王大鹏
- 作品数:10 被引量:10H指数:2
- 供职机构:中国医科大学更多>>
- 发文基金:辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 内质网分子伴侣与脑发育的关系
- 胚胎时期是多细胞生物个体发育过程中的一个重要阶段,这一时期的胚胎易受不利因素的影响。应激反应是生物体对抗外界不利环境因素的一种重要的保护性反应,在这个反应过程中细胞内产生的热休克蛋白具有抵御损伤,保护细胞的作用。因此有关...
- 李波王大鹏陈誉华
- 关键词:内质网脑发育
- 文献传递
- 人工椎间盘置换术治疗颈椎间盘退变疗效观察被引量:2
- 2009年
- 目的观察人工椎间盘置换术治疗颈椎椎间盘退变的疗效。方法对20例颈椎间盘退变患者行人工椎间盘置换术。结果术后随访2~20个月,症状均改善,术后神经功能评分(JOA评分)为(15.7±0.75)分,与术前的(8.4±1.68)分相比,P〈0.05,假体周围骨桥形成2例。结论人工椎间盘置换术治疗颈椎间盘退变疗效满意。
- 王大鹏付勤陈洪亮马兆吉杨礼庆
- 关键词:人工椎间盘置换术椎间盘退变颈椎
- SOX-9和胰岛素样生长因子1共同转染大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化被引量:1
- 2009年
- 背景:单基因诱导虽能对骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化产生积极影响,但作用有限,多种基因共同作用才符合机体真实内环境的需求,并有助于发挥多基因产物之间的协同作用,提高分化效果。目的:验证应用SOX-9和胰岛素样生长因子1基因转染大鼠骨髓间充质干细胞后,目的基因分泌情况及向软骨细胞的分化效果。设计、时间及地点:两样本观察,实验于2008-04/2009-02在中国医科大学细胞生物实验室完成。对象:6周龄健康雄性Wistar大鼠2只用于骨髓间充质干细胞提取。方法:扩增、提取质粒pcDNA3.1-IGF-1、pcDNA3.1-SOX-9。分离、纯化Wistar大鼠骨髓间充质干细胞。按转染情况分为5组:①未转染组:仅加入双无(无血清无双抗)L-DMEM。②转染空载体组:双无L-DMEM+pcDNA3.1空载体和脂质体。③转染SOX-9组:双无L-DMEM+pcDNA3.1-SOX-9质粒和脂质体。④转染胰岛素样生长因子1组:双无L-DMEM分别+pcDNA3.1-IGF-1质粒和脂质体。⑤共转染组:双无L-DMEM分别+pcDNA3.1-IGF-1、pcDNA3.1-SOX-9质粒和脂质体,混合。主要观察指标:对转染后细胞进行筛选,MTT法测定筛选后细胞的增殖活性,反转录-聚合酶链反应和Western blot法检测筛选后细胞目的基因和蛋白的表达。结果:MTT法检测转染SOX-9组、转染胰岛素样生长因子1组和共转染组骨髓间充质干细胞增殖活性A值显著高于未转染组、转染空载体组(P<001)。反转录-聚合酶链反应和Western blot检测目结果显示,SOX-9表达以转染SOX-9组最多;胰岛素样生长因子1表达以共转染组最多;软骨细胞特异性基质Ⅱ型胶原表达以共转染组最多。结论:双基因转染在诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞转化的能力和细胞外基质分泌的能力上更明显高于单基质转染;另外结果间接说明胰岛素样生长因子1具有诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的作用,但能力弱于SOX-9。
- 王广斌陈洪亮王大鹏付勤
- 关键词:软骨间质干细胞基因转染胰岛素样生长因子1
- 负载SOX-9的大鼠脂肪干细胞成软骨分化的实验研究被引量:1
- 2009年
- 目的SOX-9基因转染大鼠的ADSCs(Adipose stromal cells,ADSCs),诱导其向软骨细胞分化,为软骨组织工程学种子细胞提供新方法。方法分离、培养大鼠的ADSCs,免疫荧光法进行鉴定;SOX-9基因转染ADSCs,对转染后细胞进行筛选;MTT法测定筛选后细胞的增殖活性;RT-PCR、Western blot对筛选后细胞的表达进行检测。结果成功分离、培养大鼠的ADSCs;细胞表面标志物CD29和CD44表达阳性,CD106和CD34表达阴性;基因转染后细胞的增殖力变强;转染SOX-9的ADSCs在目的基因SOX9、Aggrecan、CollagenⅡmRNA的表达和软骨特异性基质-CollagenⅡ的分泌上明显高于转染空载体组和对照组;结论SOX-9基因转染后ADSCs具有了软骨细胞的表型特征,可以用作软骨组织工程的种子细胞。
- 田野王大鹏陈洪亮付勤
- 关键词:脂肪干细胞基因转染分化
- 人工椎间盘置换术治疗颈椎间盘退变疗效观察
- 目的:
报告20例颈椎人工椎间盘置换术治疗椎间盘退变引起的颈椎病疗效。
方法:
本文为回顾性研究。对2004年9月至2009年4月我院收治的20例单节段及多节段以椎间盘退变引起的颈椎病患者行颈椎人工椎间...
