李检秀
- 作品数：52 被引量：44H指数：4
- 供职机构：广西科学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西科学院基本科研业务费资助项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 光学纯meso‑2,3‑丁二醇高产工程菌株的构建方法及应用
- 本发明公开了一种光学纯meso‑2,3‑丁二醇高产工程菌株的构建，该构建方法是将α‑乙酰乳酸合成酶基因、α‑乙酰乳酸脱羧酶基因和meso‑2,3‑丁二醇脱氢酶基因的核苷酸序列进行密码子优化，然后拼接获得包含该三个基因的基...
- 黄艳燕黄日波谢能中李检秀陈先锐王青艳陈东杜奇石
- 合成气发酵生产乙醇菌株的筛选被引量：4
- 2014年
- [目的]从动物粪便样品中分离能利用合成气生产乙醇的菌株，并对其进行鉴定及初步发酵实验，为工业利用合成气生产乙醇奠定理论基础。[方法]利用富集驯化培养技术，以合成气为唯一碳源，分离筛选合成气利用菌，通过形态观察、生理生化实验及16S rRNA 序列分析鉴定菌株，并利用菌株进行初步发酵实验。[结果]分离到1株可以发酵合成气生产乙醇的菌株，分子鉴定结果表明，该菌株为 Clostridium ljungdahlii 。生理生化分析结果显示：该菌是严格厌氧型革兰氏阳性菌，短杆状，有运动性，芽孢很少见，生长必须因子包括酵母粉和维生素 B 族；最适碳源为果糖，最适生长温度35～37℃，最适 pH 值为6．0～7．0。合成气发酵实验结果显示：37℃，厌氧静止发酵30d，乙醇最高产量达到2．58g/L，添加 BESA、莫能菌素、丁基橡胶颗粒可以使乙醇产量分别提高49％、70％、4．3％，最大产量达到4．31g/L。[结论]从动物粪便中分离到1株 Clostridium ljungdahlii ，该菌能够利用合成气生产乙醇，为进一步研究和开发新型生物质材料提供了基础资料。
- 郭铃黄艳燕潘丽霞李检秀孙菲菲孙靓黄日波
- 关键词：合成气厌氧发酵乙醇
- 应用合成生物学策略构建全细胞生物催化剂合成(S)-乙偶姻被引量：1
- 2019年
- 目的:在大肠杆菌宿主中过量表达丁二酮还原酶(DAR),同时构建辅酶NADH原位再生系统,利用全细胞高效催化丁二酮不对称还原合成(S)-乙偶姻。方法:PCR克隆多黏芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) dar基因连到质粒pETDuet-1,转化至大肠杆菌(Escherichia coli) BL21(DE3),构建重组菌E. coli BL21(DE3)-DAR;通过Hi Trap TALON柱亲和层析纯化表达产物DAR酶蛋白,测定DAR的比酶活和分子动力学参数。在重组菌E. coli BL21(DE3)-DAR中构建辅酶NADH原位再生系统,协同表达枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的葡萄糖脱氢酶(GDH),构建重组菌E. coli BL21(DE3)-DAR/GDH,并以此重组菌为全细胞生物催化剂,优化催化条件,提高(S)-乙偶姻的产量和产率。结果:获得重组工程菌E. coli BL21(DE3)-DAR和E. coli BL21(DE3)-DAR/GDH。DAR以NADH为辅酶还原丁二酮的米氏常数Km、最大催化速率Vmax、催化常数Kcat分别为2. 59mmol/L、1. 64μmol/(L·min·mg)、12. 3/s,还原丁二酮生成(S)-乙偶姻光学的纯度为95. 86%,具有较好的催化效率和立体异构体选择性。构建辅酶NADH原位再生系统后,重组菌E. coli BL21(DE3)-DAR/GDH可高效催化丁二酮合成乙偶姻。在最优催化条件下分批补料,乙偶姻产量达51. 26g/L,转化率为81. 37%,生产速率为5. 13g/(L·h)。结论:使用非手性化合物原料丁二酮生产高附加值的手性化合物(S)-乙偶姻,以重组菌为全细胞生物催化剂合成(S)-乙偶姻,不需额外添加昂贵的辅酶,具有较高的生产应用价值。
- 李检秀陈先锐陈小玲陈小玲黄艳燕谢能中谢能中
- 关键词：乙偶姻
- 非离子型表面活性剂对甘蔗渣在二甘醇/甘油溶剂中液化的影响
- 2011年
- 将甘蔗渣在二甘醇/丙三醇溶剂体系下液化,考察非离子型表面活性剂(NIS):OP-10,OP-15,AEO-9,AEO-15,Tween-85,Tween-80,Span-60对液化的促进作用。结果AEO-15对提高甘蔗渣液化转化率效果最明显,相对于未使用AEO-15的液化体系,残渣率降低36.2%,液化产物羟值提高37.7%,重均分子量上升18.8%,液化产物分子量分布更佳,液化产物聚合分散度降低11.3%;而OP-10对液化中间产物在试剂体系中的分散溶解效果最好,液化最终产物羟值提高96%,达到791 mgKOH/g。这说明,NIS可以提高液化试剂对甘蔗渣的渗透能力,增强液化产物在液化试剂体系中的分散溶解,已经显著改善了甘蔗渣在二甘醇/甘油溶剂体系中的液化程度,液化效果接近或超过了甘蔗渣在聚乙二醇/甘油溶剂体系中的液化效果。
- 吴学众李检秀师德强李秉正
- 关键词：甘蔗渣液化甘油二甘醇非离子型表面活性剂
- 一种光学纯R-乙偶姻的生产方法
- 一种光学纯R-乙偶姻的生产方法，包括如下步骤：将(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶基因(bdh)和葡萄糖脱氢酶基因(gdh)在大肠杆菌中共表达，并以此重组大肠杆菌休止细胞为生物催化剂，以丁二酮为前体转化生产光学纯R-乙偶姻...
