兰婧
- 作品数:7 被引量:17H指数:2
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- A型肉毒素重链干预神经细胞组蛋白3乙酰化水平的初步研究
- 2018年
- 目的通过对离体神经细胞培养及大鼠在体脊髓损伤模型施予BoNT/A重链,观察损伤局部组蛋白乙酰化水平的变化,为探讨BoNT/A重链干预神经细胞再生的分子机制提供实验依据。方法将BoNT/A重链加入细胞培养液或在脊髓损伤模型基础上局部给予小剂量BoNT/A重链;收集细胞及损伤局部脊髓组织,采用免疫荧光、SDS-PAGE和Western blot等方法对细胞和脊髓组织内选择性组蛋白亚类的乙酰化水平进行检测。结果不论是体内应用还是培养液内加入BoNT/A重链,细胞和组织内组蛋白3的乙酰化水平皆明显增多;BoNT/A重链所致的Neuro-2a细胞组蛋白3乙酰化水平的增高与神经突起的增长相匹配,即同一时间点组蛋白乙酰化水平显著增高的同时,神经突起的生长也呈显著增长;脊髓损伤基础上给予BoNT/A重链所显示的组蛋白3乙酰化的表达量增高呈现双时相高峰(2 h和48 h)。结论 BoNT/A重链可促进组蛋白3的乙酰化;在同一时间点,组蛋白3的乙酰化水平与神经突起增长的长度相一致;组蛋白3乙酰化可能是BoNT/A重链促神经突起生长的相关机制之一。
- 兰婧刘福高扬李志强刘雅赵明伟袁海霞李夏青
- 关键词:A型肉毒素组蛋白乙酰化
- 小鼠神经母细胞瘤细胞株用于A型肉毒毒素重链体外实验的可行性研究被引量:2
- 2015年
- 目的探讨小鼠神经瘤母细胞(Nero-2a)细胞株用于A型肉毒毒素重链(BoNT/AHC)体外细胞模型的可行性。方法对体外培养1~5h的Nero-2a细胞和经A型肉毒毒素(BoNT/A)重链作用的Neuro-2a细胞(细胞接种于96孔培养板后随机分为对照组、0.01nmol/L组、0.1nmol/L组、1nmol/L组和10nmol/L组),进行BoNT/AHC相关受体的检测,观察BoNT/AHC作用不同时间(24、48及72h)后BoNT/AHC对细胞突起生长状况的影响,包括有突起细胞的百分比、细胞突起的长度以及突起总数。数据经GraphPadPrism5.0 One.wavANOVA分析。结果体外培养后Neuro-2a细胞表达高亲和力的突触囊泡蛋白2(SV2)和低亲和力的三涎酸神经节苷脂亚型lb(GTlb)受体。与对照组相比,BoNT/AHC能明显促进Neuro-2a细胞突起再生及突起长度增加,其中0.1nmol/BoNT/AHC作用24h后突起的Neuro-2a细胞百分比为(20.61士4.87)%高于对照组[(15.27士3.56)%,F=37.7,P〈0.001]、神经突起的总数量为(2.18士1.241个高于对照组(1.68土0.99)个,(F=9.54,P〈0.001)、平均突起的长度为(38.76士38.11)gm,与对照组(23.38士27.13)gm相比差异无统计学意义;当BoNT/AHC的浓度增加为1、10nmol/L时,有突起的Neuro-2a细胞百分比分别为(15.08士5.27)%和(12.65士5.65)%,神经突起的总数量分别为(1.65土0.85)个和(1,64士0.85)个、平均突起的长度分别为(33.75土39.11)μm和(18.95士21.71)μm,与对照组相比差别不大,差异无统计学意义。随作用时间的延长(48h和72h)0.1nmol/L组有突起细胞的百分比、细胞突起的长度以及突起总数与对照组相比均增高,且差异具有统计学意义,而1,10nmol/L组中细胞变化差异无统计学意义。结论Neuro-2a细胞可用于BoNT/AHC体外研究的细胞模型,BoNT/AHC的作用表现为低浓
- 王红高美玲兰婧乔欢李夏青
- 关键词:肉毒毒素类突触蛋白类神经节苷脂类
- 血清型A肉毒杆菌神经毒素重链对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用被引量:6
- 2015年
