因的secA... 余利岩 赵莉莉 司书毅 孙承航 李秋萍 魏玉珍 张玉琴 刘红宇文献传递 链霉菌CPCC 203702中抗结核分枝杆菌活性次级代谢产物的分离与鉴定 2015年 目的研究链霉菌CPCC 203702中的抗结核分枝杆菌活性次级代谢产物。方法发酵液离心后,上清液经乙酸乙酯萃取、正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和半制备HPLC等方法进行以抗耻垢分枝杆菌活性为导向的活性化合物分离纯化,通过质谱和核磁共振波谱技术并结合文献数据进行化合物结构鉴定;分别采用平板纸片法和阿尔玛蓝法检测目的化合物的抗耻垢分枝杆菌以及抗结核分枝杆菌活性。结果从链霉菌CPCC 203702发酵液中分离到1个具有显著的抗结核分枝杆菌活性的伯尔尼霉素类化合物伯尔尼霉素C,其抗结核分枝杆菌MIC为2μg/ml;完成其核磁数据的完整归属。结论首次报道了伯尔尼霉素类抗生素具有显著的抗结核分枝杆菌活性,丰富了硫肽类抗生素的活性研究,也为抗结核药物的发现提供一个新的视角。 张新明 张德武 庞旭 徐建 张丽蓉 魏玉珍 刘红宇 余利岩关键词:链霉菌属 一株具有乙酰胆碱酯酶抑制剂活性的细菌菌株的分离与鉴定 被引量:4 2007年 抑制乙酰胆碱酯酶以增加胆碱能传递水平而成为目前改善早老年性痴呆症最有效的方法之一。本研究通过乙酰胆碱酯酶抑制剂筛选模型筛选到一株革兰氏阴性细菌CPCC10056。16S rRNA基因序列分析发现该菌株为玫瑰单胞菌属(Roseomorms)的一个新成员。菌株CPCC10056的最适生长条件为32℃,pH7.0-7.5,在供试培养基上形成酒红色、湿润、光滑的菌落。 魏玉珍 宋茂卿 关艳 李秋平 张月琴