薛乐勋
- 作品数：234 被引量：836H指数：14
- 供职机构：郑州大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学天文地球更多>>
- PTEN表达载体的构建及转染食管鳞癌细胞系EC9706
- 2007年
- 目的筛选稳定表达野生型PTEN基因的食管鳞癌细胞株EC9706。方法提取胎盘总RNA,设计引物,PCR扩增人野生型PTEN基因,经测序鉴定后,连接于pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建pcDNA3.1-PTEN,用脂质体介导的方法将其转染EC9706。而后加抗生素G418筛选稳定表达株,用RT-PCR方法检测稳定表达株PTEN基因的mRNA水平,通过绘制生长曲线观察细胞生长情况。结果PCR产物的电泳结果显示,在1500bp左右有一明显亮带,测序结果与GenBank上PTEN序列完全一致;稳定表达PTEN基因的细胞株RT-PCR结果显示,PTEN的mRNA水平比对照细胞株相比明显升高;生长曲线结果显示,转染后的细胞生长速度明显减慢。结论所扩基因为野生型PTEN基因,所构建的载体为野生型PTEN基因真核表达载体,并筛选出PTEN基因稳定表达的食管鳞癌细胞株。
- 侯桂琴鲁照明薛乐勋田芳范天黎刘兰琦许培荣
- 关键词：PTEN食管鳞癌MTOR转染
- 转基因盐藻制备口服型禽流感疫苗的方法
- 本发明公开了一种转基因盐藻制备口服型禽流感疫苗的方法，尤其是将盐藻自身的调控元件引入并构建含有禽流感病毒HA、NA重组基因的双元表达载体，然后转化盐藻，经筛选和鉴定，确定高表达重组C3d-H5N1融合蛋白的盐藻转化藻株。...
- 薛乐勋潘卫东李杰吕玉民侯桂琴
- 文献传递
- 化学发光免疫分析在肿瘤标志物检测中的应用被引量：10
- 2004年
- 简要介绍了肿瘤标志物的一般概念及化学发光免疫分析的原理,综述了近年来化学发光免疫分析在主要的肿瘤标志物检测中的应用进展,并对化学发光免疫分析研究肿瘤标志物今后的发展提出展望。
- 郭玉华屈凌波吴拥军薛乐勋
- 关键词：化学发光免疫分析肿瘤标志物
- NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中的激活被引量：16
- 2006年
- 目的核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究拟通过检测NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中是否存在,分析NF-κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其对食管鳞癌细胞的生存及转化作用。方法采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞系中NF-κB亚单位p50和p65,阻遏物IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白表达。并采用EMSA法检测两株食管鳞癌细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果食管鳞癌细胞中存在激活的NF-κB信号通路,p50、p65、IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白在细胞质中均表达,并且p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。结论本研究发现NF-κB信号通路在两种食管鳞癌细胞系被激活,提示激活的NF-κB信号通路可能在食管鳞癌发生中起重要作用。
- 田芳许培荣侯卫红刘红涛陈奎生薛乐勋
- 关键词：食管癌NF-KB信号传导通路
- 针刺足三里对家兔下食管括约肌的影响
- 1991年
- 下食管括约肌(LES)最重要的功能是阻止胃内容物反流入食管中。针刺足三里穴对人和动物的胃运动的调节作用已有报道,但针刺该穴对LES有无作用,未见文献报道。本工作观察针刺家兔足三里穴对LES的影响,为探讨针刺治疗反流性食管炎的原理,提供动物实验资料。
- 薛乐勋徐霞王建人洪素兰
- 关键词：针刺疗法足三里穴下食管括约肌
- 小鼠canstatin cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2004年
