王华菁
- 作品数：39 被引量：113H指数：6
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市博士后基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B的功能表位、与其特异性结合的单克隆抗体及其应用
- 本发明属于生物技术领域，更具体地，本发明公开金黄色葡萄球菌肠毒B的功能表位<Sup>195</Sup>SFWYDMMP<Sup>202</Sup>、<Sup>12</Sup>HKSSKFTGL<Sup>20</Sup>、...
- 郭亚军戴建新王华菁
- 文献传递
- 肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞的凋亡被引量：7
- 2001年
- 目的 :研究肝癌细胞表面 Fas/ Fas L系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。 方法 :采用流式细胞术和RT- PCR检测肝癌细胞株 Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas和 Fas L的表达 ;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞 Fas L表达及 Fas L表达上调后的肝癌细胞触发淋巴细胞株 Jurkat细胞凋亡的作用。结果 :Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5肝癌细胞株Fas表达均阴性 ;Hep G2 Fas L m RNA的表达为阴性 ,而 Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas L m RNA的表达均阳性。经争光霉素(0 .6 mg/ m l)诱导后 ,上述肝癌细胞 Fas的表达无明显变化 ,而其 Fas L的表达却增加 ,与 Jurkat细胞混合孵育则触发后者发生显著性凋亡。结论 :肝癌细胞可能一方面降低或不表达 Fas而对 Fas介导的凋亡耐受 ,另一方面又增强自身 Fas L的表达以诱发与之接触的 T淋巴细胞凋亡 ,在完成免疫逃避的同时 ,可对周围的
- 梁云陆斌李晓冬王华菁崔贞福李博华胡慧红杨扬郭亚军刘彦君
- 关键词：肝肿瘤T淋巴细胞FAS/FASL系统
- 靶向VEGF双特异性抗体及其用途
- 本发明在Bevacizumab及全人源单克隆抗体B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>基础上构建一个针对VEGF两个表位的双特异性抗体Bev‑B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>BsAb，实...
- 李博华汪超孟艳春王华菁杨扬
- 文献传递
- 抗CD3人源化抗体恒定区突变体的制备及其生物学活性被引量：1
- 2004年
- 为了降低抗CD3人源化抗体hu12F6对T细胞的激活作用以克服首剂效应 ,构建了恒定区特定位点突变的hu12F6重链表达载体 ,将其与hu12F6的轻链表达载体共转染CHO细胞 .ELISA和RT PCR证实 ,恒定区特定位点突变的人源化抗体hu12F6m在CHO细胞中获得了表达 .竞争抑制实验证实hu12F6m具有与原鼠源抗体及hu12F6相似的特异性和亲和力 .增殖实验表明hu12F6m对T细胞的刺激作用明显弱于hu12F6 .实验结果为深入探讨hu12F6m的生物学特性奠定了基础 .
- 李博华王皓杨扬陆斌王华菁张大鹏钱卫珠季军捷李晓东郭亚军
- 关键词：CD3人源化抗体定点突变首剂效应
- 内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用被引量：2
- 1996年
- 目的：研究内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用。方法：采用地高辛标记探针原位杂交的方法，检测了正常肝脏、肝癌组织及癌旁肝组织中内皮细胞选择素（Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ）及其配体合成的关键酶岩藻糖转移酶（Ｆｕｃ－Ｔ）的转录水平。结果：Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ的转录只局限于内皮细胞，且在肝癌及正常肝组织之间没有差别；但Ｆｕｃ－Ｔ的转录水平在肝癌与正常肝组织之间差别明显，表现为多发肝癌中子瘤的水平明显高于母瘤，母瘤明显高于单发肝癌，单发肝癌明显高于癌旁组织，而癌旁组织又明显高于正常肝组织。结论：Ｅ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ与其配体的相互粘附，在肝癌的转移中起了重要作用。
