刘雪慧
- 作品数:12 被引量:27H指数:4
- 供职机构:山东农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种羔羊痢疾B型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法
- 本发明涉及一种羔羊痢疾B型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法;是将B型产气荚膜梭菌接种在硫乙醇酸盐流体培养基中,在厌氧环境条件下38℃14h培养增菌;将上述培养物加入到由缓冲液溶解的胰蛋白胨、糊精、酵母浸膏、L-精氨酸培养...
- 柴同杰刘雪慧王海荣
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- C、D型产气荚膜梭菌二价类毒素疫苗及抗毒素血清的研制
- 产气荚膜梭菌在自然界是无处不在的,是多种健康动物肠道的常在菌,能造成人及多种动物发病,且有发病急、病程短、死亡快的特点,每年大量动物因感染产气荚膜梭菌而死亡,给养殖业造成巨大损失。C、D型产气荚膜梭菌能单独或混合感染牛羊...
- 刘雪慧
- 关键词:产气荚膜梭菌
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- 青岛地区规模化兔场产气荚膜梭菌流行株毒素型、遗传多样性和耐药性研究被引量:7
- 2014年
- 为了解青岛地区产气荚膜梭菌流行株近几年出现的毒素型、遗传多样性和耐药性变化,本研究选取2006年和2012年从青岛规模化兔场分离的产气荚膜梭菌菌株各15株,分别采用多重PCR、ERIC-PCR和药敏纸片法对分离菌株的毒素型、遗传多样性和耐药性进行检测。结果表明:2006年分离的产气荚膜梭菌流行株均为A型,β2毒素阳性菌为2株(13.33%),而未检测到肠毒素和NetB毒素;2012年分离的15株产气荚膜梭菌流行株中A型14株、C型1株,β2毒素阳性菌为6株(40%),同样未检测到肠毒素和NetB毒素。将30株产气荚膜梭菌流行株通过ERIC-PCR方法分为14个亚型,其中2006年分离株分布于8个亚型,V型为主要流行型;2012年分离株也分布于其中8个亚型,主要流行型为Ⅲ型和Ⅺ型。产气荚膜梭菌2012年流行株比2006年流行株对先锋霉素、强力霉素、万古霉素、青霉素的耐药率大幅度提高。本研究结果显示:自2006年以来,青岛规模化兔场产气荚膜梭菌流行株在毒素基因、遗传多样性和耐药性上均发生了较大变化,这一结果为今后该地区兔场产气荚膜梭菌病的防控提供了依据。
- 吕长辉王方山孙佳芝郝海玉刘雪慧李超王海荣
- 关键词:产气荚膜梭菌耐药性
- 一种羔羊痢疾B型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法
- 本发明涉及一种羔羊痢疾B型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备方法;是将B型产气荚膜梭菌接种在硫乙醇酸盐流体培养基中,在厌氧环境条件下38℃14h培养增菌;将上述培养物加入到由缓冲液溶解的胰蛋白胨、糊精、酵母浸膏、L-精氨酸培养...
- 柴同杰刘雪慧王海荣
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- 产气荚膜梭菌α毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用被引量:11
- 2014年
- 为了对产气荚膜梭菌α毒素进行快速、有效的检测,本研究以单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)为基础,建立了双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)方法。纯化原核表达的α毒素蛋白为免疫原,制备腹水型mAb并分离纯化作为检测抗体,免疫新西兰大白兔制备抗α毒素多克隆抗体纯化后作为捕获抗体,通过试验优化反应条件,建立标准曲线;并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。DAS-ELISA方法对α毒素的有效检测范围为5.86~375μg/L,最低检测线为4.57μg/L,比多抗-多抗双夹心ELISA具有更高的特异性和敏感性。初步应用结果显示,相同培养条件下,A^E型产气荚膜梭菌标准菌株的培养上清中,α毒素含量差异较大,A型菌(NCTC528)中α毒素含量显著高于其他菌型。本研究成功制备了高特异性的mAb,并建立了特异、灵敏、稳定的DAS-ELISA方法,为高效检测α毒素提供了有效工具。
- 孙佳芝王新桐刘雪慧苗增民刘志浩王海荣柴同杰
- 关键词:产气荚膜梭菌Α毒素多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- C、D型产气荚膜梭菌抗毒素血清及其制备方法
- 本发明涉及一种C、D型产气荚膜梭菌抗毒素血清及其制备方法;是将C型产气荚膜梭菌菌种和D型产气荚膜梭菌菌种分别接种于血平板培养基上复苏,再使用营养肉汤增菌厌氧培养,分别得到C型产气荚膜梭菌菌液和D型产气荚膜梭菌菌液,再利用...
- 柴同杰刘雪慧王海荣
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- C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备及抗体效价研究被引量:4
- 2015年
- 为制备具有高效保护力的C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗,利用C型产气荚膜梭菌标准菌株(NCTC 3180)所产外毒素经甲醛灭活并加入佐剂乳化后制备该疫苗。参照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》分别对疫苗进行了安全性检验、无菌检验和免疫效力检验。分别在分娩前30天和15天免疫接种怀孕母猪,通过间接ELISA和毒素中和试验评估母猪初乳和14日龄仔猪血液中抗体效价水平。结果显示,母猪初乳和仔猪血清中抗毒素效价分别为1∶3200和1∶1600,母猪初乳和仔猪血清中的中和效价均为1∶6。表明制备的类毒素疫苗效价高并安全可靠,免疫实验动物后能对母体和其所产幼畜起到一定的保护作用。
- 樊金刘雪慧郭梦娇刘萌萌柴同杰
- 关键词:怀孕母猪仔猪抗体效价
- 产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体的研制被引量:2
- 2015年
- 为了得到产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体,以重组产气荚膜梭菌β毒素为抗原免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并筛选出阳性单克隆杂交瘤细胞株,接种至小鼠腹腔,培养后抽取腹水并用正辛酸-硫酸铵纯化法进行纯化,从而获得抗产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体。该单克隆抗体经特异性试验,能与天然β毒素及重组β毒素发生特异性反应,且效价较高,为进一步建立快速有效的临床检测技术奠定了基础。
- 刘萌萌樊金刘雪慧秦贵平张慧蓉柴同杰
- 关键词:产气荚膜梭菌Β毒素单克隆抗体
- 不同佐剂D型产气荚膜梭菌类毒素疫苗保护效果的评价
- 引言D型产气荚膜梭菌致病主要由其产生的ε毒素引起的[1],能造成羔羊、绵羊、山羊、牛以及灰鼠等动物的肠毒血症,近年来黑龙江、青海、云南、宁夏等地均有D型菌导致牛、羊等动物肠毒血症的报道[2],该病发病一般比较急、死亡率高...
- 刘雪慧王海荣
- C、D型产气荚膜梭菌抗毒素血清及其制备方法
- 本发明涉及一种C、D型产气荚膜梭菌抗毒素血清及其制备方法;是将C型产气荚膜梭菌菌种和D型产气荚膜梭菌菌种分别接种于血平板培养基上复苏,再使用营养肉汤增菌厌氧培养,分别得到C型产气荚膜梭菌菌液和D型产气荚膜梭菌菌液,再利用...
- 柴同杰刘雪慧王海荣
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