张明哲
- 作品数:5 被引量:24H指数:3
- 供职机构:吉林农业大学更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金吉林省中医药管理局资助课题博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 人参SQS基因的干扰载体构建及转化人参愈伤组织被引量:6
- 2011年
- 以5年生人参为材料,根据人参SQS基因设计正义及反义片段引物,构建了SQS基因干扰表达载体;利用农杆菌转化法转化人参愈伤组织,对获得的抗性愈伤组织进行PCR检测及实时定量PCR检测,并对抗性愈伤组织的皂苷进行HPLC分析.实验结果表明,与非转化人参愈伤组织相比,转化后的愈伤组织SQS基因表达量降低,皂苷含量有所变化.SQS是人参皂苷生物合成途径的关键酶,抑制SQS基因的表达,可调控人参皂苷含量变化.
- 蒋世翠张明哲王义孙春玉李校堃张美萍
- 关键词:人参
- 水杨酸诱导下人参培养物差异表达基因片段的克隆被引量:11
- 2009年
- 本研究以人参愈伤悬浮细胞为材料,在其生长的第28天添加1×10-3mg/L水杨酸,测定水杨酸添加后,过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶等3种酶在72h内的变化及皂苷含量,结果表明:水杨酸添加后对过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶的活力影响最大,分别在24h和48h达到最大峰值,在18h开始影响多酚氧化酶的活力,培养物生长的第28天添加水杨酸可以明显提高人参愈伤组织中皂苷的合成。确定添加水杨酸后24h提取总RNA,进行cDNA-RDA分析,筛选差异片段。确定差异基因并在GenBank中注册,注册号为FE900130。为探讨水杨酸作为诱导子对人参次生代谢的影响奠定基础。
- 张悦王义蒋世翠张明哲李凤华张美萍
- 关键词:人参差异表达基因
- 人参SQS和SE酶基因的克隆及其表达载体的构建被引量:7
- 2010年
- 鲨烯合酶(SQS)和鲨烯环氧酶(SE)是人参皂苷生物合成过程中的关键酶。以五年生人参叶片为供试材料提取总RNA,根据GeneBank上已发布的SQS和SE基因登录号(AB010148和AB122078),查找对应序列并设计特异性引物,运用RT-PCR方法,通过构建pMD18-T重组质粒、测序分析,成功克隆到大小分别为1440bp的SQS基因和1780bp的SE基因。同时还构建了这2个基因的表达载体pCAMBIA1301-SQS和pCAMBIA1301-SE,从而为分子水平上探讨三萜皂苷生物合成机理及其在药用植物中的应用提供试验材料。
- 张明哲王真慧张美萍王义孙春玉蒋世翠
- 关键词:人参鲨烯合酶克隆表达载体构建
- 一种植物双元表达载体pMHZ112及应用
- 本发明公开了一种植物双元表达载体pMHZ112、植物双元干扰表达载体pMHZ112<I>-SQS-SA</I>和pMHZ112<I>-SQE-SA</I>,转化到农杆菌GV3101中,再将农杆菌GV3101转染人参愈伤组...
- 王义张美萍蒋世翠孙春玉王康宇张明哲于彦婷翟俊峰张洪斌
- 文献传递
- 一种植物双元表达载体pMHZ112及应用
- 本发明公开了一种植物双元表达载体pMHZ112、植物双元干扰表达载体pMHZ112 -SQS-SA 和pMHZ112 -SQE-SA ,转化到农杆菌GV3101中,再将农杆菌GV3101转染人参愈伤组织,获得了人参主要的...
- 王义张美萍蒋世翠孙春玉王康宇张明哲于彦婷翟俊峰张洪斌
- 文献传递