孙云波
- 作品数：12 被引量：33H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 6-酮雌二醇的合成方法改进
- 2017年
- 目的改进雌激素药物中间体6-酮雌二醇的合成方法。方法以雌酚酮为起始原料经NaBH_4还原、乙酰基保护、Na_2CrO_4氧化、KOH-MeOH溶液水解得到6-酮雌二醇。结果经过4步反应总产率40.9%,目标产物结构经~1HNMR、^(13)C-NMR和MS确证。结论该合成方法原料易得、条件温和、操作简便,适用于试验性的小规模制备。
- 高辉张首国彭涛王彦志王刚温晓雪孙云波刘曙晨冯卫生王林
- 关键词：药物中间体雌激素
- 联合UV及SDS-PAGE监测并优化碳二亚胺偶联法制备多肽免疫原被引量：3
- 2013年
- 建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对加样顺序、投料比、偶联时间等关键条件进行考察,采用UV和SDS-PAGE对反应产物进行联合监测,以偶联比和偶联率联合评价反应条件。加样顺序为多肽和载体蛋白先混合再加到碳二亚胺中,三者质量比为1∶1∶1,偶联时间为12 h,偶联比在4∶1～12∶1之间,偶联率在9%～20%之间,所得SP0104多抗效价达到1∶80 000,MALDI-TOF质谱分析证实该抗体准确捕获目标抗原。用优化的偶联方法制备多肽SPC09、SPC15、SPG01、SPG03、SPG04的免疫抗原,所得免疫血清效价均在1∶1万以上,最高可达1∶51.2万。所建碳二亚胺多肽偶联联合监测法简便实用,可提高多肽抗体制备的成功率。
- 侯利平傅海媛陶亚岚黄亚娟孙云波宋纯艳夏云飞杨保安韩治国肖汉族郑俊杰甄蓓魏开华
- 关键词：抗体
- 血清多肽SPG01、SPG03、SPG04检测鼻咽癌放疗敏感性的初步研究
- 2014年
- 应用血清多肽SPG01、SPG03、SPG04的多抗（PcAb）酶联免疫吸附方法（ELISA）,用于鼻咽癌放疗敏感性的检测。以碳二亚胺偶联法制备多肽免疫抗原,免疫动物制备兔血清多抗,用Protein A亲和层析法纯化多抗,选择3种多抗的工作滴度,应用多抗ELISA法检测63份鼻咽癌血清样本。紫外（UV）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）联合监测表明多肽偶联到BSA（牛血清白蛋白）上;动物免疫获得3种兔血清多克隆抗体各40 mL;纯化后的多抗纯度在90%以上,效价均在1∶100 000以上;3种多抗的检测滴度分别为1∶20 000,1∶100 000,1∶10 000;间接ELISA最低检测限为0.03μg/mL,相对标准偏差（RSD）为5.6%。t检验分析3种多肽区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,均呈显著差异（P〈0.000 1）。ROC曲线表明,3种多肽检测鼻咽癌放疗敏感性的特异性在90%以上,灵敏度为73%~93%。3种多肽标志物均能显著区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,所应用的多抗ELISA方法检测鼻咽癌放疗敏感性特异性好,灵敏度高,可用于鼻咽癌个体化治疗的放疗敏感性辅助诊断。
- 侯利平宋纯艳孙云波陶亚岚傅海媛杨保安郑俊杰夏云飞甄蓓魏开华
- 关键词：鼻咽癌多抗放疗敏感性
- 新型肝损伤血清标志物Pep5定量检测方法的建立及临床应用被引量：1
- 2013年
