张大勇
- 作品数:27 被引量:69H指数:4
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- Wnt/β-catenin信号通路对骨髓源性心肌干细胞衰老的调控作用
- 张大勇谭玉珍王海杰
- Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞衰老的影响及其作用机制被引量:10
- 2011年
- 目的:研究不同年龄血清对Wnt/β-catenin信号通路激活水平的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路对间充质干细胞(MSCs)衰老、增殖、存活能力的作用及其机制。方法:提取年轻(8~12周)及老年(64~72周)SD大鼠血清,实验分为4组,分别为年轻血清(Young rat serum,YRS)组,YRS+Wnt 3a组、老年血清(Old rat serum,ORS)组和ORS+DKK1组。免疫细胞化学染色和Western blotting检测胞浆、胞核β-catenin的表达。SA-β-半乳糖苷酶染色检测各组细胞衰老,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法检测MSCs存活和凋亡。为研究Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的作用机制,免疫细胞化学染色和Western blotting检测γ-H2A.X和p53蛋白表达,RT-PCR法检测p53、p21 mRNA表达。结果:ORS组β-catenin表达较YRS组明显增强,尤其是胞核,出现β-catenin聚集现象,而ORS+DKK1组β-catenin表达减弱。与YRS组相比,YRS+Wnt 3a组细胞SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著增多(P<0.01),细胞增殖和存活能力减弱。而ORS+DKK1组与ORS组相比,SA-β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数显著减少(P<0.01),细胞增殖和存活能力增强。免疫细胞化学染色、Western blotting和RT-PCR检测结果显示,ORS组内γ-H2A.X、p53、p21表达较YRS组明显增强,而在ORS内加入DKK1后,γ-H2A.X、p53、p21表达较ORS组明显减弱。结论:ORS培养可以激活MSCs内Wnt/β-catenin信号通路。Wnt/β-catenin信号通路对MSCs衰老发挥重要调控作用。DNA损伤反应和p53/p21途径是Wnt/β-catenin信号通路导致MSCs衰老的重要介导因素。
- 项晓霞陈律王骏浩张余斌张大勇
- 关键词:信号传导WNT/Β-CATENIN信号通路骨髓间充质干细胞衰老
- 人参皂甙Rbl对血管性痴呆大鼠认知功能及突触素表达的影响被引量:4
- 2011年
- 目的:研究人参皂甙Rbl(GSRbl)对血管性痴呆大鼠认知功能与海马突触素表达的影响。方法:将36只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。以双侧颈总动脉结扎法制作血管性痴呆大鼠模型。造模后治疗组大鼠腹腔注射GSRbl(30mg·kg^-1·d^-1)。Y型迷宫和免疫组织化学法结合图像分析检测各组大鼠认知功能和海马突触素免疫阳性产物的平均光密度。结果:与对照组大鼠相比,模型组大鼠Y型迷宫中错误次数增加,模型组大鼠学习记忆能力减退,其海马区突触素免疫反应阳性产物平均光密度降低;与模型组相比,治疗组大鼠出错次数减少,而海马区突触素免疫阳性产物平均光密度升高。结论:人参皂甙Rbl可增加血管痴呆性大鼠海马区突触素表达,显著改善其认知功能。
- 董静尹袁张根宋水川张大勇王俊波李达丁立峰
- 关键词:人参皂甙RB1血管性痴呆突触素
- 基于积木原理的药理学实验教学方法探讨被引量:1
- 2016年
- 传统的药理学实验课在训练学生基本药理学实验技能之外,往往忽视学生的自主学习和自主探索的能力培养。我们利用"积木原理"构建了一种循序渐进的药理学实验的学习方式,学生在药理学实验课中能充分发挥自己的主观能动性,大大激活了学生对药理学的学习兴趣,使原本枯燥乏味的药理学实验教学过程变得生动、活泼,从而达到提高教学质量的目的。
- 张翀李杨玲曾玲晖潘建平张大勇
- 关键词:药理学实验
- 不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞生物学特性的比较
- 2009年
- 目的研究不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞(MCSCs)形态和衰老相关指标的差异,探讨年龄因素对MCSCs增殖、存活和向心肌细胞分化的影响。方法利用单细胞克隆培养技术从幼年、成年和老年雄性SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,透射电镜下观察细胞超微结构改变。SA-β-半乳糖苷酶染色和活性氧(ROS)染色检测细胞衰老变化,流式细胞术分析细胞周期分布。Annexin V/PI双标流式细胞术和Hochest33342染色检测细胞存活和凋亡。用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导不同年龄组MCSCs向心肌细胞分化,通过RT-PCR检测诱导后心肌早期转录因子和心肌特异基因的表达,并通过免疫细胞化学染色检测各年龄组细胞经(BMP-2)诱导后细胞内心肌特异性肌钙蛋T(cTnT)表达的变化。结果老年组MCSCs核质比减小,胞质内可见髓样小体。随着年龄增长,处于增殖期的MCSCs比例下降,β-半乳糖苷酶和ROS阳性细胞数目增多。老年组存活细胞比例较幼年组降低。用BMP-2诱导后4周,幼年组细胞的Nkx2.5、GATA-4和cTnT、Cx-43 mRNA表达明显,成年组和老年组细胞表达低于幼年组,差异有显著性意义。免疫细胞化学染色显示,BM...
