李莲 作品数:56 被引量:211 H指数:9 供职机构: 南京农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省农业三新工程项目 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 政治法律 更多>>
一种预防奶牛乳房炎的干奶牛乳房灌注剂的试验观察 2005年 采用液体试管法研究“干奶牛乳房灌注剂”对牛乳房炎大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌的体外抑菌效果。结果表明对上述细菌具有很好的抑制作用。采用TTC法测定牛奶中抗生素残留,发现停药48h以后奶样均无抗生素残留。76例干奶牛使用药剂处理后,牛奶中体细胞数下降27%,临床乳房炎发生率降低70%。试验证明该制剂对细菌性乳房炎的治疗效果可靠,可以用于预防干奶期奶牛乳房炎。 宋维龙 李莲 狄和双 杨媛媛 钟辉 阎玉琴 王根林关键词:干奶期 奶牛乳房炎 热应激奶牛外周血淋巴细胞凋亡相关基因表达及血液学分析 被引量:23 2005年 用半定量RT- PCR分析日平均气温分别为37 .5°C (高温)、26. 5°C (临界高温) 和5 5°C (对照) 条件下奶牛外周血中HSP70mRNA、HSF1mRNA、Bcl 2mRNA和Bax αmRNA 基因丰度变化规律; 用流式细胞仪分析上述条件下外周血淋巴细胞所处的分裂时期(G0/G1 期, S期及G2/M期) 及淋巴细胞的凋亡率; 用全血自动分析仪分析外周血的血常规。研究发现: (1) 在37. 5°C高温条件下, HSP70mRNA 基因表达水平极显著高于26 .5°C和5 5°C条件下的表达量, 表达水平随温度降低呈下降趋势; HSF1mRNA 表达水平与HSP70mRNA 相反, 随温度降低升高, 5 5°C最高, 相对于其它两个温度条件差异显著; Bcl 2mRNA/Bax αmRNA 在26 5°C时最低, 相对于其它两个温度条件该基因的丰度差异显著; (2) 淋巴细胞凋亡率在26 5°C达到最高峰(10 60%),5 5°C下降至最低(2 7%), 差异显著; (3) 白细胞计数(White blood cell, WBC) (14 75×109/L) 和红细胞计数(Red blood cell, RBC) ( 3 .85×1012/L) 在高温37. 5°C时最低, 随温度下降而逐步上升。RBC 和血红蛋白(Hemoglobin, HGB) 在37. 5°C最低, 随温度降低逐步升高, 相对于其它两个温度差异显著; 红细胞平均血红蛋白含量(Mean corpuscular hemoglobin, MCH) 在26. 5°C最高(18 . 蔡亚非 杜娟 张利军 李莲 刘庆华 周磊 杨媛媛 王根林关键词:热应激 奶牛 基因表达 血常规分析 正常奶牛和患乳房炎奶牛血样和乳样中几个炎症因子的相关性分析 1.引言奶牛乳腺炎是奶牛养殖行业的最常见疾病,因其高发病率,低治愈率及其复杂的发病机制,严重制约奶牛产业的发展。据报道全世界约6000多万多头奶牛患有乳房炎,每年因此造成的损失约为2000多亿元[1]。奶牛乳房炎产生的原... 余盼 孙宇 李莲 柳许娟 吴洁 毛杰 王根林文献传递 基于犬猫食物不良反应的研究动态及进展 2023年 近年来,犬猫的食物不良反应(Adverse food reactions,AFRs)得到了宠主的极大关注,其不仅对犬猫的健康有严重影响,有时甚至对犬猫生命构成威胁。阐明与犬猫相关的食物不良反应,明确其发病机制、临床特征及处理应对方法等,将有助于宠主了解学习、预防、减少或改善犬猫的食物不良反应,提升宠物生活质量、延长其寿命及加强人宠之间的纽带关系。本文基于犬猫的食物不良反应的分类、反应机理、临床症状、诊断、饮食管理进行了概述,从而为更好地判断犬猫的食物不良反应,制定其营养管理方案提供参考。 