吴胜昔
- 作品数：98 被引量：119H指数：5
- 供职机构：重庆理工大学更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生电子电信生物学更多>>
- 抗HPV16E6全蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2017年
- 为了制备特异性识别HPV16E6蛋白的单克隆抗体,为建立HPV早期诊断试剂盒提供有效试剂,通过细胞融合、间接ELISA方法筛选阳性克隆、多次亚克隆得到稳定分泌抗体的单克隆杂交瘤细胞株,体内诱生法大量制备腹水,过UNOsphere SuPrA^(TM)柱和ENrich^(TM)SEC650分子筛柱纯化,通过蛋白电泳鉴定其纯度并测定抗体浓度,并采用Western Blot法和间接免疫荧光法验证纯化后HPV16E6抗体与HPV16型阳性Caski细胞和HPV18型阳性Hela细胞特异性结合。建立了亚型为IgG2a的单克隆HPV16E6-4D4杂交瘤细胞株,两步纯化后得到纯度较高的抗体,可特异性识别HPV16型阳性的Caski细胞中的E6蛋白,不与Hela细胞反应,为在蛋白水平上检测HPV16型病毒提供了新手段。
- 顾盼胡仁建王玲玲周康森吴胜昔蔡家利
- 关键词：单克隆抗体蛋白免疫印迹间接免疫荧光法
- 禽流感病毒的变异与效应被引量：1
- 2005年
- 流感病毒抗原变异与流感的流行大小、预防、控制密切相关。近年来分子生物学技术的发展,越来越多的新方法、新技术用于流感病毒抗原变异的研究,本文对近年来流感病毒抗原变异的原因及其引起的效应作一扼要综述。
- 胡勇林治华吴胜昔
- 关键词：禽流感病毒
- 基于双通道探针式81°倾斜光纤光栅的甲胎蛋白免疫检测被引量：2
- 2021年
- 提出了一种双通道探针式81°倾斜光纤光栅(81°TFG)传感器,并将其用于甲胎蛋白(AFP)的免疫检测研究。首先,在81°TFG端面镀银膜形成反射式81°TFG,构建由2×2耦合器和两支81°TFG探针组成的双通道传感器。然后,在栅区表面修饰大尺寸AuNs粒子和GO,并以AFP单克隆抗体为特异性识别单元修饰栅区表面,实现基于双通道探针式81°TFG局域表面等离子体共振(LSPR)的AFP免疫传感器。最后,在复杂血清环境下完成免疫检测实验,结果表明,该传感器对AFP抗原质量浓度的检测极限在1~10 pg/mL之间,检测的饱和点约为200 ng/mL,灵敏度约为0.155 nm/log(pg/mL),对肝癌患者的血清具有良好的特异性响应。相比单通道透射式81°TFG传感器,该传感器能实现对目标分子阳性和阴性样本的同时对照检测,从而增强临床检测应用中的可靠性,且操作更简便、应用潜力更大。
- 吕清明罗彬彬杨琪张杨吴胜昔谷志鹏石胜辉吴德操巫涛江赵明富
- 关键词：光纤光学免疫传感器甲胎蛋白
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及单克隆抗体制备被引量：1
- 2013年
- 目的获得原核表达的PRRSV N蛋白,并制备N蛋白的单克隆抗体。方法将已构建的含有PRRSV N蛋白基因的重组表达载体阳性菌,在37℃条件下,用终浓度1 mmol/L的IPTG诱导表达4 h。经SDS-PAGE分析,表明N基因在大肠杆菌中得到了高效表达。经镍柱亲和层析纯化,以此蛋白作为抗原采用长程免疫法免疫Balb/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合。结果获得了纯度较高、免疫学活性较好的N蛋白,细胞融合率为81.3%。建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体。初检阳性率为17.3%,经2次亚克隆反复筛选获得了2株分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株,命名为4G10和2F9。ELISA证实所获得的单抗是特异性针对PRRSV共同的抗原表位,4G10和2F9经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体。结论成功制备出高效价的抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体,为建立一种快速、特异的PRRSV检测方法奠定了基础。
