王立洪
- 作品数：10 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞酸碱内环境对低氧诱导的白血病细胞分化的影响及相关机制研究
- ＜正＞目的:探订钠氢交换蛋白1（NHE1）对低氧诱导的慢性粒细胞白血病细胞系K562分化的影响并研究其相关机制。方法:利用低氧模拟物CoCl2处理慢性粒细胞白血病细胞系K562或于低氧（2%O2、5%CO2、93%N2）...
- 王建马丽张洪菊金薇娜蔺亚妮常国强王立洪李华文庞天翔
- 文献传递
- NGAL对K562细胞内Rh123累积的影响
- 通过下调中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)的表达,研究其对白血病细胞系K562细胞内荧光染料罗丹明(Rh123)累积的影响,探讨...
- 张洪菊马丽李庆华庞天翔王立洪李华文蔺亚妮金薇娜高伟常国强王建张玉娟
- 关键词：K562细胞多药耐药性中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白
- 文献传递
- EF-hand对钙调磷酸酶B同源蛋白2的生物学功能影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋白1(NHE1)共转染PS120细胞;采用激光共聚焦显微镜、膜滤过法、免疫共沉淀等手段,明确CHP2结合Ca2+的数量、部位,以及对CHP2与NHE1结合的影响;在血清饥饿条件下,观察表达EF-hand突变的CHP2(NHE1/CHP2-EF3m/4m)对细胞生存的影响。结果分别突变EF-hand结构EF3或EF4,CHP2结合Ca2+减少;同时突变EF3和EF4,CHP2不能结合Ca2+;免疫共沉淀实验结果显示乙二胺四乙酸(EDTA)剥夺CHP2携带的Ca2+之后,CHP2与NHE1结合的数量明显减少;不携带Ca2+的CHP2在细胞内与NHE1结合的数量也明显减少;在血清饥饿条件下,表达不携带Ca2+的CHP2的细胞存活数量减少。结论 CHP2能结合2个Ca2+,结合部位在EF3和EF4;携带Ca2+能增强CHP2与NHE1的结合能力;在血清饥饿条件下,携带Ca2+的CHP2能提升细胞抵抗死亡的能力。
- 张洪菊李庆华王立洪蔺亚妮常国强庞天翔
- 关键词：EF-HANDCA2+
- 肿瘤标志物中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)与钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)的生物学功能研究
- 背景:乳腺癌是威胁女性生存的主要肿瘤之一。NGAL为lipocalin蛋白家族的新成员,具有典型的β折叠桶状保守结构,是一种25kD的分泌型糖蛋白。因其结合配体的多样性,NGL在诸如细胞生长、分化、肿瘤迁移与侵袭以及EM...
- 王立洪
- 关键词：乳腺肿瘤肿瘤标志物生物学功能
- CD44单克隆抗体A3D8通过抑制ERK1/2上调Bim诱导HL-60细胞早期凋亡被引量：1
- 2011年
- CD44单克隆抗体A3D8可抑制急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞的增殖抑制,并诱导其早期凋亡。本研究探讨在此过程中ERK以及BCL-2家族成员的作用机制,为治疗白血病提供新方法和新的药物靶点。用MTT法检测A3D8对HL-60细胞的增殖抑制效应,用流式细胞术检测A3D8对HL-60细胞线粒体膜电位的变化,用实时定量PCR技术检测BIMmRNA表达的变化;用Western blot检测A3D8处理后磷酸化ERK-1/2的表达变化。结果表明:A3D8能显著抑制HL-60细胞的增殖,抑制效率呈现剂量和时间的量效关系,并可进一步诱导HL-60细胞的早期凋亡,而BCL-2家族成员Bim的表达水平也随时间和浓度的变化而改变,磷酸化ERK-1/2的表达水平明显降低。结论 :CD44单克隆抗体A3D8可通过降低磷酸化ERK-1/2的表达来调节Bim,从而诱导HL-60细胞的增殖抑制和早期凋亡。
- 常国强王建高伟王若君王立洪金薇娜蔺亚妮李华文庞天翔
- 关键词：HL-60细胞P-ERKBIM
- 氯化锂抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的机制研究
- 2011年