郭新姿 王艺霏 李莲关键词:犬猫 食物过敏 食物不耐受 RNA-seq转录组测序分析不同季节对槟榔江水牛精液品质的影响 被引量:3 2016年 本研究旨在利用RNA-seq技术对不同季节槟榔江水牛全血mRNA进行分析,找出不同季节精液品质候选基因。选取5头生长状况相近的3~5岁槟榔江水牛,进行春、夏、秋、冬4个季节的精液品质(鲜精活力、精子畸形率、射精量、精子密度)检测。根据精液品质,选取差异极显著的春(BL)、夏(SBL)两个季节的水牛样品进行RNA-seq转录组测序分析。颈静脉采集全血,抽提mRNA并组内混合制样,利用RNA-seq技术分析不同季节槟榔江水牛全血mRNA差异表达。根据差异倍数〉1.5,P〈0.05的标准进行筛选,得到差异基因,再利用DAVID6.7软件对差异基因进行GO和KEGG分析,通过RT-PCR验证基因芯片结果的准确性。结果表明:差异表达基因84个,其中上调基因56个,下调基因28个;GO分析发现,这些差异基因与应激反应、免疫反应有关;KEGG分析表明,差异基因显著富集到肿瘤坏死因子(TNF)和T细胞受体信号通路。其中,神经营养因子受体类似物死亡结构域(NRADD,又叫热休克蛋白因子1(HSF1))、原癌基因FOS和JUN,与精液品质相关性强,可作为进一步研究的靶基因。 耿红红 张敬旸 李莲 王根林关键词:RNA-SEQ 槟榔江水牛 差异表达基因 精液品质 奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b-RAD基因分型和分析方法 本发明涉及奶牛乳腺炎关键SNPs位点rs20438858及2b‑RAD基因分型和分析方法,包括如下步骤:建库测序;生物信息学分析:数据过滤、酶切序列提取、数据比对、SNP分型、全基因组关联分析。采用BayesA模型和Lo... 蔡亚非 杨帆 李君 陈芳慧 李莲 李惠侠 王根林 韩兆玉 马腾月 吕成龙荷斯坦牛HSP70-1和HSP32基因SNP位点与生产性能及乳房炎抗性的相关性研究 2013年 利用测序、巢式PCR(Nest-PCR)和限制性片段多态性PCR(restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法,检测375头中国荷斯坦牛热休克蛋白70-1(heat shock protein 70-1,HSP70-1)和热休克蛋白32(HSP32)基因的编码区单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,并分析其基因多态与生产性能及乳房炎抗性的相关性。结果表明:HSP70-1基因的3 099 bp和HSP32基因的6 356 bp位点都发生了G→A突变,这2个位点均是沉默突变,未引起氨基酸序列的改变;经χ2适合性检验,试验牛群在2个位点均未达到Hardy-Weinberg平衡状态;群体基因座不同基因型与体细胞评分、乳脂率、乳蛋白、成年当量相关性分析的结果表明,HSP70-1和HSP32的SNP位点与乳脂率、乳蛋白、成年当量相关性不显著,HSP32 SNP位点基因型与体细胞评分相关性显著(P=0.041),HSP70-1 SNP位点基因型与体细胞评分相关性不显著(P=0.053)。两基因型组合分析发现,HSP70-1的GG型和HSP32的AA型为最佳组合,其体细胞评分显著或极显著低于其他组合,可将该组合作为抗乳腺炎性状的分子遗传标记。 蒋小强 白井岩 吴洁 李莲 李倩倩 王根林关键词:荷斯坦牛 热休克蛋白70 SNP位点 乳腺炎抗性 基于iTRAQ技术的脂多糖刺激下奶牛乳腺上皮细胞的蛋白组学分析 被引量:4 2016年 基于iTRAQ多重标记串联质谱技术系统研究脂多糖刺激下乳腺上皮细胞蛋白的差异表达,并对与乳蛋白、乳脂肪相关差异表达基因进行验证。