张秀敏
- 作品数：33 被引量：35H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SIRT1去乙酰化酶抑制剂调节肿瘤细胞多药耐药性的机制
- 目的:观察 SIRT1去乙酰化酶抑制剂对肿瘤细胞多药耐药性的影响以及 SIRT1去乙酰化酶对多药耐药性 P-gp 表达的影响。方法:采用 MTT 比色法检测 SIRT1去乙酰化酶抑制剂 Nicotinamide(NAM)...
- 李咏杨啊晶张秀敏李电东何琪杨
- 文献传递
- 一组杀粉蝶菌素(Piericidin)的制备方法及其应用
- 本发明涉及一组杀粉蝶菌素(Piericidin)的制备方法及其应用，所述的制备方法包括如下步骤：(1)发酵CPCC 205386菌株并收获发酵液，发酵液经离心后分为上清液和菌丝体；(2)使用大孔树脂吸附洗脱法提取发酵液上...
- 洪斌王丽解云英何维李星星孙红敏侍媛媛张秀敏杜郁
- 文献传递
- 一种参与脂质代谢的新型化合物及其制备方法
- 本发明提供了一种新型的化合物，所述化合物为E‑13‑(2‑甲基苯基)‑12‑烯‑十三酸，上述化合物来源于球孢链霉菌C‑1027，其能够影响细胞对于低密度脂蛋白的摄取，参与了胞内的脂质代谢过程。上述化合物为白色无定形粉末，...
- 洪斌江志波李星星任卫聪武临专杜郁胡笑文侍媛媛王丽非张秀敏
- 细胞衰老影响MTT法药效评价及其改进方法被引量：4
- 2011年
- 目的MTT法是评价细胞增殖的常规方法，但有时有一定的假阳性率。本文从细胞衰老角度进行研究，探讨假阳性率产生的原因和改进方法。方法使用能引起细胞衰老的抗肿瘤药物博来霉素和博宁霉素，处理人子宫颈癌HeLa细胞和人乳腺癌MCF-7细胞，采用MTT、SRB、台盼蓝染色计数法和克隆形成率等方法检测细胞增殖的抑制作用；衰老相关的β-半乳糖苷酶染色确定衰老细胞。结果低浓度的博宁霉素处理MCF-7细胞，明显引起细胞衰老。MTT法测得的IC50值最大，SRB和台盼蓝染色计数法测得的IC50值次之，克隆形成率法最为敏感，测得的IC50值最小，达到了nM级。结论细胞衰老明显影响一些抗肿瘤药物的MTT评价结果，使用克隆形成率法是最为可靠的克服细胞衰老影响的方法。
- 陈建国张秀敏陈汝贤何琪杨
- 关键词：细胞衰老药效评价MTT法抗肿瘤药物
- 耐索拉非尼的人肝癌BEL-7402细胞株的建立及其特征被引量：1
- 2017年
- 目的:建立耐索拉非尼人肝癌BEL-7402的细胞株并研究其相关特征。方法:用CCK-8法检测药物对细胞增殖的抑制作用,Coulter计数法分析细胞倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期以及活性氧自由基的水平,免疫印迹法检测蛋白的表达。结果:通过浓度递增的方法,诱导人肝癌BEL-7402细胞出现耐药性,得到了低倍耐药的细胞株。结果发现耐药细胞的增殖速度明显减慢,细胞周期发生改变,G1期细胞明显增多。使用相同浓度的索拉非尼处理细胞,与敏感细胞相比较,耐药细胞的活性氧自由基水平明显减少,凋亡相关蛋白P53表达降低,凋亡标志蛋白PARP-1的切割程度变轻。粉防己碱能逆转其耐药性。结论:成功建立了耐索拉非尼的人肝癌BEL-7402细胞株,为索拉非尼的耐药机制及相关药物研究奠定了良好的基础。
- 张秀敏张娟何琪杨
- 关键词：索拉非尼耐药性粉防己碱
- 葛根素通过抑制细胞衰老抗心肌肥大的机制
- 2013年
- 目的：利用血管紧张素II诱导心肌肥大的模型，研究葛根素抗心肌肥大的机制。
