杨宏军
- 作品数：191 被引量：497H指数：11
- 供职机构：山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省农业重大应用技术创新课题更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 奶牛子宫内膜炎致病菌的16S rRNA序列鉴定被引量：11
- 2009年
- 【目的】对奶牛产后子宫内膜炎致病菌进行16S rRNA序列鉴定。【方法】从产后子宫内膜炎患牛子宫分泌物中分离致病菌,通过细菌培养、纯化、分离、革兰氏染色和生化试验进行初步鉴定。选取代表性菌株11株,利用细菌通用引物,通过PCR方法,对其16S rRNA基因的核苷酸序列进行扩增,将扩增产物与pMD19-T载体连接构建克隆载体,经PCR和双酶切鉴定正确后测序,测序结果与GenBank中已注册菌株的16S rRNA基因序列进行比对。【结果】共分离到致病菌株60株,有代表性的11株细菌归类为:SD01为琼氏不动杆菌,SD02为粪肠球菌,SD03为金黄色葡萄球菌,SD04为中间葡萄球菌,SD05为溶血葡萄球菌,SD06为鲁菲不动杆菌,SD07为无乳链球菌,SD08为芽孢杆菌,SD09为枯草芽孢杆菌,SD10为大肠杆菌,SD11为假单胞杆菌。【结论】通过国际公认的16S rRNA序列鉴定技术,准确鉴定出引起奶牛子宫内膜炎的致病菌种类,为临床治疗该病提供了理论依据。
- 张洪波杨宏军何洪彬杨少华王长法高运东仲跻峰葛利江
- 关键词：奶牛子宫内膜炎RRNA
- 牛结核杆菌mpb-83基因的扩增和表达
- 2010年
- 采用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb-83基因,并将其连接到T3克隆载体,然后克隆到原核表达载体PET-32 a中,构建重组质粒PET-32 a-mpb-83。以重组质粒转化大肠杆菌BL21,用NI柱纯化,最后纯化产物在SDS-PAGE中检测。结果得到约664 bp的目的片段,且MPB-83可在大肠杆菌BL21中高效表达。
- 李树春斯肯达尔杨宏军何洪斌王长法杨少华高运东仲跻峰
- 关键词：克隆原核表达
- 奶牛乳腺炎和噬菌体应用研究进展被引量：6
- 2022年
- 本文介绍了我国奶牛乳腺炎发病情况和分类。针对金黄色葡萄球菌导致的奶牛乳腺炎分析其造成的危害和难以治愈的原因。面对畜牧业减少抗生素使用的大环境分析噬菌体作为替代物对奶牛乳腺炎控制的潜力。鉴于噬菌体对金黄色葡萄球菌的良好杀灭效果,其在奶牛养殖和奶制品加工领域有广阔的应用前景。
- 陈九张亮杨少华张雪丽于浩淼杨宏军
- 关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌噬菌体
- 一株牛病毒性腹泻病毒BVDV-SDJN01及其应用
- 本发明涉及一株牛病毒性腹泻病毒BVDV‑SDJN01及其应用，属于牛病毒性腹泻病毒疫苗试剂领域。所述的病毒为牛腹泻病毒BVDV‑SDJN01，于2022年6月30日送至中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号为：CCTCC N...