- 目的:观察血清型A肉毒杆菌神经毒素重链(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain,Bo NT/A HC)对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用并探讨与其相关的细胞内信号机制。方法:采用体外细胞培养技术,在培养液中加入不同浓度的Bo NT/A HC(0.01 nmol/L、0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L)进行干预,于24 h、48 h和72 h时收集细胞进行免疫荧光染色,再计算细胞突起长度及有突起细胞的百分比;在此基础上,选择最有效的Bo NT/A HC浓度作为处理剂量加入细胞培养液,于Bo NT/A HC作用后不同时点收集全细胞蛋白,采用Western blot检测p-ERK1/2及p-Akt的蛋白水平。结果:当Bo NT/A HC浓度为0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L时,细胞突起的长度及有突起细胞的百分比与对照组相比皆明显增加,差异显著(P<0.05),其中1 nmol/L效果最显著。在细胞培养液内加入1 nmol/L Bo NT/A HC后,p-ERK1/2的蛋白水平呈增加趋势,其中Bo NT/A HC作用60 min后,p-ERK1/2的增加与对照组相比差异显著(P<0.05);与p-ERK1/2变化趋势类似,细胞培养液内加入1 nmol/L的Bo NT/A HC后,p-Akt的蛋白水平也呈增加趋势,其中Bo NT/A HC作用15 min和60 min时,p-Akt增加显著(P<0.05)。结论:一定剂量的Bo NT/A HC可以促进神经细胞突起再生和生长;Bo NT/A HC对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用机制可能通过激活与神经再生相关的信号蛋白ERK1/2和Akt的磷酸化而实现。
- 高美玲王红张彩云兰婧李夏青
- 关键词:细胞外信号调节激酶蛋白激酶B
- 冠心病患者健康教育研究进展被引量:2
- 2014年
- 冠心病是威胁人类健康的主要疾病之一,其发病率在我国呈逐年上升趋势,发病年龄多在40岁以后,男性多于女性,以脑力劳动者多见。2002年WHO报道,每年由冠心病引起的死亡人数近720万,占总死亡人数的15%。冠心病常反复发作,病程长,患者需长时间遵医嘱服药、保持良好的饮食和生活习惯,才能有效防止或减少急性发作,
- 薜薇李红梅李俐亓卉兰婧房佳慧
- 关键词:冠心病患者教育研究脑力劳动者发病年龄
- A型肉毒杆菌神经毒素重链干预大鼠脊髓损伤后蛋白表达的初步研究被引量:1
- 2016年
- 目的:初步观察大鼠脊髓损伤模型基础上局部注射小剂量A型肉毒杆菌神经毒素重链(BoNT/A HC)后对局部蛋白表达谱的影响,为探讨BoNT/A HC干预在体神经损伤后相关蛋白表达及其干预神经再生机制提供实验基础。方法:复制大鼠单侧腰段脊髓损伤模型;采用SDS-PAGE及双向电泳观察不同剂量BoNT/A HC(2μg、4μg、6μg和8μg)对脊髓损伤后局部(包括损伤部位及其近头端部分脊髓组织)蛋白表达谱的干预作用。结果:大鼠单侧腰段脊髓损伤2 d时局部脊髓组织结构明显破坏崩解,损伤波及左侧脊髓灰质及白质;脊髓损伤局部SDS-PAGE及考马斯亮蓝染色显示,于损伤同时局部一次性注射不同剂量BoNT/A HC后,某些蛋白表达与单纯损伤组相比明显不同,而与正常组基本一致;双向电泳结果进一步显示,损伤局部注射6μg BoNT/A HC后2 d和20 d时,在不同等电点及不同蛋白分子量水平上,有10余种蛋白表达与单纯损伤组明显不同,呈向正常转化的趋势。结论:大鼠脊髓损伤局部注射BoNT/A HC一定时间可影响损伤局部蛋白表达谱的变化,这种变化呈现由损伤造成的蛋白表达变化被转向正常的趋势。
- 兰婧王红白娟王亚芳李夏青
- 关键词:脊髓损伤神经损伤神经再生
- A型肉毒素重链对大鼠脊髓损伤后总体蛋白表达、髓鞘相关糖蛋白及其受体表达的影响
- 目的: 1.在大鼠腰段脊髓损伤模型基础上局部给予小剂量A型肉毒杆菌神经毒素重链(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain,BoNT/AHC),观察其对脊髓损伤后局部总体蛋白...
- 兰婧
- 关键词:髓磷脂相关糖蛋白受体表达神经突起
- 神经节苷脂在神经再生中的作用被引量:9
- 2015年
- 20世纪30年代,神经节苷脂被发现于大脑灰质细胞的Ganglionzellen中,并因此而得名。随后的各种实验清晰地阐明了神经节苷脂的分子结构、组织分布以及相关作用等。神经节苷脂为存在于神经细胞及其轴突膜上的主要糖脂成分,根据其分子结构上所结合的涎酸分子数量的不同可以分为单涎酸神经节苷脂(monosialoganglioside1,GM1)和多涎酸神经节苷脂(polysialoganglioside,GP1),譬如:二涎酸神经节苷脂(disialoganglioside,GD1)及三涎酸神经节苷脂(trisialogandioside,GT1)等。
- 王红高美玲兰婧李夏青
- 关键词:神经节苷脂