李昌
- 作品数：15 被引量：135H指数：5
- 供职机构：解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家植物转基因技术研究开发与中试基地建设专项吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 抗肿瘤重组活载体疫苗
- 一种抗肿瘤重组活载体疫苗，属于生物技术领域，特别是涉及一种鸡痘病毒活载体疫苗的重组。本发明提供三株分别表达鸡贫血病毒(CAV)凋亡素基因(VP3)，鸡新城疫病毒(NDV)血凝素－神经氨酸酶基因(HN)和人白细胞介素18基...
- 金宁一李霄米志强金扩世孙迎春李昌夏志平金洪涛管国芳李杰
- 文献传递
- O型口蹄疫病毒NY00株的全基因组序列
- 一种O型口蹄疫病毒O_NY00株基因组序列，属于生物技术领域。本发明是采用反转录－聚合酶链反应(RT－PCR)、分子克隆和核酸序列测定技术，对本室分离、保存的中国O型口蹄疫NY00株的全基因组进行了分段扩增、克隆及序列测...
- 郑敏金宁一张洪勇刘棋李昌尹革芬韦婷郭建刚金扩世
- 文献传递
- 猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：23
- 2003年
- 通过 RT- PCR方法从用 PHA和 L PS刺激的猪脾脏细胞中扩增出猪白细胞介素 18(p IL - 18)成熟蛋白基因的c DNA,克隆到 T载体 p UCm- T后 ,序列测定表明 ,p IL- 18成熟蛋白基因核苷酸长度为 4 74 bp,编码 15 7个氨基酸。将该基因片段克隆到大肠杆菌表达载体 p ET- 2 8a构建重组质粒 p ETIL 18m,转化大肠杆菌 BL 2 1(DE3) ,并用 IPTG诱导。重组菌菌体裂解物 SDS- PAGE可检测到相对分子质量为 190 0 0的重组蛋白 ,免疫印迹法证实该重组蛋白可以与人 IL-
- 郑敏金宁一张洪勇李昌尹革芬
- 关键词：成熟蛋白原核表达RT-PCR大肠杆菌免疫佐剂免疫调节剂
- 口蹄疫病毒二价DNA疫苗的构建及实验免疫研究被引量：6
- 2004年
- 通过PCR方法从本室已构建的克隆载体pGEMT-P1-2A获得O型口蹄疫病毒主要保护性抗原VP1基因，以基因突变获得A型VP1基因。将这两种血清型的VP1基因串联后连接到真核表达载体PVAX1 PCMV启动子下游，构建成口蹄疫二价核酸疫苗pVAX1-OA。经Western blot和IFA检测，目的蛋白在HeLa细胞中获得正确表达。动物实验表明，免疫小鼠T淋巴细胞明显增殖，特异性CTL杀伤活性较对照组显著提高；血清抗体能分别与O型和A型抗原反应，抗体效价均高于空白对照组，但较灭活苗低。
- 尹革芬金宁一张洪勇郑敏李昌葛淑敏秦晓冰
- 关键词：口蹄疫病毒VP1基因CTL活性抗体效价免疫指标检测
- 农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究被引量：72
- 2002年
- 以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系 34 0、4112为材料 ,用带有质粒pGBIL0 4(Pactin -Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA44 0 4转化其幼胚及其初始愈伤组织 ,共培养 3天后 ,在含PPT的培养基上连续筛选培养 3代 ,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体 ,结果还发现将共培养温度降到 2 2℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。
- 张艳贞王罡胡汉桥魏松红季静王军军李昌
- 关键词：玉米自交系农杆菌预培养
- A型口蹄疫病毒VP1基因的串联与原核表达
- 合成A型口蹄疫病毒三个亚洲流行株VP1基因的五个抗原表位,并克隆到pMD18-T载体上,构建出A型VP1基因片段(VP1A)。然后,将VP1A基因分别连接到两种原核表达载体上,构建了重组质粒pETCKS-VP1A及pET...
- 鲁会军金宁一郑敏韩松张洪勇李昌金扩世
- 关键词：口蹄疫
- 文献传递
- 口蹄疫病毒结构蛋白P1基因植物表达载体构建及鉴定被引量：1
- 2004年
- 通过RT-PCR克隆了口蹄疫病毒(FMDV)全长P1基因,然后与植物的表达盒融合构建了重组质粒pBI131SP1、pBIP1和pBIAP1,并将质粒转化到根癌农杆菌LBA4404和EHA105中,获得了植物双元表达载体。
- 余云舟金宁一王罡李昌张洪勇郑敏季静王萍
- 关键词：口蹄疫口蹄疫病毒结构蛋白P1基因植物表达载体
- HIV-1 gag基因和gp120基因转化番茄及转基因植株再生被引量：10
- 2004年
- 构建了HIV 1的gag基因、gp1 2 0基因及gag gp1 2 0嵌合基因的植物双元表达载体。通过农杆菌介导法将HIV 1的gag基因、gp1 2 0基因和gag gp1 2 0嵌合基因导入番茄 ,获得抗性转化再生植株。PCR检测和Southern杂交鉴定目的基因已整合到再生植株基因组中 ,获得了转基因植株。GUS染色及Northern杂交结果表明目的基因已得到表达。本实验首次进行了HIV 1抗原基因转化番茄的研究 ,为利用番茄生产艾滋病新型口服疫苗打下了良好的基础。
- 余云舟金宁一王罡季静王萍李昌
- 关键词：番茄GAG基因再生植株
- 基因枪法转化马铃薯及转基因植株的获得被引量：19
- 2003年
- 应用基因枪法将携带有FMDVP1全长基因的质粒pBI1 3 1SP1导入马铃薯茎段 ,通过在抗性培养基上严格筛选 ,获得了马铃薯再生植株。PCR检测及PCR -Southern杂交分析表明 ,已成功地将目的基因导入马铃薯基因组中。
- 李昌金宁一王罡王萍余云舟季静吴颖张艳贞张艳华
- 关键词：基因枪法马铃薯转基因植株基因工程疫苗生物反应器
- 含HIV-1结构蛋白与外膜蛋白基因植物表达载体的构建及向农杆菌的转化
- 本文介绍了将编码HIV-1的Gag基因,GP120基因及Gag-GP120嵌合基因亚克隆到中间载体PCR-TOPO上,并进一步克隆到含CaMCV355启动子控制下的双元素表达载体PBI121中,通过冻融法导入农杆菌,用马...
- 李昌金宁一王罡季静张洪勇余云舟郑敏尹革芬
- 关键词：农杆菌艾滋病疫苗植物基因工程蛋白基因
- 文献传递