- 吴胜昔邵烈刚曾政陈晶刘人菊袁丽萍熊仲良蔡家利
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白单克隆抗体
- 学生参与微生物学实验准备的探索被引量：1
- 2012年
- 微生物学实验是生命科学的一门基础实验课程,单靠课堂实验无法达到教学目的的要求,本文从学生参与教师科研及实验课程的准备等方面进行了探讨。
- 胡勇鲁秀敏吴胜昔
- 关键词：微生物学实验教学质量
- 基于氧化石墨烯微纳光纤的狂犬病毒免疫传感器被引量：1
- 2023年
- 提出一种基于氧化石墨烯(GO)微纳光纤的生物传感器,将其用于狂犬病毒(RV)的免疫检测研究。首先,将标准单模光纤通过熔接机放电形成双锥形光纤,再对双锥形光纤进行熔融拉锥制作出高灵敏度的微纳光纤。然后,在微纳光纤表面修饰GO,并将RV抗原固定于该传感器表面,用于对RV抗体的特异性检测实验。实验结果表明:该生物传感器对RV抗体的检测范围为200 fg/mL~1 ng/mL,检测极限(LOD)约为225.56 fg/mL,其检测灵敏度约为1.099 nm/log(mg·mL^(−1)),解离系数约为2.92×10^(−11)M;当用于不同的抗体溶液样本和RV阳性血清的对照检测及临床检测时,该免疫传感器对前者的响应非常微弱,而对后者有明显的响应,说明其对RV抗体具有良好的特异性。基于GO修饰微纳光纤的免疫传感器具有制作简单、微纳尺寸、灵敏度高、成本低等优点。
- 杨琪罗彬彬谷志鹏吴胜昔石胜辉赵明富
- 关键词：光纤光学氧化石墨烯狂犬病毒生物传感器
- 一种新城疫病毒免疫胶体金测试卡
- 本实用新型提供一种新城疫免疫胶体金测试卡，由试剂条和测试卡盒构成；其中，试剂条由背衬、样品垫、结合垫、NC膜和吸水垫组成，背衬上中部设有NC膜，NC膜的两端分别相邻连接结合垫和吸水垫；样品垫设于结合垫的上方；结合垫上喷有...
- 吴胜昔蔡家利胡仁建
- 文献传递
- 一种秸秆微贮添加剂及其制备方法
- 本发明提供一种秸秆微贮添加剂，其特征在于，采用乳酸菌、啤酒酵母、枯草芽孢杆菌、放线菌、固氮菌、霉菌菌种按75300～10000∶73000～10000∶600～500∶70～50∶15～10∶1的配比发酵制得。其制备方法...
- 蔡家利涂光伟温海霞黎晓敏胡仁建丁森吴胜昔姚安
- 检测犬瘟热病毒的方法及其检测传感器和制备方法
- 本发明公开了检测犬瘟热病毒的方法及其检测传感器和制备方法，检测传感器由布拉格光纤光栅纤芯表面依次进行羟基化、硅烷化修饰、涂覆金纳米壳、羧基化、活化羧基化后的羧基基团、修饰单克隆抗体和封闭得到；利用该传感器搭建生物传感器检...
- 吴胜昔曾政罗彬彬骆璐董春霞凌洪权冉皑张扬孙燕陈忠琼蒋佳丽郭宇
- 氧化石墨烯集成极大倾角光纤光栅LSPR的癌症标记物传感器
- 2021年
- 提出了一种基于氧化石墨烯(GO)集成极大倾角光纤光栅(ExTFG)的局域表面等离子体共振(Local Surface Plasmon Resonance,LSPR)免疫传感器,用于对癌症标志物——细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)的无标记和特异性检测。利用大尺寸(粒径约为165 nm)金纳米壳(AuNs)作为LSPR载体固定在光纤表面,然后再将GO涂敷于光纤表面来改善ExTFG-LSPR传感器的疏水特性,以增强传感器对生物分子蛋白的吸附能力,最后将PD-L1单克隆抗体(anti-PD-L1MAbs)通过共价键结合在光纤表面GO的羧基端用于PD-L1的特异性检测。实验结果表明:该免疫传感器对磷酸盐缓冲液中PD-L1抗原的检测范围为0.038~38.46 pmol/L,在0~2 pmol/L的低浓度区保持着良好的线性度,灵敏度约达0.114 nm/(pmol·L^(-1)),对PD-L1抗原的检测极限低至约0.076 pmol/L,解离系数约为2.801×10^(-12)mol/L;当用于不同的健康血清样本和肝细胞癌(HCC)血清样本的临床免疫检测,对前者的响应极其微弱,而对后者具有明显的响应。因此,该免疫传感器在复杂血清环境下对PD-L1标记物具有良好的临床特异性,具有较大的应用潜力。
- 罗彬彬古洪吕清明王亚杰吴胜昔
- 关键词：光纤传感氧化石墨烯