培养纯化后的乳腺上皮细胞,经脂多糖(LPS)处理后提取细胞蛋白,采用iTRAQ标记和联合二维液相色谱-串联质谱(2D-LC-MS/MS)检测分析得到各组间细胞差异表达蛋白,并采用蛋白印迹和酶联免疫法(ELISA)对差异蛋白进行验证,然后对与乳蛋白、乳脂肪相关基因的相互作用蛋白进行PPI(Protein protein interaction)预测。乳腺上皮细胞共鉴定出2 487个蛋白,其中差异蛋白共341个,与对照组相比,163个蛋白表达上调,178个蛋白表达下调。iTRAQ测定结果显示,LPS处理组与对照组相比,αs1-酪蛋白(CSN1S1)、κ-酪蛋白(CSN3)和脂肪酸合酶(FASN)基因蛋白表达水平有统计学意义;经蛋白印迹试验结果表明,LPS诱导组αs1-酪蛋白表达水平同对照组比较,明显降低(P<0.05);应用ELISA方法测定细胞培养液中αs1-酪蛋白、κ-酪蛋白和脂肪酸合酶的浓度结果显示,LPS诱导组细胞培养液中上述蛋白的浓度明显低于对照组(P<0.05)。综上表明,LPS诱导的炎症反应可影响乳腺上皮细胞的乳蛋白和乳脂肪的合成。 李莲 唐娟 吴洁 王根林关键词:乳腺上皮细胞 蛋白质组学 脂多糖 胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响 被引量:3 2022年 [目的]本试验旨在揭示胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的抑制作用。[方法]奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,将细胞分为对照组、胆碱组(100μmol·L^(-1))、热应激组(42℃,2 h)、热应激+胆碱组。采用CCK-8法分析添加胆碱对MAC-T细胞的药物毒性及细胞增殖活性的影响,采用Western blot分析蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)磷酸化水平及激活转录因子4(ATF-4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2关联X(Bax)蛋白表达水平,RT-qPCR检测GRP78、CHOP、ATF-4、Bax、Bcl-2、Caspase-3(胱氨酸蛋白3基因)mRNA水平。[结果]与对照组相比,热应激组MAC-T细胞的相对存活率极显著降低(P<0.01),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Bcl-2表达量极显著下降(P<0.01),且显著上调Caspase-3 mRNA表达水平;与热应激组相比,热应激+胆碱组MAC-T细胞相对存活率显著增加(P<0.05),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P<0.05),且Caspase-3 mRNA表达水平受到明显抑制。[结论]胆碱通过调控内质网应激介导的凋亡信号通路的表达,抑制由热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞的凋亡。 杨敏 杨彩霞 李亚南 雷智琦 王根林 李莲关键词:热应激 凋亡 胆碱 奶牛乳腺上皮细胞 抑制素α亚基在大鼠下丘脑与垂体的免疫组织化学定位 2005年 用链酶亲和素-生物素过氧化物酶复合物(SABC)免疫组织化学方法,使用抑制素α亚基单克隆抗体对注射抑制素α片段及抑制素粗提物后的去卵巢大鼠的下丘脑和垂体进行了免疫组织化学定位。结果表明,在下丘脑与垂体存在抑制素α亚基单克隆抗体的特异性阳性反应位点,并存在剂量与时间上的依赖关系,说明抑制素α亚基可以通过血脑屏障到达下丘脑和垂体,为探讨抑制素α亚基在血脑屏障的转运机制提供了形态学上的依据。 王根林 柳伟荣 李莲 蔡亚非 闫玉琴 张利军关键词:垂体 下丘脑 抑制素 Α亚基 免疫组织化学定位 过氧化物酶