- 谢能中黄日波李检秀郭铃黄艳燕杜奇石王青艳李亿
- 文献传递
- 一株青霉属真菌Penicillium sp. YMS6及其应用
- 本发明提供一株青霉属真菌<I>Penicillium</I> sp.YMS6及其应用，该真菌于2023年5月10日在中国典型培养物保藏中心登记保藏，保藏号为CCTCC No：M2023717。该菌株能够同时或单独转化三七...
- 刁梦雪谢能中李检秀
- 一株高产L-乳酸的鼠李糖乳杆菌菌株及发酵木薯、甘蔗糖蜜产乳酸的方法
- 本发明公开了一种高产L-乳酸的鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)菌株(SCT-10-10-60)，该菌株在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)的保藏号为：CCTCC N0.M：20100...
- 孙靓黄日波李检秀陈东孙菲菲黄艳燕
- 文献传递
- 代谢工程改造多粘芽孢杆菌及合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇被引量：1
- 2021年
- (R,R)-2,3-BD是一种重要的四碳平台化合物,在液晶材料、高附加值手性化合物,尤其是不对称合成光学纯药物等方面有天然优势。将来源于多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) DSM 365的α-乙酰乳酸合成酶(α-acetolactate synthase)基因alsS、α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase)基因alsD和(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶(2,3-butanediol dehydrogenase)基因R,R-bdh与表达载体pMA5连接,导入多粘芽孢杆菌P. polymyxa DSM 365中加强(R,R)-2,3-丁二醇的主代谢途径,构建可高效合成(R,R)-2,3-丁二醇的多粘芽孢杆菌工程菌株DM-5。利用工程菌株DM-5补料分批发酵60 h,(R,R)-2,3-丁二醇产量达54.91 g/L,得率为0.52 g/g,生产强度为0.92 g·L^(-1)·h^(-1),与野生菌株相比(R,R)-2,3-丁二醇产量增加19.66%,且副产物甲醇浓度不变,乙醇、乙偶姻积累下降。本研究结果表明,在多粘芽孢杆菌中过量表达关键基因alsS、alsD和R,R-bdh能够显著提高(R,R)-2,3-丁二醇的产量和生产强度,为多粘芽孢杆菌的代谢工程改造和工业化生产(R,R)-2,3-丁二醇提供参考。
- 莫棋文陈先锐李燕婷彭龙云黄艳燕李检秀黄日波
- 关键词：代谢工程补料分批发酵多粘芽孢杆菌
- 以木薯淀粉为原料发酵生产(R,R)-2,3-丁二醇的方法
- 一种以木薯淀粉为原料发酵生产(R,R)-2,3-丁二醇的方法，包括如下步骤：以木薯淀粉或者木薯淀粉水解液为原料，与氮源、无机盐、酶混合后接入产(R,R)-2,3-丁二醇的菌种，以同步液化糖化发酵或者同步糖化发酵的方式，进...
- 谢能中黄日波李检秀李亿黄艳燕郭铃
- 文献传递
- 生物法合成乙偶姻手性异构体的研究进展被引量：2
- 2017年
- 乙偶姻是一种重要的四碳平台化合物,在食品、医药、烟草、化妆品、化工等行业具有广泛的用途,其手性异构体(R)?乙偶姻和(S)-乙偶姻由于具有独特的立体结构,还可用于合成高附加值手性药物、化学中间体、液晶材料。本文综述了近年来利用酶法、全细胞催化法和基因工程菌发酵法制备手性乙偶姻的研究成果,介绍了利用代谢工程、合成生物学等技术在构建基因工程菌株,以及在提高乙偶姻产量、转化率和光学纯度方面所取得的研究进展。最后讨论了目前所存在的问题和难点,以及今后应该重点关注的研究方向。
- 谢能中石毓梅李检秀黄艳燕杜奇石黄日波
- 关键词：手性合成代谢工程合成生物学细胞工厂