- 目的建立定量检测血清多肽Pep5的酶联免疫吸附方法(ELISA),用于判定肝损伤进程的研究。方法以待测血清样本稀释液包被酶联板,5%脱脂奶粉封闭,辣根过氧化物酶标记的抗Pep5单克隆抗体作为标记抗体,建立定量检测人血清多肽Pep5的ELISA,并用于临床检测690例肝损伤及健康血清样本。结果灵敏度为1.25ng/mL;线性范围(0～24ng/mL)内相关系数为0.998 7;与乙酰胆碱酯酶、层黏连蛋白、透明质酸、三型前胶原交叉反应率小于1.00%;添加回收率在99.09%～107.08%;批内、批间变异系数(CV)分别为5.62%～7.32%、6.21%～6.45%。与其他肝损伤指标乙酰胆碱酯酶试剂盒进行对比试验,表明两种检测方法有一定的相关性(r=0.68)。临床检测结果表明血清多肽Pep5水平随着肝损伤程度加重而升高,与正常血清差异有统计学意义(P<0.01)。结论多肽Pep5可用于肝损伤进程定量血清学检测,检测方法简便、可靠,为后续深入研究多肽Pep5的功能及相关诊断试剂盒的研制和开发提供了科学依据。
- 傅海媛侯利平周晓明黄亚娟宋纯艳孙云波汪洋杨保安肖汉族甄蓓魏开华王海滨
- 关键词：酶联免疫吸附法肝损伤血清学诊断
- 多肽抗体免疫富集-质谱法检测肝癌患者血清多肽标志物被引量：12
- 2011年
- 血清多肽是癌症诊断信息的重要来源。近年来针对其复杂多样、丰度低、易降解的特点,多种多肽组技术得到快速发展。建立并优化了检测多肽标志物的免疫质谱方法,用于检测血清中的肿瘤多肽标志物。方法的线性范围为1～40pmol;检出限为0.5pmol;对5pmol合成肽5标准品平行检测3次的相对标准偏差(RSD)为9.5%。采用本方法检测出浓度为35.2nmol/L的血清多肽标志物。本方法适用于临床样本中低浓度标志物的检测研究,对于癌症的早期诊断具有重要意义。
- 原剑孙云波周晓明杨帆杨保安郑俊杰甄蓓貌盼勇李楠白洁林利忠徐淑芳肖汉族魏开华
- 关键词：多肽抗体质谱肿瘤
- 香豆素苄(亚)砜类化合物的合成及其抗辐射活性评价被引量：4
- 2017年
- 目的设计合成具有抗辐射活性的香豆素苄(亚)砜类衍生物。方法以Ex-Rad为先导化合物,设计香豆素苄(亚)砜类化合物16个;以2-巯基乙酸甲酯和4-溴甲基苯甲酸为起始原料,经3步反应合成目标化合物。通过抗辐射细胞实验测定目标化合物的抗辐射活性。结果合成16个未见文献报道的目标化合物,结构经~1H NMR和HRMS确证。初步药理结果显示,化合物6a、6b、6c和6d具有明显的抗辐射活性。结论目标化合物6a、6b、6c和6d具有显著的抗辐射活性,值得进一步研究。
- 周玉美唐林张首国彭涛王刚温晓雪刘曙晨孙云波王林
- 关键词：香豆素
- 多肽抗体检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用被引量：4
- 2012年
- 血清多肽是癌症诊断信息的重要来源,建立、优化了检测多肽标志物的直接ELISA法,并应用于肝癌血清中的多肽标志物的检测。制备及纯化针对多肽标志物Pep5的单克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,用其建立检测相应抗原的直接ELISA法。方法线性范围为1.5-20 ng/mL,检测限为1.24 ng/mL;标准品批内及批间CV分别小于3.66%及4.89%,血清样本批内及批间CV分别小于11.69%及18.18%;线性范围内(9、12和15 ng/mL)的回收率分别为98.98%,99.61%和101.58%。应用该方法共检测160例正常血清、104例肝硬化及156例肝癌患者血清,正常组与肝硬化组及肝癌组间差异显著(P<0.001),Pep5诊断肝癌的敏感性和特异性分别为80.8%和96.2%。同时检测94例HCC血清中的AFP和Pep5,AFP检出率为63.8%,Pep5检出率为90.4%,AFP联合Pep5检测时,能将HCC的检出率提高至94.7%。