- 谢天培吴孟超顾天爵范俊刘彦君王皓王华菁郭亚军
- 关键词：肿瘤转移岩藻糖转移酶肝肿瘤
- 激活型人源化抗人CD137单克隆抗体的研制与生物学活性鉴定
- 2018年
- 目的制备鼠抗人CD137抗体,并对该抗体进行人源化改造。方法构建h CD137-p CDNA3.4真核表达质粒,经293F细胞表达纯化及鉴定后,获得CD137蛋白。制备p HAGE-CMV-MCS-IRES-Zs Green-h CD137的慢病毒,感染HEK-293FT细胞,获得用来筛选杂交瘤的CD137转基因细胞株。将CD137蛋白免疫小鼠,检测小鼠血清抗体效价,将免疫小鼠的脾脏和骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用ELISA方法及流式细胞术对小鼠杂交瘤进行筛选。将筛选后的杂交瘤细胞接种小鼠,获得腹水。对抗体亚型和抗体效价进行测定,并通过竞争结合抑制实验等方法对所获的CD137单抗的生物学特性进行分析鉴定。提取该m Ab杂交瘤细胞株的总RNA逆转录成c DNA,进行鼠抗人CD137抗体可变区序列克隆,构建人源化抗体重链和轻链表达载体,瞬时转染HEK-293FT,检测分析各重组人源化抗体与抗原的亲和力。结果获得1株CD137单抗(6F5),该抗体与CD137L有竞争作用。蛋白结合表位在A.A 30-100。6F5能够激活NF-κB信号通路,对外周血单个核细胞增殖具有显著促进作用,且人源化后抗体的亲和力不变。结论成功制备1株CD137人源化抗体,该人源化抗体为下一步开展体内肿瘤治疗奠定了基础。
- 何妍王华菁王华菁徐依云黄勇杨焕凤
- 关键词：CD137单克隆抗体T细胞激活
- TRAIL及其5种受体DNA片段的扩增与序列分析
- 2005年
- 目的制备TRAIL及其5种受体的特异性基因探针。方法以PHA刺激人外周血淋巴细胞(PBL)增殖,从而诱导TRAIL及其受体的mRNA转录水平提高,然后用RTPCR方法扩增出TRAIL及其5种受体的DNA基因片段,并采用基因测序法确证所得基因片段序列的正确性。结果获得了TRAIL及其5种受体的DNA基因片段。结论所用方法正确,为研究TRAIL及其受体调控细胞凋亡的机制提供了有价值的工具。
- 季军捷王华菁黑振宇彭玲王皓李晓冬时玉舫郭亚军
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体植物血凝素凋亡反转录聚合酶链反应
- 肝细胞癌变时神经节苷脂对转铁蛋白受体介导的内吞作用的影响
- 1997年
- 目的：研究肝细胞癌变时神经节苷脂ＧＭ３和ＧＤ３的变化对转铁蛋白受体介导的内吞作用的影响及其在促进肝癌生长中所起的作用。方法：采用放射性核素标记配体受体结合法，及洗脱法测定转铁蛋白与其受体的结合以及转铁蛋白受体介导的内吞作用；用ＭＴＴ比色法测定细胞生长情况。结果：（１）ＧＭ３抑制肝癌细胞的生长，ＧＤ３则促进肝癌细胞的生长；（２）这种影响与转铁蛋白对细胞的作用直接相关；（３）此相关作用不是通过影响转铁蛋白与其受体的结合，而是通过影响转铁蛋白受体介导的内吞作用而实现的。结论：肝细胞癌变时神经节苷脂组成的变化能明显加快转铁蛋白受体介导的内吞作用，增加肝癌细胞对转铁蛋白的摄取，从而促进肝癌细胞的生长与增殖。
- 谢天培钱宝华沈锋沈锋施乐华王皓王皓刘彦君吴孟超王华菁
- 关键词：肝细胞癌变神经节苷脂TF受体介导
- 针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体及其用途
- 本发明提供了一种针对乙肝表面抗原蛋白的双特异性抗体A<Sub>3</Sub>B<Sub>5</Sub>-BsAb，该双特异性抗体由抗体A<Sub>3</Sub>D<Sub>5</Sub>以及抗体B<Sub>5</Sub>...
- 李博华孟艳春王华菁杨扬于晓杰
- 抗金黄色葡萄球菌肠毒素B保护性中和单克隆抗体的筛选及鉴定
- 2010年
- 金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)属于热毒素超抗原家族。它通过激活T细胞,使T细胞大量增殖并释放大量炎症细胞因子,从而导致中毒性休克综合征及死亡。为了筛选获得抗SEB的中和保护性单克隆抗体,我们首先克隆了SEB基因,表达纯化获得GST-SEB融合蛋白;将之免疫BALB/c小鼠后,利用杂交瘤技术结合ELISA检测,筛选获得10株抗SEB单克隆抗体杂交瘤细胞株;ELISA和Western blot鉴定其分泌的抗体能与SEB特异结合;抗体亚型检测均为IgG1/k;体外实验证实,10株抗体中有6株(1A5、4A3、3E2、3C1、1D1、2G9)能够有效阻断SEB诱导的人外周血单核细胞(PBMC)的激活,具有中和保护作用。本研究为进一步获得抗SEB的人源化单克隆中和性抗体奠定了基础。
- 康延申王华菁杨海鸥谈文龙张波魏于全戴建新
- 关键词：单克隆抗体金黄色葡萄球菌肠毒素B
