冯建男 作品数:29 被引量:25 H指数:3 供职机构: 天津大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家杰出青年科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
利用噬菌体库筛选IL-6拮抗剂及功能研究 被引量:2 2003年 目的 以人sIL 6R为靶分子 ,利用噬菌体随机 15肽库筛选其亲和短肽 ,结合计算机模拟分析 ,获得具有抑制IL 6 IL 6R结合作用的短肽序列 ,作为IL 6拮抗剂。方法 通过亲和筛选 ,获得一组sIL 6R特异亲和序列。测定序列 ,结合计算机模拟 ,选取具有潜在拮抗功能的 2条肽 (命名为pT1、pT2 )。合成短肽 ,进行ELISA竞争抑制实验和细胞增殖抑制实验。结果 pT1、pT2均可抑制IL 6 sIL 6R的结合。pT1、pT2可抑制XG 7细胞的增殖 ,并且这种抑制作用随着合成肽浓度的增高而增强 ,pT1、pT2不影响 7TD1细胞的增殖。结论 利用亲和筛选并结合计算机模拟从随机 15肽库中获得可抑制IL 6 sIL 6R结合的短肽 ,并可抑制IL 6依赖细胞XG 7的增殖。 陶永涛 黎燕 沈倍奋 冯建男 胡美茹 施明关键词:白细胞介素-6 拮抗剂 计算机辅助设计可溶性BLyS受体,eBCMA-Fc融合蛋白及其在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量:3 2008年 B细胞成熟抗原(BCMA)是B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体之一.它的胞外区与人IgG1Fc的融合蛋白eBCMA-Fc,又称为诱饵受体,具有拮抗BLyS的活性.为了设计新的拮抗肽,基于BCMA和Fc的晶体结构,通过计算机图形学技术、分子模拟方法,建立了eBCMA-Fc融合蛋白的三维理论结构.利用均方根位移(root mean square distance,RMSD)对eBCMA-Fc融合蛋白与单体eBCMA、Fc构象差异进行分析.融合蛋白eBCMA-Fc中的eBCMA段与单体eBCMA的主链碳原子间RMSD值为0.036nm,Fc段与单体Fc的主链碳原子间RMSD值为0.064nm.结果表明,对比单体,融合蛋白eBCMA-Fc并未因eBCMA与Fc直接连接而发生构象的变化.分子对接方法显示,融合蛋白eBCMA-Fc中的BCMA与BLyS作用,而Fc扮演着稳定BCMA构象的支架作用.为进一步验证上述理论分析,构建eBCMA-Fc融合基因,并将载有eBCMA-Fc融合基因的原核表达质粒转化BL21(DE3)菌、在细菌中表达.目的蛋白经蛋白A亲和柱纯化大约为36kD,与理论预测值34kD相近.免疫印迹表明抗人IgG抗体能够识别eBCMA-Fc融合蛋白.ELISA证实,eBCMA-Fc融合蛋白能够结合BLyS.随着eBCMA-Fc融合蛋白增加,结合BLyS的融合蛋白也相应增加.而对照人IgG,即使在高浓度条件下,也不结合BLyS.此外,eBCMA-Fc融合蛋白能够抑制BLyS对B细胞肿瘤Daudi细胞的作用.这些研究为下一步设计和筛选BLyS拮抗肽提供了实验基础. 孙剑 冯建男 林周 黎燕 沈倍奋关键词:分子对接 自身免疫性疾病 BLyS拮抗肽、含TA-Fc融合蛋白基因的质粒及TA-Fc融合蛋白 本发明公开了BLyS拮抗肽、含TA-Fc融合蛋白基因的质粒及TA-Fc融合蛋白,BLyS拮抗肽,是用SEQ?ID?NO.1所示,所述BLyS拮抗肽命名为TA。BLyS拮抗肽TA能够抑制BLyS与TACI的相互作用。TA-... 