- 王大鹏
- 关键词:人工椎间盘置换术颈椎间盘退变神经功能评分
- 文献传递
- miRNA-506-3p通过SPHK1影响人骨肉瘤细胞上皮间质转化和自噬的研究
- 目的:骨肉瘤是青少年常见的骨恶性肿瘤,在过去的很长一段时间里其治疗效果并未得到改善,部分病人会伴有肿瘤的转移,将会影响肿瘤患者的治疗,因此对于骨肉瘤转移相关蛋白的机制研究,有望为治疗骨肉瘤提供新方向以及新的治疗靶点。通过...
- 王大鹏
- 关键词:骨肉瘤上皮间质转化自噬
- 文献传递
- VEGF及其受体FLK-1在人脑微血管内皮细胞UPR过程中的表达
- 神经系统疾病的发生与血脑屏障的功能密切相关,因此研究人血脑屏障的基本组成成分脑微血管内皮细胞(HBMEC)的功能有助于了解血脑屏障的稳定性调节机制,从而为认识某些神经系统疾病的发病机制积累科学资料。血管内皮细胞生长因子(...
- 王大鹏李波陈誉华
- 关键词:人脑微血管内皮细胞血管内皮细胞生长因子未折叠蛋白反应
- 文献传递
- SOX-9和转化生长因子-β1共同诱导大鼠脂肪干细胞向软骨细胞分化被引量:4
- 2009年
- 目的探讨应用SOX-9和TGF-β1基因转染大鼠ADSCs(Adipose stromal cells,ADSCs)后,目的基因分泌情况及向软骨细胞的分化效果,为构建新型的组织工程软骨种子细胞提供思路。方法6周龄健康雄性Wistar大鼠2只,体重约150g。扩增、提取质粒pcDNA3.1-TGF-β1、pcDNA3.1-SOX-9。分离、纯化Wistar大鼠ADSCs,倒置相差显微镜观察原代和传代ADSCs形态学改变,免疫荧光法检测细胞表面标志。将SOX-9和TGF-β1基因单独或共转染第3代ADSCs,按转染情况分为5组:对照组、转染空载体组、转染SOX-9组、转染TGF-β1组、SOX-9与TGF-β1共转染组。对转染后细胞进行筛选,MTT法测定筛选后细胞的增殖活性,RT-PCR和Westernblot法检测筛选后细胞的表达。结果免疫荧光法检测ADSCs的CD29、CD44呈阳性反应,CD34、CD106呈阴性反应。MTT法测定各组细胞在490nm波长处的吸光度(A)值,未转染组、空载体组与SOX-9组、TGF-β1组、SOX-9与TGF-β1共转染组间差异显著(P<0.01)。RT-PCR和Western blot检测目的基因和蛋白的表达量,SOX-9表达以转染SOX-9组最多;TGF-β1表达以SOX-9与TGF-β1共转染组组最多;II型胶原表达以SOX-9与TGF-β1共转染组最多。结论SOX-9和TGF-β1基因共同转染ADSCs修复软骨缺损是一个较有前景的发展方向,对组织工程软骨应用于临床具有重要意义。
- 贺明陈洪亮王大鹏付勤
- 关键词:软骨组织工程ADSCS
- Sox-9和igf-1共同诱导大鼠脂肪干细胞向软骨细胞分化的实验研究
- 2009年
- 目的探讨应用Sox-9和igf-1基因转染大鼠脂肪干细胞(ADSCs)后,目的基因和蛋白分泌情况及向软骨细胞的分化效果。方法扩增、提取质粒pcDNA3.1-igf-1、pcDNA3.1-Sox-9,分离、纯化Wistar大鼠ADSCs,将Sox-9和igf-1基因单独或共转染第3代ADSCs,按转染情况分为5组:未转染组(A组)、转染空载体组(B组)、转染Sox-9组(C组)、转染igf-1组(D组)、Sox-9与igf-1共转染组(E组)。对转染后细胞进行筛选,MTT法测定筛选后细胞的增殖活性,RT-PCR和Western blot法检测筛选后细胞的表达。结果MTT法测定A、B、C、D、E组细胞在490 nm波长处的吸光度(A)值,A、B组与C、D、E组间差异均有统计学意义(P<0.01),但A、B组以及C、D、E组间差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR和Western blot检测目的基因和蛋白的表达量,Sox-9表达以C组最多;igf-1表达以E组最多;II型胶原表达以E组最多。结论通过Sox-9和igf-1基因共同转染ADSCs修复软骨缺损是一个较有前景的发展方向。
- 沈涛王大鹏陈洪亮付勤
- 关键词:软骨组织工程脂肪干细胞IGF-1基因
- 全髋关节置换术后迟发性感染的诊断和手术治疗被引量:2
- 2009年
- 王大鹏付勤柳达杨礼庆
- 关键词:全髋关节置换术迟发性感染早期诊断率手术治疗发生率