- 王存谭玉珍王海杰国海东张大勇崔晓军
- 关键词:骨髓源性心肌干细胞骨形态发生蛋白-2细胞分化Β-半乳糖苷酶流式细胞术
- 白藜芦醇通过保护线粒体功能延缓骨髓间充质干细胞衰老被引量:7
- 2019年
- 目的:探讨白藜芦醇对骨髓间充质干细胞(MSC)衰老的影响及其机制。方法:分离SD乳鼠(7日龄)MSC,传代培养至第3代后检测0、1、10、50 g/L D-半乳糖对MSC衰老的影响,确定D-半乳糖诱导MSC衰老的最佳浓度。再将细胞随机分为10、50、100μmol/L白藜芦醇组及对照组。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察各组细胞衰老变化;DCFH-DA染色检测总活性氧水平;MitoSOX Red染色检测线粒体活性氧水平;线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1法)检测线粒体膜电位变化;纯化线粒体膜通道孔(mPTP)比色法检测线粒体膜通道开放水平;蛋白质印迹法检测衰老相关蛋白p53、p16、γ-H2AX表达和细胞质内线粒体细胞色素C外泄水平。结果:10、50 g/L D-半乳糖可明显增加SA-β-gal染色阳性MSC数量和线粒体活性氧水平(均P<0.01)。与对照组比较,白藜芦醇组SA-β-gal染色阳性细胞数减少(均P<0.01),p53、p16和γ-H2AX表达减少,细胞内总活性氧和线粒体活性氧水平下降(均P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.05或P<0.01),膜通道开放水平降低(P<0.05或P<0.01),细胞质内细胞色素C外泄减少。结论:白藜芦醇可保护MSC线粒体功能,延缓MSC衰老。
- 张大勇林九洲王雅艳许珊罗成专蔡佳烨蒋学范潘建平
- 关键词:白藜芦醇骨髓细胞间质干细胞线粒体衰老
- 高校急救选修课开展的现况、问题和对策研究被引量:3
- 2019年
- 利用选修课在高校开展大学生急救知识培训对提高急救知识普及率有非常重要的意义,但目前很多高校的急救选修课仍存在重视程度不够、重理论轻实践、形式单一等问题,直接影响大学生急救培训的效果。本文对高校急救选修课开展的现况、问题和对策进行了深入探讨和研究,以期提高大学生急救培训的效果,提高急救知识普及率。
- 郭君平蒋瑶高瑛龚子福张大勇
- 关键词:大学生选修课急救培训
- “自主、协作、探究”的学习模式在局部解剖学实验教学中的应用被引量:4
- 2018年
- 局部解剖学是一门与临床关系密切的形态学科,是联系基础医学和临床医学的重要桥梁课程。我们的局部解剖课程采用"自主、协作、探究"的教学模式,课前布置问题促使学生自主学习,小组成员共同协作、探究解决问题的方法来完成实验操作。这种学习模式增强了学生学习的主动性、团队合作精神以及解决问题的能力。
- 王俊波袁张根张大勇董静尹
- 关键词:局部解剖学实验教学教学改革
- 丹酚酸B对人鼻咽癌细胞株CNE-2增殖、凋亡的影响及机制研究被引量:2
- 2021年
- 目的研究丹酚酸B对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测丹酚酸B对人鼻咽癌CNE-2细胞的半数抑制浓度(IC50);用IC50浓度的丹酚酸B处理人鼻咽癌CNE-2细胞后,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况;在荧光显微镜下应用Hoechst33258荧光染色法观察细胞的凋亡情况;应用流式细胞仪分析细胞凋亡率情况;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的表达水平。结果不同浓度的丹酚酸B对人鼻咽癌CNE-2细胞均有抑制作用,并呈浓度依赖性,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),IC50为(56.26±2.13)μg/ml,48 h最显著;Hoechst33258荧光染色发现典型的凋亡细胞核形态学变化;流式细胞仪检测显示实验组细胞的凋亡率高于对照组(P<0.01);与对照组相比,实验组Bax、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表达显著增加,而Bcl-2的蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论丹酚酸B能明显抑制人鼻咽癌CNE-2细胞增殖,促其凋亡,其机制可能与其阻滞细胞周期的转化并使凋亡相关蛋白表达的改变有关。
- 蒋学范张大勇胡未鸣浦立苏立众
- 关键词:鼻咽肿瘤细胞增殖丹酚酸B
- “记忆”、“理解”、“应用”和“渴望”学习法在人体解剖学课堂教学中的应用被引量:2
- 2013年
- 人体解剖学是一门重要的基础医学课程,如何教好、学好人体解剖学一直是人体解剖学教师和医学生关注的热点。人体解剖学的特点是内容多、名词多、记忆多,在学习解剖学知识时,学生越来越多地反映内容抽象、枯燥,结构名称错综复杂,难学且记忆比较困难。如何使学生在有限的课堂时间内更好地理解、吸收并记忆重点内容,是解剖学教师共同探讨的问题。我们以“记忆”、“理解”、“应用”和“渴望”学习法为基点,结合心理学记忆特点,探讨人体解剖学课堂教学中的运用策略,以期提高教学质量和学生的学习兴趣。
- 王俊波袁张根张大勇董静尹潘建平凌树才
- 关键词:人体解剖学课堂教学记忆基础医学课程