- 周晓明傅海媛黄亚娟侯利平孙云波原剑杨保安郑俊杰甄蓓肖汉族貌盼勇魏开华
- 关键词：多肽抗体ELISA肝癌
- 新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂的设计、合成及活性研究被引量：3
- 2017年
- 目的设计合成新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂。方法以c-Met激酶抑制剂SU11274为先导化合物,利用生物电子等排原理设计出系列2-吲哚酮类衍生物。以2-吲哚酮为起始原料,先后经历与氯磺酸的氯磺酰化、与3的磺酰胺化、与6a^6h,7a^7h和4a^4b的缩合反应制得目标产物10a^10r,并测定它们对c-Met激酶和MCF-7细胞增殖的抑制活性。结果与结论成功合成了设计的18个2-吲哚酮类化合物,产物结构经1H NMR和ESI-MS确证。部分化合物显示出一定的c-Met激酶和MCF-7细胞增殖抑制活性。对目标产物进行了初步构效关系分析,为该类化合物进一步的结构优化奠定了基础。
- 张首国王洁颖颜海燕彭涛温晓雪王刚孙云波刘曙晨王林
- 关键词：抗肿瘤
- 新型酪氨酸激酶抑制剂的合成及其活性评价
- 2017年
- 目的以L029为先导化合物,设计合成具有蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制活性的化合物。方法以L029为原料,通过还原和(或)在其活泼H等位点接入侧链3-二甲基氨基-1-丙烷、乙酸甲酯、丙酸甲酯等基团,设计合成了一系列L029衍生物,并用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其PTK活性,计算抑制率。结果成功合成5个目标化合物,结构经1H NMR和MS确证。其中3个化合物T2、T3、T5具有较强的PTK抑制活性。结论本文研究的目标化合物合成路线方法简单,反应条件温和,3个目标化合物具有较强PTK抑制活性,为进一步开展此类分子的设计合成提供了参考。
- 杨宏鹏王刚彭涛温晓雪杨建云孙云波刘曙晨张首国王林
- 关键词：蛋白酪氨酸激酶抑制剂
- 酶切质谱法和氰基化裂解法联合解析新药重组人门冬胰岛素二硫键被引量：3
- 2013年
- 目的:建立一种简化、快速、准确的分析含有相邻Cys的双链型二硫键的方法,并确定重组人门冬胰岛素的二硫键。方法:(1)ESI-Q-TOF质谱准确测定样品还原烷基化及烷基化前后的相对分子质量,计算二硫键数和自由巯基数;(2)采集Glu-C酶切肽质量指纹谱,MS-Bridge检索并确定1对链间二硫键;(3)简化氰基化裂解法步骤,LC-MS/MS测定关键肽段序列,自编软件结合人工解析,确定第2、3对二硫键。结果:(1)相对分子质量测定出重组人门冬胰岛素含3对二硫键;(2)酶切肽谱的序列覆盖率为100%,关键肽段m/z 1377.5568、m/z 2493.1045,测量偏差小于0.05,对应二硫键A20-B19。(3)Glu-C酶切液经氰基衍生后以ZipTip除盐代替HPLC制备,氨水裂解后用MALDI-TOF测肽谱,获得关键肽段m/z1530.7163,对应二硫键A6-A11,其串联质谱共匹配14个关键序列离子,碎片离子强度高,质量偏差小于0.01,证实该二硫键连接正确。结论:新药重组人门冬胰岛素主要的二硫键连接方式为A6-A11、A7-B7、A20-B19,与已知胰岛素一致。本方法降低了双链连接型胰岛素二硫键分析复杂度,简化了步骤,具有良好的实用性。
- 黄亚娟傅海媛侯利平孙云波张拓王东茂郑俊杰魏开华
- 关键词：肽质量指纹图谱质谱分析
