李长红
- 作品数：23 被引量：111H指数：6
- 供职机构：宁波大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 宁海地区香鱼弧菌病病原菌鉴定被引量：42
- 2009年
- 【目的】香鱼弧菌病对中国沿海地区的香鱼养殖业造成了巨大的危害,然而,病原不明导致了防治上的许多问题。本文鉴定了引起宁海地区香鱼爆发性弧菌病的病原。【方法】采用TCBS平板分离优势菌;采用回归感染试验确认病原菌,采用改进的寇氏法计算LD50;采用形态学观察、生理生化特征测定、细菌特异性引物PCR扩增检测及细菌16S rRNA和金属蛋白酶(MP)基因序列分析鉴定细菌;采用药敏实验测定它对部分抗生素的敏感性。【结果】分离并鉴定优势菌株ayu-H080701为宁海地区香鱼弧菌病的病原菌,它对香鱼的半致死量为1.2×104CFU。形态学观察和生理生化特征测定表明,ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌最为接近。PCR扩增检测表明,细菌16S rRNA基因通用引物和鳗利斯顿氏菌MP基因特异引物均能扩增到预期大小的特异性条带。ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌16S rRNA基因核苷酸序列同源性最高,为99.4%～99.5%,与同属的海弧菌和美人鱼发光杆菌分别为94.3%和91.9%;ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌MP氨基酸序列同源性高达97.6%～98.8%,与其它弧菌科成员则低于75.6%,系统进化树分析也揭示ayu-H080701与鳗利斯顿氏菌进化相关性最高。【结论】引起宁海地区香鱼弧菌病的菌株ayu-H080701被鉴定为鳗利斯顿氏菌。
- 李长红陈炯史雨红李明云
- 关键词：鳗利斯顿氏菌
- 大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)piscidin 1的分子特征及功能分析被引量：1
- 2018年
- Piscidin类抗菌肽具有广谱的抗菌活性,在鱼类先天性免疫中扮演重要角色。本文对大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)单核/巨噬细胞(monocytes/macrophages,MO/MΦ)转录组测序获得piscidin 1基因(Bppis1)c DNA全序列。Bppis1基因c DNA序列由327个核苷酸组成,开放阅读框为207bp,编码68个氨基酸,预测相对分子量为7.7k Da,等电点为5.51。氨基酸序列多重比对分析表明,Bppis1具有piscidin家族的特征结构,信号肽序列最为保守,终止于GEG序列后,与黄条(Seriola lalandi)piscidin同源性最高,为40.8%;系统进化树分析表明,Bppis1属于piscidin 1类,与黄条piscidin进化相关性最高。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-q PCR)结果显示,Bppis1m RNA在健康鱼鳃中表达量最高;迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染后,大弹涂鱼肝、脾、肾、鳃和皮肤中Bppis1 m RNA表达量显著上调。体外抑菌实验结果表明,人工合成的Bppis1成熟肽抑菌活性较广泛,但对迟缓爱德华氏菌和3株革兰氏阳性菌无抑菌活性。大弹涂鱼MO/MΦ经1.0μg/m L Bppis1成熟肽处理后,对FITC标记的创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的吞噬活性显著增加。综上,Bppis1在大弹涂鱼先天免疫中发挥重要作用,可能作为抵抗病原体入侵的潜在治疗药物。
- 管峰管峰李长红苗亮苗亮
- 关键词：大弹涂鱼迟缓爱德华氏菌抗菌活性吞噬活性
- 重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法
- 本发明公开了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法，特点是包括将人工合成的人源LECT2基因插入胞外表达载体pPICZαA中构建重组表达质粒的步骤；酶切线性化后电击导入毕赤酵母X33中，获得重组工程菌株的步骤...
- 陈炯史雨红章瑞程陆新江李长红李明云
- 文献传递
- 三疣梭子蟹血淋巴免疫功能的初步研究被引量：19
- 2008年
- 利用API ZYM试剂盒和酶活力测试盒检测了三疣梭子蟹血细胞及血清中的19种酶类及血清中溶菌酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、超氧化物歧化酶和过氧化物酶的活性。试验结果表明,在雄蟹血清和血细胞中均检测到19种酶,在雌蟹血清和血细胞中分别检测到18种和16种。碱性磷酸酶和酸性磷酸酶的活性很低。在此基础上,研究了三疣梭子蟹血清和血细胞溶解物(HLS)对溶藻弧菌的抗菌活力,结果显示血清样品对溶藻弧菌的抗菌活力较强,但其体外作用的持续时间较短;而血细胞溶菌酶对溶藻弧菌的抗菌活力较弱。
- 李长红金珊
- 关键词：三疣梭子蟹血细胞血清抗菌活力
- 香鱼急性期反应研究及Wap65-2的功能初探
- 香鱼(Plecoglossus altivelis)是东亚地区中国、日本和朝鲜等国家特有的一种小型名贵经济鱼类。香鱼易感弧菌病，由于传染快、死亡率高，给中国沿海地区的香鱼养殖业造成巨大损失。目前香鱼免疫系统研究的仍然滞后...
