王俊刚
- 作品数：139 被引量：485H指数：11
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 甘蔗ShPR10基因及其编码蛋白和应用
- 本发明提供了一种甘蔗ShPR10基因及其编码蛋白和应用。本发明首次从甘蔗叶片中克隆获得ShPR10基因的ORF序列，全长570bp，编码一个不稳定亲水蛋白，与玉米ZmPR10蛋白的氨基酸序列相似性高达91.53％，两者在...
- 冯小艳张树珍王文治王俊刚杨本鹏沈林波冯翠莲赵婷婷
- 转Cry2A基因抗虫甘蔗植株的培育被引量：6
- 2020年
- Bt基因具有广谱杀虫性,培育转基因抗虫品种为甘蔗病虫害防治提供了新思路。为了检验Cry2A基因对甘蔗螟虫的防治效果,本研究构建了由玉米Ubi启动子驱动的Cry2A基因高效植物表达载体Cry2A-3300,利用农杆菌介导技术,对甘蔗胚性愈伤组织材料进行遗传转化,经过筛选培养及再生培养共得到46株抗性植株。对抗性植株进行PCR扩增检测,15株呈阳性;进一步利用RT-PCR,表明外源基因Cry2A在转录水平上得到有效表达。室内抗虫鉴定的结果表明Cry2A基因可有效抑制害虫的生长,这将有利于后期进行田间防治。
- 王文治胡天娇杨本鹏王俊刚冯小艳熊国如冯翠莲赵婷婷沈林波林拥军张树珍
- 关键词：甘蔗螟虫
- 一种甘蔗条纹花叶病毒全长cDNA侵染性克隆构建及其应用
- 本发明提供了一种甘蔗条纹花叶病毒全长cDNA侵染性克隆载体及其构建方法和鉴定方法，所述甘蔗条纹花叶病毒全长cDNA侵染性克隆载体命名为土壤杆菌Agrobacterium sp.，于2021年5月31日在中国微生物菌种保藏...
- 王文治沈林波张树珍王俊刚冯小艳冯翠莲赵婷婷
- 无机焦磷酸化酶基因转化甘蔗的遗传研究被引量：9
- 2009年
- 甘蔗是我国最为重要的糖料作物,也是一种重要的能源作物,提高甘蔗的含糖量是甘蔗育种的主要目标。通过农杆菌介导法将无机焦磷酸化酶(PPase)基因导入甘蔗,以期获得提高蔗糖含量的转基因植株。经过PPT抗性筛选获得72株抗性植株,并对其进行PPase基因和bar筛选标记基因的双重PCR检测,其中有13株都呈阳性。结果初步证明无机焦磷酸化酶基因已整合到甘蔗的基因组中。
- 赵丽宏王俊刚杨本鹏张树珍黄东杰蔡文伟
- 关键词：甘蔗
- 甘蔗脱毒健康种苗中单糖转运蛋白基因差异表达分析被引量：3
- 2015年
- 旨在探讨脱毒处理对单糖转运蛋白表达量的影响,分析了3种甘蔗单糖转运蛋白基因SGT1、SGT2和PST2a在健康种苗和常规种苗不同生长时期的表达量差异。结果显示,在苗期和分蘖期甘蔗脱毒健康种苗叶片中SGT1、SGT2和PST2a表达量高于未脱毒种苗;在拔节期和成熟期甘蔗脱毒健康种苗未成熟茎节中SGT1、SGT2和PST2a表达量也高于未脱毒种苗;而在成熟茎节中表达量没有差异。苗期和分蘖期甘蔗叶片以及未成熟茎节中细胞生长分裂旺盛,需要利用大量单糖以提供能源和生物合成的前体物质。结果表明,该3种单糖转运蛋白基因表达量上升可能提供更多单糖用于细胞代谢,促进脱毒健康种苗的快速生长及最终生物量的积累。
- 王俊刚赵婷婷杨本鹏蔡文伟张树珍
- 关键词：甘蔗健康种苗基因表达
- 甘蔗蔗糖转运蛋白ShSUT4基因克隆及表达分析被引量：8
- 2012年
- 采用RACE技术从甘蔗体内克隆出一个新型蔗糖转运蛋白基因,命名为ShSUT4(GenBank登录号为GQ485583.1),预测其编码501个氨基酸,存在GPH(蔗糖/H+共转运体)超家族保守结构域,具有12跨膜结构。初步研究结果表明,ShSUT4在甘蔗根茎叶中均有表达;且在9个不同甘蔗品种成熟茎中表达量存在差异,在其中8个品种中ShSUT4表达量的高低与所测茎节中锤度高低呈正相关性,推测ShSUT4可能参与调控甘蔗体内蔗糖的积累。
- 赵婷婷王俊刚冯翠莲蔡文伟王文治熊国如伍苏然杨本鹏张树珍
- 关键词：甘蔗蔗糖转运蛋白
- 甘蔗EST-SSR标记的开发和多样性分析被引量：2
- 2012年
