钱伟锋 作品数:67 被引量:150 H指数:7 供职机构: 河南科技大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河南省科技攻关计划 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 文化科学 轻工技术与工程 更多>>
TLR3参与新孢子虫致怀孕小鼠胎盘的炎性损伤 2021年 为探究TLR3是否参与了新孢子虫致小鼠胎盘的炎性损伤,本试验将2×106新孢子虫Nc-1株速殖子通过腹腔注射给怀孕7.5 d的C57BL/6小鼠,利用病理组织切片、免疫组化和荧光定量PCR等方法检测小鼠胎盘组织中TLR3及其相关细胞因子表达水平。结果显示,在小鼠感染新孢子虫后第2、5、8 d小鼠胎盘组织分别出现了不同程度的坏死、炎性细胞浸润和细胞核变形崩解等病理损伤;免疫组化结果显示,新孢子虫感染组的小鼠胎盘内巨细胞层、海绵滋养层和迷路滋养层细胞TLR3的表达量均明显增多;荧光定量PCR结果显示,感染组小鼠胎盘中TLR3 m RNA的表达量显著高于对照组(P<0.05),是对照组的2.5~4倍,与免疫组化检测结果基本一致;感染组小鼠胎盘中TNF-α、IFN-γ和IL-2 m RNA的相对表达水平分别是对照组的1.5~3倍、4~5倍和2~3倍,差异均显著(P<0.05)。结论,新孢子虫感染可显著上调小鼠胎盘内TLR3的表达量,进而使TLR3介导的炎性细胞因子的表达量升高,参与新孢子虫致怀孕小鼠胎盘的炎性损伤,该研究为进一步揭示新孢子虫的致病机理提供了重要数据。 白荣臻 钱伟锋 苏钰 闫文朝 张旻 吕超超 王天奇关键词:新孢子虫 小鼠 胎盘 病理损伤 炎性细胞因子 患肿瘤病犬与非患瘤犬新孢子虫感染情况的比较分析 2024年 犬是新孢子虫的终末宿主,有报道显示新孢子虫具有抗肿瘤的作用,而犬感染新孢子虫与患肿瘤病之间的关系尚不清楚。本研究的目的是比较分析患肿瘤病犬和非患瘤犬新孢子虫感染率的差异。在洛阳地区3家宠物医院对126只犬进行采样检测,共采集犬抗凝血液样品126份,其中患瘤犬79份,非患瘤犬47份;粪便样品58份,其中患瘤犬33份,非患瘤犬25份。采用饱和盐水漂浮法检测粪便中新孢子虫的卵囊,PCR方法检测粪便和血液中新孢子虫的DNA。结果显示,犬新孢子虫总感染率为10.3%(13/126),其中非患瘤犬的感染率(19.1%,9/47)在统计学上显著高于患瘤犬(5.1%,4/79)(P<0.05)。58份犬粪便样品中,1份检出新孢子虫卵囊,7份检出新孢子虫DNA(12.1%);126份血液样品中,7份检出新孢子虫DNA(5.6%)。结果表明,犬感染新孢子虫与患肿瘤病之间呈负相关,该研究为进一步探索新孢子虫抗肿瘤的机制提供参考,为犬肿瘤病的研究提供新的思路。 李晨 陈亚奇 王天奇 钱伟锋关键词:肿瘤 新孢子虫 感染率 雨课堂在兽医寄生虫学混合式教学中的应用与教学效果分析 被引量:6 2021年 用信息化教学工具和慕课资源实施混合式教学是高校提高人才培养质量的重要举措。笔者利用雨课堂工具及其内置学堂在线慕课资源设计和实施兽医寄生虫学混合式教学,结果学生课堂教学参与度高,师生互动和教学效果等显著提高。文章总结和分析了教学设计方案和实施效果,以期为高校教师提高课程教学效果提供参考。 闫文朝 杨文丰 韩利方 钱伟锋 张旻 王天奇关键词:兽医寄生虫学 混合式教学 教学设计 教学效果 猪源肉孢子虫双重套式PCR检测方法的建立 被引量:3 2020年 为了准确快速检测猪源肉孢子虫的种类,本研究根据米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫的18S rRNA基因序列设计双重套式PCR引物,优化并建立能够同时检测这两种猪源肉孢子虫的双重套式PCR方法。结果显示,双重套式PCR对米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫扩增产物的大小分别为415 bp和591 bp,而对枯氏肉孢子虫、刚地弓形虫、犬新孢子虫的检测结果均为阴性,对两种猪源肉孢子虫重组质粒标准品的检测下限均为5拷贝/μL,表明该双重套式PCR具有较强的特异性和较高的敏感性。