- 李长红
- 关键词：香鱼鳗利斯顿氏菌急性期反应抑制消减杂交
- 文献传递
- 香鱼HSP90β的克隆、序列特征及表达分析被引量：2
- 2018年
- 热休克蛋白(Heat Shock Proteins,HSPs)是一种分子伴侣,具有广泛的生物学活性。从香鱼(Plecoglossus altivelis)肝c DNA文库获得HSP90β亚型(Pa HSP90β)c DNA全序列。Pa HSP90β全长2726 bp,包含1个由2175 bp组成的开放阅读框,编码724个氨基酸,预测相对分子质量为83.30 ku,等电点为4.83。氨基酸序列分析显示,Pa HSP90β含有HSP90的5个保守信号区,氨基酸序列第34~188处具有HATPase(histidine kinase-like ATPases)结构域;与白鲑(Coregonus lavaretus)HSP90β亲缘关系最近,氨基酸序列同源性高达95.8%。实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,q PCR)结果表明,Pa HSP90βmRNA主要在香鱼中表达量最高,脾脏次之。镉胁迫后,香鱼肝、脾、肾、鳃和肠组织中Pa HSP90βmRNA表达显著上调;盐度胁迫后,除肠组织外,其他组织中Pa HSP90βmRNA表达总体显著上调。综上,Pa HSP90β与重金属及盐度胁迫密切相关,可能参与鱼类抵抗环境胁迫的生理过程。
- 默立宾李长红陈炯
- 关键词：香鱼镉胁迫盐度胁迫实时荧光定量PCR
- 大蒜X病毒逆转录环介导等温扩增检测方法的建立
- 2013年
- 采用逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立一种便捷、灵敏的大蒜X病毒(Garlic virus X,GarVX)的快速检测方法。根据GarVX ORF4序列的保守区设计6条特异性引物,分别识别该保守区的8个位点,在反转录酶和Bst DNA聚合酶的作用下对靶序列进行扩增反应。通过条件优化,在65℃恒温条件下温浴60 min可成功检测GarVX。特异性检测结果表明,该方法可特异性检出GarVX,对大蒜A病毒(Garlic virus A,GarVA)、大蒜D病毒(Garlic virus D,GarVD)、大蒜E病毒(Garlic virus E,GarVE)等的检测均为阴性,且检测灵敏度高,最低检出限为5 pg·μL-1,是RT-PCR方法的10倍。试验结果表明,RT-LAMP检测方法可快速、特异、灵敏地检测GarVX,并适合现场快速检测。
- 赵桐李长红周前进陈先锋陈炯陈剑平
- 重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法
- 本发明公开了重组人源LECT2蛋白在毕赤酵母中的表达及纯化方法，特点是包括将人工合成的人源LECT2基因插入胞外表达载体pPICZαA中构建重组表达质粒的步骤；酶切线性化后电击导入毕赤酵母X33中，获得重组工程菌株的步骤...
- 陈炯史雨红章瑞程陆新江李长红李明云
- 香鱼半乳糖凝集素3基因的克隆、鉴定和功能初探被引量：1
- 2015年
- 半乳糖凝集素3(galectin-3,Gal3)是凝集素的一类,在哺乳动物非特异性免疫中具有重要作用,但在鱼类中尚未见研究报道。该研究通过香鱼(Plecoglossus altivelis)单核/巨噬细胞转录组测序获得Gal3(Pa Gal3)的c DNA序列,全长2 009个核苷酸,包含一个完整的开放阅读框,推测其编码一个由380个氨基酸组成、相对分子质量为38.28 k Da的蛋白,等电点为4.58,N-末端无信号肽。多重序列比对表明,Pa Gal3具有Galectin(Gal)家族成员典型的结构特征。系统进化树揭示,各物种Gal3的进化关系符合目前广泛认可的动物分类关系,Pa Gal3与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)Gal3紧密成簇,氨基酸序列同源性达77%。实时荧光定量PCR结果表明,鳗弧菌(Vibrio anguillarum)侵染后,香鱼肝、肾、脾等组织和单核/巨噬细胞中Pa Gal3的m RNA表达量显著上调。Western blot结果表明,Pa Gal3存在于香鱼血清中。抗体封闭Pa Gal3后,香鱼单核/巨噬细胞吞噬细菌能力和杀菌活性均显著下降,揭示Pa Gal3可以增强香鱼单核/巨噬细胞功能。综上,Pa Gal3与鱼类免疫紧密相关,可能在香鱼炎症免疫中具有重要作用。
- 赵桐李长红陆新江陈炯
- 关键词：香鱼半乳糖凝集素3杀菌
- 3种海产蟹类血淋巴酶活性的初步研究被引量：5
- 2009年
- 利用API ZYM试剂盒和酶活力测试盒检测了拟穴青蟹、三疣梭子蟹和日本3种海产蟹血淋巴中的19种酶及血清中6种免疫相关酶的活性.结果表明:有5种酶在3种蟹血淋巴中含量较高,有3种酶在3种蟹血淋巴中含量较少或没有.血清中酚氧化酶(PO)和溶菌酶(LZM)活力日本最高,拟穴青蟹最低,拟穴青蟹与其他2种蟹差异显著(p<0.01),三疣梭子蟹和日本之间无明显差异;碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活力拟穴青蟹最高,三疣梭子蟹最低,拟穴青蟹与三疣梭子蟹差异显著(p<0.05),日本与其他2种蟹无明显差异;酸性磷酸酶(ACP)活力在3种海蟹之间无显著差异.
- 赵青松秦方锦李长红金珊
- 关键词：拟穴青蟹三疣梭子蟹血淋巴