- 目的:探讨LiCl对乳腺癌细胞系MDA-MB-231侵袭能力的影响,及其对侵袭关键因子NGAL表达的调控。方法:LiCI处理后,MTT测定细胞活力,光镜观察细胞伪足形成;Transwell观察细胞侵袭能力的变化;实时定量PCR及Western blotting观察NGAL在转录和翻译水平的表达;使用小分子药物Bay117082(NF-KB通路抑制剂)和FH535(Wnt/β-catenin通路抑制剂)处理细胞,检测关键通路对NGAL表达的调控。结果:在浓度低于10mmol/L时,LiCl对细胞活性的影响无显著性差异。5mmol/L或10mmol/LLiCl处理细胞24 h后,细胞形态发生明显改变,其伪足形成受到影响,但在NHEl抑制剂Cariporide作用下,细胞伪足破坏的情况有所减轻;Transwell结果显示5、10mmol/L LiCl分别处理细胞24 h后,细胞的侵袭能力受到明显抑制。实时定量PCR和Western blotting结果显示,LiCl处理后NGALmRNA和蛋白表达均明显下降,表明LiCl对NGAL的调控可能始于转录水平。小分子药物处理分别使Wnt/β-catenin和NF-kB信号通路抑制后,NGAL的表达均受到明显抑制,表明这两条通路都参与了NGAL表达的调控。结论:LiCl通过抑制NF-kB调控NGAL的表达,抑制伪足形成以及细胞侵袭。
- 王立洪李庆华王建高伟蔺亚妮李华文金薇娜常国强庞天翔
- 关键词：氯化锂乳腺癌MDA-MB-231细胞中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白
- 钙调磷酸酶B同源蛋白2核定位对宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)在细胞核内定位对人宫颈癌HeLa细胞增殖能力的影响。方法将CHP2核输出信号序列(NES)突变,转染HeLa细胞,从而使CHP2定位在细胞核内,采用MTT法检测HeLa细胞的细胞活力的改变;利用软琼脂集落形成实验观察HeLa细胞集落形成大小和数量的变化;通过体内实验观察HeLa细胞在小鼠体内的成瘤能力。结果荧光共聚焦显微镜显示突变型CHP2(CHP2-NESm)主要定位在HeLa细胞的细胞核内和细胞质,而野生型的CHP2主要定位于细胞质;MTT法结果表明转染CHP2-NESm的HeLa细胞的活力显著强于转染野生型CHP2和空载体的细胞;软琼脂集落形成实验结果表明,转染CHP2-NESm的HeLa细胞的集落数量和集落大小均明显大于转染野生型CHP2和空载体的细胞(P<0.05);体内实验结果显示,转染CHP2-NESm的HeLa细胞较转染野生型CHP2的细胞的成瘤能力增强(P<0.05)。结论 CHP2细胞核内的定位对调控HeLa细胞的增殖能力发挥重要的作用。
- 蔺亚妮李庆华王立洪常国强庞天翔
- 关键词：核定位信号细胞增殖
- H23.中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白对K562细胞药物累积的促进作用
- 张洪菊王建王立洪常国强张玉娟马丽蔺亚妮李庆华庞天翔
- 文献传递
- Cariporide对宫颈癌HeLa细胞体外转移及MT1-MMP表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:通过体外实验研究钠氢交换蛋白1(NHE1)特异性抑制剂Cariporide对人宫颈癌HeLa细胞体外转移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:用Cariporide处理HeLa细胞,采用细胞-基质粘附实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测Cariporide对HeLa细胞的粘附、迁移和侵袭能力的影响:Real-time RT-PCR、Western blot法分别检测Cariporide对HeLa细胞膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)mRNA及蛋白表达的影响结果:细胞-基质粘附实验结果显示,与对照组相比,Cariporide处理过的HeLa细胞体外粘附率降低25%,差异具有统计学意义(P<0.05);细胞划痕实验和Transwell侵袭实验结果显示,Cariporide处理后,HeLa细胞损伤愈合的速度和穿过滤膜的细胞数量均明显少于对照组;Real-time RT-PCR及Western blot结果表明Cariporide可显著降低MT1-MMPmRNA和蛋白水平的表达量(P均<0.05)。结论:Catiporide可有效抑制人宫颈癌HeLa细胞的体外转移能力,其作用机制可能与降低MT1-MMP的表达有关。
- 蔺亚妮王建常国强金薇娜王立洪李华文李庆华庞天翔
- 关键词：膜型基质金属蛋白酶1迁移