- 杨少华张亮刘清政陈玖张伟杨宏军
- 流产布氏杆菌BPE123基因的克隆表达及生物信息学分析
- 2015年
- 根据GenBank中流产布氏杆菌BPE123基因序列(登录号:NC_006933.1),设计引物,以布氏杆菌病疫苗菌A19全基因组DNA为模板扩增BPE123基因,将目的基因克隆入pEASY-T3载体,测序正确后,双酶切pEASY-T3-BPE123,目的片段BPE123连入pET-32a(+)表达载体,构建表达质粒pET-32a(+)-BPE123,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;对BPE123基因进行生物信息学分析。结果显示,成功构建了重组菌pET-32a(+)-BPE123-BL21(DE3),诱导表达了融合蛋白BPE123。生物信息学分析显示,BPE123基因N端25个氨基酸是其信号肽,与其相互作用的蛋白大都与菌毛相关,它们是flgF、fliI、motA、BruAb2_0155、BruAb2_0121和BruAb2_0125。布氏杆菌属内BPE123基因序列的同源性高达99%。本研究获得了BPE123蛋白并预测了BPE123基因的相关生物学功能,为进一步探索该蛋白的免疫原性和在布氏杆菌胞内寄生过程中的作用奠定了基础。
- 韦明张亮宫秀燕丁家波刘顺德杨宏军
- 关键词：生物信息学
- 羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒感染PK-15细胞活性和机制探究
- 2024年
- 研究羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)感染PK-15细胞的活性及机制。首先采用水提法提取羊栖菜粗多糖,然后用不同孔径超滤膜将粗多糖分为不同分子量段;通过荧光定量PCR测定不同分子量粗多糖抗SVA活性,采用水提醇沉法将抗SVA活性最高分子量段的粗多糖进行纯化并测定其细胞毒性及抗SVA活性;通过在SVA感染周期不同阶段给药研究纯化多糖的抗SVA机制。结果表明,分子量越大的粗多糖抗SVA活性越强;多糖浓度和SVA浓度均与抗SVA活性呈现量效关系,纯化后的多糖对SVA(MOI=0.1)感染PK-15细胞的治疗指数为412,1 mg/mL的多糖对SVA(MOI=10-1~104)感染PK-15细胞病毒载量的抑制率在90%~99.999%之间;不同给药时间试验结果表明,多糖能在SVA吸附或穿入细胞以及病毒复制过程发挥抗病毒作用,其中抑制SVA吸附或穿入的活性最强。本研究分离纯化得到的羊栖菜多糖有很强的抗SVA活性,可为后续抗SVA药物的研发提供参考。
- 张诗悦张亮张伟张伟杨少华高星熠杨少华李宝国杨宏军
- 关键词：羊栖菜多糖纯化抗病毒
- 驴常见消化道寄生虫流行病学研究被引量：3
- 2018年
- 为了掌握驴消化道寄生虫的流行现状,制订科学的寄生虫病防治措施和策略,试验在规模化养驴场、种驴场及企业屠宰生产车间,采用费勒鹏氏法、离心沉淀法、卢戈氏碘液染色镜检等病原形态学检查方法对寄生虫的种类、感染率、感染强度进行研究。结果表明：消化道寄生虫主要有马圆线虫、毛细线虫、细颈线虫、马副蛔虫、球虫和胃蝇科虫体,其中马圆线虫的感染率高达56.8%;驱虫前寄生虫感染的驴有163头（占74.1%）,虫卵数为132-1 603个,平均感染强度为338个。说明消化道常见寄生虫病感染非常普遍,且多数为混合感染。
- 张伟杨宏军刘玉民程宗佳杨春红王长法
- 关键词：规模化消化道寄生虫流行病学
- 荷斯坦牛中性粒细胞防御素BNBD12基因克隆、原核表达及其抗菌活性分析
- 目的:实现荷斯坦牛中性粒细胞防御素BNBD12基因在大肠杆菌中的高效表达，并分析重组BNBD12的抗菌活性.
方法:RT-PCR扩增荷斯坦牛中性粒细胞BNBD12基因，序列分析后人工合成了适于在大肠杆菌中表达的...
- 武建明何洪彬王长法杨宏军高运东仲跻峰
- 关键词：荷斯坦牛乳腺炎基因克隆原核表达
- 文献传递
- 基因工程蛋白金葡菌 -溶血素的纯化及活性检测
- 目的：分离纯化基因工程重组蛋白金黄色葡萄球菌溶血素并检测其生物学活性，为疫苗研发奠定基础。
方法：对含pET32a+- -HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达，诱导成功之后，将重组菌BL21(DE3)培养物...
- 张海燕马卫明杨宏军王长法何洪彬曹永芝
- 关键词：奶牛乳腺炎溶血素溶血活性基因工程疫苗
- 文献传递
- 一种奶牛用注射器延长装置
- 本发明公开了一种奶牛用注射器延长装置，包括底座、执行部和注射部，所述执行部安装在底座上方，执行部的前端设有注射部；所述底座上设有执行杆安装柱和操纵杆安装柱，所述执行杆安装柱和操纵杆安装柱上端均设有铰接通孔；所述执行部包括...
- 郜玉环杨宏军楚会萌程凯慧解晓莉张亮
- 文献传递