孙剑 冯建男 沈倍奋 赵亚璁 白乌仁图雅 冀丽军 郝霞飞文献传递 STAT3反义表达载体的构建、稳定表达及对M1白血病细胞表型的影响 被引量:1 2001年 目的 探讨JAK STATs通路在IL 6信号转导中的功能。方法 将含起始密码子在内的约 1.2kbSTAT3cDNA反向插入到真核细胞表达载体pcDNA3中 ,采用电穿孔法将重组质粒导入到M1小鼠急性髓系白血病细胞中 ,进行G418筛选。结果 G418筛选出抗性克隆后 ,基因组DNAPCR扩增表明STAT3反义基因片段已导入M1细胞中并在基因组中整合。STAT3反义RNA不影响M1细胞的生长动力学特征 ,但可显著拮抗IL 6诱导的STAT3激活 ,并拮抗IL 6对M1细胞的生长抑制效应。结论 STAT 3反义RNA能够在M1细胞中稳定表达 ,成为进一步研究JAK STATs途径功能的新模型。 张纪岩 舒翠玲 王建安 冯建男 裴武红 宋伦 黎燕 沈倍奋关键词:STAT3 白细胞介素6 反义RNA 白血病 细胞表型 人B淋巴细胞刺激因子体外活性分析 2008年 目的:分别采用MTT和ATPLiteTM-M发光法分析人B细胞刺激因子对培养的小鼠脾细胞的生物学活性。方法:分离小鼠脾细胞,培养72h后,MTT和ATP方法测定不同密度脾细胞的增殖,从中选定适当的脾细胞密度分析BLyS活性。然后,检测不同剂量的BLyS对脾细胞的刺激作用。结果:用MTT和ATPLiteTM-M发光法分析发现:BLyS在1、5、10和20mg/L时,都能明显促进小鼠脾细胞的增殖。结论:MTT法检测BLyS对小鼠脾细胞的增殖作用是一种简单、快捷的方法。利用这种细胞模型,可以对BLyS拮抗剂进行初步筛选以期获得具有潜在应用价值的治疗剂。 孙剑 林周 黎燕 冯建男 沈倍奋关键词:B细胞刺激因子 自身免疫性疾病 B细胞 MTT 一种抗肿瘤蛋白质 本发明公开了一种抗肿瘤蛋白质,所述的蛋白质其氨基酸序列见序列表SEQ ID NO6,所述蛋白质的核苷酸序列见序列表SEQ ID NO5。本发明还公开所述蛋白质对肿瘤细胞杀伤的实验。本发所述的蛋白质分子量较小,对肿瘤细胞的... 陈国江 韩根成 王仁喜 肖鹤 侯春梅 黎燕 冯建男 沈倍奋 王一 王柯 刘桂君BLyS拮抗肽、含TA-Fc融合蛋白基因的质粒及TA-Fc融合蛋白 本发明公开了BLyS拮抗肽、含TA-Fc融合蛋白基因的质粒及TA-Fc融合蛋白,BLyS拮抗肽,是用SEQ ID NO.1所示,所述BLyS拮抗肽命名为TA。BLyS拮抗肽TA能够抑制BLyS与TACI的相互作用。TA-... 孙剑 冯建男 沈倍奋 赵亚璁 白乌仁图雅 冀丽军 郝霞飞文献传递 BLyS拮抗肽SS12、含该拮抗肽的融合蛋白SS12-Fc及基因 本发明公开了BLyS拮抗肽SS12、含该拮抗肽的融合蛋白SS12-Fc及基因,实验证明SS12-Fc和3SS12-Fc融合蛋白可以和BLyS结合,并且抑制BLyS与BCMA、BLyS与TACI的相互作用。SS12-Fc和... 孙剑 冯建男 臧孟存 沈倍奋文献传递 锌指蛋白A20突变体转基因小鼠脓毒症肺损伤研究 目的了解锌指蛋白A20突变体(A20△)转基因小鼠脓毒症肺损伤特点,探讨A20△对小鼠脓毒症肺损伤的影响。方法以A20△转基因脓毒症小鼠为动物模型(A20△组),采用流式细胞术测定肺组织单核巨噬细胞侵润,ELISA测定肺... 吴丽娟 冯建男关键词:脓毒症 肺损伤 锌指蛋白 转基因鼠 文献传递 HER2/neu与Herstatin相互作用的活性片段及其编码基因与应用 本发明公开了HER2/neu与Herstatin相互作用的活性片段及其编码基因与应用。HER2/neu与Herstatin相互作用的活性片段,是具有序列表中序列1的氨基酸残基序列的多肽或将序列表中SEQ ID №:1的氨... 胡品良 郭宁 冯建男 王嘉宁 沈倍奋文献传递