- 陈罡沈琮张秀敏何琪杨
- 关键词：心肌肥大葛根素细胞衰老血管紧张素II
- SIRT1去乙酰化酶抑制剂引起人乳腺癌MCF-7耐药细胞凋亡的机制被引量：5
- 2008年
- 研究SIRT1去乙酰化酶抑制剂引起人乳腺癌MCF-7耐多柔比星(doxorubicin,DOX)细胞及其敏感细胞凋亡的机制。MTT法检测细胞生长抑制作用;Western blotting方法检测蛋白表达;DNA特异染料Hoechst 33342染色检测染色质凝集;Annexin V检测细胞凋亡;流式细胞仪测定细胞周期分布。结果表明,SIRT1去乙酰化酶抑制剂烟酰胺(nicotinamide,NAM)和Sirtinol对人乳腺癌细胞MCF-7敏感和耐药细胞表现出相同的生长抑制作用,但没有增强DOX活性的作用。NAM使MCF-7和MCF-7/DOX细胞阻滞在G2/M期。50 mmol.L-1NAM作用MCF-7细胞后,激活caspase凋亡通路,出现PARP、caspase-6、-7、-9切割片段,并且染色质发生凝集和Annexin V阳性细胞。而在MCF-7/DOX耐药细胞中,NAM作用24 h后,才开始出现PARP、caspase-6、-7切割片段,48 h后明显增加,可以检测到较多的细胞出现染色质凝集和Annexin V阳性细胞。SIRT1去乙酰化酶抑制剂对人乳腺癌MCF-7耐药细胞和敏感细胞均有相似的抑制作用,无交叉耐药性,其作用通过激活caspase凋亡通路实现。
- 李咏徐榕张秀敏李电东何琪杨
- 关键词：多药耐药性细胞凋亡人乳腺癌MCF-7细胞
- 白藜芦醇增强吉西他滨抗肝癌活性的机制
- 目的:研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)增强吉西他滨(Gemcitabine,GEM)抗肝癌活性的机制。方法:利用小鼠H22肝癌模型,随机分为5组,每组10只:生理盐水对照组、RES单药组(10mg/kg)、...
- 史卫卫刘秀筠张秀敏何琪杨
- 文献传递
- 单链抗体与lidamycin辅基蛋白融合蛋白工程菌的高密度发酵及其免疫活性被引量：1
- 2009年
- 目的实现抗Ⅳ型胶原酶单链抗体(Fv)与lidamycin辅基蛋白(LDP)结合构成的融合蛋白Fv-LDP产生菌的高密度发酵,并测定融合蛋白Fv-LDP免疫活性。方法先在5L发酵罐中进行工程菌分批发酵和补料分批发酵,再用固定化金属亲和层析从菌体中纯化融合蛋白Fv-LDP,分步透析使之复性,酶联免疫吸附试验和免疫荧光细胞化学染色检测其免疫活性。结果确定分阶段恒速补料分批发酵为工程菌最佳高密度发酵模式,融合蛋白Fv-LDP最高表达量为4g/L,A600为55左右,培养时间约14h。融合蛋白Fv-LDP对Ⅳ型胶原酶呈阳性免疫反应,能与PG细胞特异结合。结论确定了工程菌高密度发酵工艺,融合蛋白Fv-LDP免疫活性良好,为融合蛋白Fv-LDP与lidamycin烯二炔发色团(AE)构成的小型高效化抗体药物Fv-LDP-AE的研究奠定良好基础。
- 高瑞娟赵春燕王玉凤张秀敏赵宝明李电东
- 关键词：单链抗体分批发酵补料分批发酵免疫活性
- 一种体外筛选冠状病毒抑制剂的无细胞筛选模型及其应用
- 本发明涉及一种体外筛选冠状病毒抑制剂的无细胞筛选模型及其应用，所述的模型包括：(1)体外重组表达的RdRp复合体；(2)富含尿嘧啶的5’‑生物素标记的RNA片段；(3)检测RdRp复合体催化生成的dsRNA的定量检测试剂...
- 洪斌王丽非吴硕李玉环白晓明丁晓添徐倩倩杜郁孙红敏李星星张秀敏