- 目的 :从小鼠肝脏组织克隆canstatincDNA并在大肠杆菌 (E .coli)中表达 ,为进一步研究其抗肿瘤血管生成活性奠定基础。方法 :用Trizol试剂提取小鼠肝脏组织总RNA ,通过RT -PCR扩增小鼠canstatin(mcanstatin)的cDNA ,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析。将小鼠canstatincDNA定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中 ,在大肠杆菌E .coliBL2 1中经IPTG诱导表达。结果 :小鼠canstatin的cDNA长度为 6 84bp ,编码 2 2 7个氨基酸 ,与已知的人canstatin的cDNA同源性为 89% ,氨基酸的同源性为 96 %。IPTG诱导原核表达载体pET30a(+) /mcanstatin在大肠杆菌E .coliBL2 1中表达。结论 :首次成功克隆了小鼠canstatin的cDNA ,其原核表达载体pET30a(+) /mcanstatin在大肠杆菌E .coliBL2 1中高效表达 ,小鼠canstatin抗肿瘤血管生成活性有待进一步研究。
- 侯卫红袁保梅王天云柴玉荣侯桂琴王建民薛乐勋
- 关键词：CDNA克隆血管生成抑制剂原核表达
- 杜氏盐藻基因工程研究现状及应用前景被引量：11
- 2007年
- 杜氏盐藻(简称盐藻)作为一种新型生物反应器,成为藻类基因工程的研究热点之一。利用基因工程手段对盐藻进行遗传重组改造以生产外源性物质是目前研究的重要领域。从盐藻相关基因的克隆、cDNA文库的建立、基因组文库的构建、筛选标记的确立和外源基因的表达等五个方面概述了国内外盐藻基因工程的研究进展,并对基因工程技术在盐藻深入研究中的应用作了前景展望。
- 冯书营刘红涛李杰薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻基因工程
- 核基质结合区对转基因表达的影响及其作用机制被引量：18
- 2004年
- 核基质结合区(matrix attachment region,MAR)是一段在体外能与核基质结合的富含AT的DNA序列。研究发现MAR能使染色质形成环状结构;将其连到目的基因二侧构建载体并转至生物体中,发现它能增强基因转录表达水平及稳定性,在一定程度上降低转基因个体或细胞系之间转基因的表达水平的差异,这很可能是减低了基因沉默所致。现对MAR的序列特征、MAR对转基因表达的影响及对转基因效应的影响机制进行综述。
- 王天云柴玉荣袁保梅侯卫红薛乐勋
- 关键词：核基质结合区转基因表达基因表达基因沉默DNA序列
- 抗生素及草酊磷对盐藻生长的影响被引量：8
- 2002年
- 目的 :研究常用抗生素和草酊磷 (Phosphinothricin ,PPT)对盐藻生长的影响。方法 :在固体培养基中加入不同浓度的卡那霉素、青霉素、链霉素、壮观霉素、利福平和PPT ,在液体培养基中加入不同浓度PPT ,对盐藻进行选择培养 ,观察盐藻在选择试剂作用下的生长情况。结果 :卡那霉素、青霉素、链霉素、壮观霉素 16 0 0mg/L时尚不影响固体培养基中盐藻的生长 ;利福平 4 0 0mg/L时可完全抑制固体培养基中盐藻的生长 ;而PPT 3mg/L时即可完全抑制固体和液体培养基中盐藻的生长 ,5mg/L时可以杀死液体培养基中的盐藻。 结论 :PPT对盐藻的生长具有很强的抑制作用 ,在基因工程中 ,以抗除草剂 (BAR)基因作为盐藻的选择标记基因研究盐藻的转化是合适的 。
- 郑合明薛乐勋
- 关键词：抗生素盐藻
- 杜氏盐藻DCA1启动子内GT重复序列在盐诱导调控中的作用被引量：2
- 2009年
- 为了研究杜氏盐藻双拷贝碳酸酐酶(DCA1)启动子中高度重复的GT序列在盐诱导表达时的调控作用,设计不同的引物,通过PCR法获得6条不同长度的DCA1启动子片段,分别与gus报告基因融合后构建6个表达载体;电击法转化杜氏盐藻细胞。组织化学染色和荧光定量法检测GUS在不同盐浓度下的瞬时表达。结果显示,DCA1启动子内高度重复的GT序列无论与其上游、下游或上下游片段同时结合均能驱动gus基因的表达,并且其表达受氯化钠浓度调控,其中和上下游均结合时活性最强;无GT重复序列的融合片段及GT重复的下游片段也能驱动gus基因的表达,但其表达不受氯化钠浓度调控;而GT重复的上游片段不能驱动gus基因的表达。结果提示:盐藻DCA1启动子中高度重复的GT序列在盐诱导调控中起重要作用,可能为一种新型的盐诱导元件。
- 罗清菊李杰闫红霞卢雪景吕玉民薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻碳酸酐酶GUS基因
