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李莲: 作品数：53 被引量：202H指数：9; 供职机构：南京农业大学动物科技学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业三新工程项目国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学电子电信更多>>

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一种预防奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注剂的试验观察: 2005年; 采用液体试管法研究“干奶牛乳房灌注剂”对牛乳房炎大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌的体外抑菌效果。结果表明对上述细菌具有很好的抑制作用。采用TTC法测定牛奶中抗生素残留,发现停药48h以后奶样均无抗生素残留。76例干奶牛使用药剂处理后,牛奶中体细胞数下降27%,临床乳房炎发生率降低70%。试验证明该制剂对细菌性乳房炎的治疗效果可靠,可以用于预防干奶期奶牛乳房炎。; 宋维龙李莲狄和双杨媛媛钟辉阎玉琴王根林; 关键词：干奶期奶牛乳房炎

热应激奶牛外周血淋巴细胞凋亡相关基因表达及血液学分析被引量：23: 2005年; 用半定量RT- PCR分析日平均气温分别为37 .5°C (高温)、26. 5°C (临界高温) 和5 5°C (对照) 条件下奶牛外周血中HSP70mRNA、HSF1mRNA、Bcl 2mRNA和Bax αmRNA 基因丰度变化规律; 用流式细胞仪分析上述条件下外周血淋巴细胞所处的分裂时期(G0/G1 期, S期及G2/M期) 及淋巴细胞的凋亡率; 用全血自动分析仪分析外周血的血常规。研究发现: (1) 在37. 5°C高温条件下, HSP70mRNA 基因表达水平极显著高于26 .5°C和5 5°C条件下的表达量, 表达水平随温度降低呈下降趋势; HSF1mRNA 表达水平与HSP70mRNA 相反, 随温度降低升高, 5 5°C最高, 相对于其它两个温度条件差异显著; Bcl 2mRNA/Bax αmRNA 在26 5°C时最低, 相对于其它两个温度条件该基因的丰度差异显著; (2) 淋巴细胞凋亡率在26 5°C达到最高峰(10 60%),5 5°C下降至最低(2 7%), 差异显著; (3) 白细胞计数(White blood cell, WBC) (14 75×109/L) 和红细胞计数(Red blood cell, RBC) ( 3 .85×1012/L) 在高温37. 5°C时最低, 随温度下降而逐步上升。RBC 和血红蛋白(Hemoglobin, HGB) 在37. 5°C最低, 随温度降低逐步升高, 相对于其它两个温度差异显著; 红细胞平均血红蛋白含量(Mean corpuscular hemoglobin, MCH) 在26. 5°C最高(18 .; 蔡亚非杜娟张利军李莲刘庆华周磊杨媛媛王根林; 关键词：热应激奶牛基因表达血常规分析

荷斯坦牛HSP70-1和HSP32基因SNP位点与生产性能及乳房炎抗性的相关性研究: 2013年; 利用测序、巢式PCR(Nest-PCR)和限制性片段多态性PCR(restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法,检测375头中国荷斯坦牛热休克蛋白70-1(heat shock protein 70-1,HSP70-1)和热休克蛋白32(HSP32)基因的编码区单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,并分析其基因多态与生产性能及乳房炎抗性的相关性。结果表明:HSP70-1基因的3 099 bp和HSP32基因的6 356 bp位点都发生了G→A突变,这2个位点均是沉默突变,未引起氨基酸序列的改变;经χ2适合性检验,试验牛群在2个位点均未达到Hardy-Weinberg平衡状态;群体基因座不同基因型与体细胞评分、乳脂率、乳蛋白、成年当量相关性分析的结果表明,HSP70-1和HSP32的SNP位点与乳脂率、乳蛋白、成年当量相关性不显著,HSP32 SNP位点基因型与体细胞评分相关性显著(P=0.041),HSP70-1 SNP位点基因型与体细胞评分相关性不显著(P=0.053)。两基因型组合分析发现,HSP70-1的GG型和HSP32的AA型为最佳组合,其体细胞评分显著或极显著低于其他组合,可将该组合作为抗乳腺炎性状的分子遗传标记。; 蒋小强白井岩吴洁李莲李倩倩王根林; 关键词：荷斯坦牛热休克蛋白70 SNP位点乳腺炎抗性

基于iTRAQ技术的脂多糖刺激下奶牛乳腺上皮细胞的蛋白组学分析被引量：4: 2016年; 基于iTRAQ多重标记串联质谱技术系统研究脂多糖刺激下乳腺上皮细胞蛋白的差异表达,并对与乳蛋白、乳脂肪相关差异表达基因进行验证。培养纯化后的乳腺上皮细胞,经脂多糖(LPS)处理后提取细胞蛋白,采用iTRAQ标记和联合二维液相色谱-串联质谱(2D-LC-MS/MS)检测分析得到各组间细胞差异表达蛋白,并采用蛋白印迹和酶联免疫法(ELISA)对差异蛋白进行验证,然后对与乳蛋白、乳脂肪相关基因的相互作用蛋白进行PPI(Protein protein interaction)预测。乳腺上皮细胞共鉴定出2 487个蛋白,其中差异蛋白共341个,与对照组相比,163个蛋白表达上调,178个蛋白表达下调。iTRAQ测定结果显示,LPS处理组与对照组相比,αs1-酪蛋白(CSN1S1)、κ-酪蛋白(CSN3)和脂肪酸合酶(FASN)基因蛋白表达水平有统计学意义;经蛋白印迹试验结果表明,LPS诱导组αs1-酪蛋白表达水平同对照组比较,明显降低(P<0.05);应用ELISA方法测定细胞培养液中αs1-酪蛋白、κ-酪蛋白和脂肪酸合酶的浓度结果显示,LPS诱导组细胞培养液中上述蛋白的浓度明显低于对照组(P<0.05)。综上表明,LPS诱导的炎症反应可影响乳腺上皮细胞的乳蛋白和乳脂肪的合成。; 李莲唐娟吴洁王根林; 关键词：乳腺上皮细胞蛋白质组学脂多糖

胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响被引量：2: 2022年; [目的]本试验旨在揭示胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的抑制作用。[方法]奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,将细胞分为对照组、胆碱组(100μmol·L^(-1))、热应激组(42℃,2 h)、热应激+胆碱组。采用CCK-8法分析添加胆碱对MAC-T细胞的药物毒性及细胞增殖活性的影响,采用Western blot分析蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)磷酸化水平及激活转录因子4(ATF-4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2关联X(Bax)蛋白表达水平,RT-qPCR检测GRP78、CHOP、ATF-4、Bax、Bcl-2、Caspase-3(胱氨酸蛋白3基因)mRNA水平。[结果]与对照组相比,热应激组MAC-T细胞的相对存活率极显著降低(P<0.01),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Bcl-2表达量极显著下降(P<0.01),且显著上调Caspase-3 mRNA表达水平;与热应激组相比,热应激+胆碱组MAC-T细胞相对存活率显著增加(P<0.05),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05),且Caspase-3 mRNA表达水平受到明显抑制。[结论]胆碱通过调控内质网应激介导的凋亡信号通路的表达,抑制由热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞的凋亡。; 杨敏杨彩霞李亚南雷智琦王根林李莲; 关键词：热应激凋亡胆碱奶牛乳腺上皮细胞

抑制素α亚基在大鼠下丘脑与垂体的免疫组织化学定位: 2005年; 用链酶亲和素-生物素过氧化物酶复合物(SABC)免疫组织化学方法,使用抑制素α亚基单克隆抗体对注射抑制素α片段及抑制素粗提物后的去卵巢大鼠的下丘脑和垂体进行了免疫组织化学定位。结果表明,在下丘脑与垂体存在抑制素α亚基单克隆抗体的特异性阳性反应位点,并存在剂量与时间上的依赖关系,说明抑制素α亚基可以通过血脑屏障到达下丘脑和垂体,为探讨抑制素α亚基在血脑屏障的转运机制提供了形态学上的依据。; 王根林柳伟荣李莲蔡亚非闫玉琴张利军; 关键词：垂体下丘脑抑制素 Α亚基免疫组织化学定位过氧化物酶

奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b-RAD基因分型和分析方法: 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b‑RAD基因分型和分析方法，包括如下步骤：建库测序；生物信息学分析：数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Lo...; 蔡亚非杨帆李君陈芳慧李莲李惠侠王根林韩兆玉马腾月吕成龙

乳房炎奶牛乳腺组织中TLR4/p38的表达差异分析被引量：7: 2015年; [目的]本文旨在探究p38通路及相关因子与乳房炎的关系。[方法]选择正常和患临床乳房炎2组共6头荷斯坦奶牛进行研究。收集2组奶牛的乳样、血样以及组织样品,利用石蜡包埋和HE切片染色对奶牛乳腺组织进行观察,通过实时荧光定量PCR(RT-q PCR)对p38、TLR4、TNF-α和IL-1βmRNA水平的表达进行分析,通过ELISA和Western blot对p38、TLR4、TNF-α和IL-1β蛋白水平的差异表达进行分析。[结果]患乳房炎奶牛乳腺组织中p38、IL-1β和TNF-αmRNA水平表达显著升高(P<0.05)。ELISA结果表明:两组样品中炎症因子TNF-α和IL-1β的表达水平差异显著(P<0.05)。组织Western blot结果显示,临床乳房炎奶牛的组织中TLR4、p38以及磷酸化p38(p-p38)的表达量与对照组相比差异显著(P<0.05)。[结论]p38信号通路相关蛋白在发生临床性乳房炎的奶牛乳腺组织中的表达量与正常奶牛的表达量差异显著,提示了p38通路在乳房炎的发病过程中可能起着重要的作用。; 余盼孙宇李莲毛杰柳许娟王根林; 关键词：奶牛乳房炎 P38 炎症因子

高温对奶牛乳腺上皮细胞基因表达的影响: 1.引言众所周知,细胞对高温的反应是机体应激反应的一部分,奶牛热应激时乳腺上皮细胞会通过细胞内外的信号,协调细胞和动物整体的代谢过程,从而对环境中的热负荷做出反应。而在奶牛泌乳过程中乳汁的合成和分泌主要是由乳腺组织的乳腺...; 李莲孙宇吴洁李晓娟罗曼王根林; 关键词：奶牛乳腺上皮细胞基因表达; 文献传递

热应激环境下牛舍智能喷淋系统的应用: 2023年; 奶牛热应激是影响夏季奶牛生产性能的最大因素,严重制约了畜牧业的发展。喷淋加风扇是目前最有效的物理降温方式,但传统的喷淋系统存在着水资源利用效率低,开启后污水量大等缺点。本文旨在探讨雷达微波智能喷淋系统对奶牛产奶性能、牛舍用水量及牛舍温湿度等指标的影响,以期帮助牧场管理人员制定预防热应激的策略。; 徐燕李艺男田雨李莲李浩东潘雨来; 关键词：奶牛温度

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