- 运用生物信息学分析方法对甘蔗(Saccharum spp.)的282 809条表达序列标签(ESTs)进行分析,共获得Unigene 138 590条,发掘出分布于10 086条Unigene的10 505个微卫星(EST-SSR)位点,SSR发生频率为7.26%,平均9.22 kb出现1个SSR。在7个杂交甘蔗品种中,三核苷酸基元的SSR数量最多(74.95个/Mb),其次为二核苷酸基元的SSR(22.95个/Mb),二者占总数的90.27%。以CCG/CGG、AG/CT为重复基元的SSR是最常见的EST-SSR类型,富含G/C的EST-SSR占据极明显的优势。与拟南芥和水稻cDNA序列内SSR的比较表明,富含G/C的SSR可能是禾本科植物SSR的一个共同特点。研究发现,SSR在EST与基因组序列之间以及在不同甘蔗品种之间的分布存在差别,具有丰富的多样性。此外,从EST数据分析获得杂交甘蔗品种的16个保守基因,从中发掘了9个SSR位点。最后,利用Primer3和e-PCR软件设计了一批具有物种特异性和通用性的EST-SSR PCR引物,相关数据可以通过http://59.50.66.49/SSR/sugarcane/sugarcane.EST-SSR.tgz链接从因特网下载。该研究结果可为开展甘蔗遗传多样性分析、种质资源鉴定和分子辅助育种提供参考。
- 黄启星张雨良王俊刚伍苏然张树珍郭安平
- 关键词：甘蔗ESTSSR微卫星
- 甘蔗液泡膜二羧酸转运蛋白基因ScTDT克隆与表达分析被引量：1
- 2021年
- 【目的】克隆甘蔗液泡膜二羧酸转运蛋白基因(ScTDT),并分析其在甘蔗不同组织及在铝胁迫下的表达模式,为深入研究该基因功能及抵抗铝胁迫的分子机制提供理论依据。【方法】利用同源克隆技术从甘蔗品种ROC22中克隆ScTDT基因,利用生物信息学软件进行序列分析,采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在甘蔗不同组织(根、茎和叶)及在铝胁迫(0、10和20μmol/L Al^(3+))下的表达水平。【结果】克隆获得的ScTDT基因,开放阅读框(ORF)全长1623 bp,编码540个氨基酸残基,蛋白相对分子量57.34 kD,理论等电点(pI)5.77,为不稳定的疏水蛋白,可能定位于质膜、液泡和/或高尔基体,其氨基酸序列与高粱(XP_002460443.1)、水稻(XP_015612609.1)和玉米(PWZ04635.1)的TDT氨基酸序列具有高度相似性,其中与高粱的TDT氨基酸序列相似性最高,达96.30%,说明ScTDT与高粱TDT的亲缘关系最近。ScTDT基因在甘蔗根、茎和叶中均有表达,但根中表达量显著高于茎和叶(P<0.05,下同)。在铝胁迫处理下,3个甘蔗品种(ROC22、柳城05-136和中糖1202)的根中ScTDT基因表达量较对照组(0μmol/L Al^(3+))均显著升高,尤其是柳城05-136和中糖1202随着营养液中Al^(3+)浓度增加,ScTDT基因的表达量呈显著升高趋势,说明高浓度Al^(3+)胁迫更能诱导ScTDT基因高效表达。3个甘蔗品种中,以中糖1202的ScTDT基因表达量变化最大,柳城05-136次之,以ROC22的变化最小。【结论】克隆获得的ScTDT基因表达具有组织特异性,在根中高效表达可能与甘蔗抵抗铝胁迫相关,即植株通过上调根中ScTDT基因表达,从而加快液泡中苹果酸的释放,促使苹果酸从根中分泌到土壤与Al^(3+)反应,从而减少铝毒害,表明ScTDT基因可能参与甘蔗抵抗铝胁迫,且不同甘蔗品种的抗铝胁迫能力有所不同。
- 冯小艳王俊刚赵婷婷彭李顺王文治冯翠莲沈林波张树珍
- 关键词：甘蔗铝胁迫
- 甘蔗蔗糖转运蛋白ShSUT3及其编码基因的应用
- 本发明公开了一种甘蔗蔗糖转运蛋白ShSUT3及其编码基因的应用。该蛋白，具有下述氨基酸残基序列之一：1）序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸残基序列；2）将序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸残基序列经过一个或几...
- 王俊刚赵婷婷张树珍杨本鹏冯翠莲王文治伍苏然
- 文献传递
- 高效快速甘蔗转基因方法探索被引量：6
- 2012年
- 甘蔗遗传背景复杂,转基因技术是甘蔗品种遗传改良的重要途径。甘蔗转基因遗传改良主要是通过基因枪法和农杆菌介导法来实现,但目前我国的甘蔗转基因技术,普遍存在转基因效率偏低,获得的转基因株系偏少,难以筛选到目的基因稳定表达、有利用价值的转基因株系等问题。本实验室通过多年的经验积累,建立了一种高效快速的农杆菌介导法的甘蔗转基因方法。转化效率为20%,筛选效率达到90%,转化时间为4个月,操作简单,成本较低。
- 王文治杨志坚杨本鹏熊国如蔡文伟冯翠莲王俊刚伍苏然张树珍
- 关键词：甘蔗农杆菌介导法GUSCFP