利用本研究建立的方法随机对22份猪肉样品的检测结果显示,本研究建立的方法与肌肉压片镜检法的阳性符合率为100%,阴性符合率为89.5%,总符合率为90.9%,本研究建立的双重套式PCR方法可以实现对猪肉样品中米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫的快速检测。 刘婕 闫文朝 钱伟锋 韩利方 薛瑞仔猪感染粪肠球菌的病原鉴定及病原特性初报 被引量:22 2008年 旨在对引起河南省三门峡某猪场肥育仔猪发病死亡的病原菌进行鉴定,并对其病原特性进行初步分析。用常规手段分离纯化可疑病原菌,观察其形态染色特性和培养特性,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并进一步检测分离菌株的明胶酶和溶血素等毒力因子表型及其药物敏感性。结果表明:①经细菌分离纯化,得到2个呈链状排列的G+球菌分离株,分别命名为HE1和HE2株。②经Vitek-32全自动细菌鉴定系统鉴定,2株分离菌均为粪肠球菌(E. faecalis)。③毒力因子表型试验表明,HE1和HE2均具有溶解明胶的能力,且能裂解兔红细胞,其中HE1呈现β型溶血,HE2呈现α型溶血。④动物试验表明,分离菌株对小鼠具有致死作用,其中HE1毒力更强。家兔对上述分离株具有一定耐受性,仅表现出临床症状但不死亡。⑤药敏结果显示分离菌对万古霉素、替考拉宁、利富平和氨苄西林敏感,对诺氟沙星、红霉素、卡那霉素和四环素耐药。粪肠球菌感染可以导致仔猪发病死亡,但不同的粪肠球菌分离株对动物的致死能力有差异。 王亚宾 陈丽颖 张红英 金钺 钱伟锋 邵仁东 崔保安关键词:仔猪 粪肠球菌 病原特性 新孢子虫硫氧还蛋白的生物信息学分析及其原核表达的鉴定 2024年 为研究新孢子虫硫氧还蛋白(Trx)的生物学特性,本研究利用PCR扩增犬新孢子虫Trx(NcTrx)基因的编码区序列,构建pET-32a(+)-NcTrx原核表达载体,经双酶切与测序鉴定正确后,利用系列生物信息学软件分析NcTrx基因及其编码氨基酸序列的生物信息学特征,并对其蛋白互作网络中排名前100的蛋白进行GO功能和KEGG信号通路的富集分析。重组质粒中NcTrx基因的测序结果显示,NcTrx基因片段为1 287 bp,编码428个氨基酸;该蛋白含1个信号肽,1个跨膜区,主要位于内质网上;NcTrx蛋白的二、三级结构主要由α-螺旋、无规则卷曲组成,有12个B细胞抗原表位;该蛋白属于硫氧还蛋白家族,存在典型的氧化还原基序“-CXXC-”,有38个磷酸化位点、10个O-糖基化位点;与NcTrx蛋白互作最强的为酪氨酸激酶样蛋白,二者通过氢键和静电作用实现相互对接;GO功能及KEGG信号通路的显著性富集分析结果显示,NcTrx与其互作的蛋白主要参与蛋白质转运、蛋白质二硫键异构酶活性等生物学过程,与内质网蛋白质加工、硫代谢等信号通路密切相关。将pET-32a(+)-NcTrx转化BL21(DE3)感受态细胞,并经IPTG诱导表达后采用镍亲和层析法纯化重组NcTrx蛋白(rNcTrx),经SDS-PAGE检测该蛋白的表达及纯化效果,采用Bradford法测定纯化蛋白的浓度。采用western blot鉴定rNcTrx的反应原性。SDS-PAGE结果显示,rNcTrx分子量约66 ku,主要以包涵体的形式表达,且纯化效果较好,浓度为0.8 mg/mL。Western blot检测结果显示,纯化的rNcTrx能够与鼠His MAb、新孢子虫感染的小鼠血清发生特异性反应,在66 ku处出现特异性条带。本研究首次经PCR扩增NcTrx基因,对NcTrx基因及其蛋白进行了生物信息学分析,并经原核系统表达及鉴定了NcTrx蛋白,为后续深入探究该蛋白的生物学功能提供参考依据。 齐闻新 张旻 李晨 周思含 徐啊慧 钱伟锋 胡苏辉 王天奇 位治国 洪炀 闫文朝关键词:新孢子虫 硫氧还蛋白 生物信息学 原核表达 一种新型虫卵计数板 本实用新型公开了虫卵计数板技术领域的一种新型虫卵计数板,包括下载玻片,所述下载玻片的顶部从左到右依次连接有第一玻璃垫片、第二玻璃垫片和第三玻璃垫片,所述第一玻璃垫片、第二玻璃垫片和第三玻璃垫片的顶部均连接有上载玻片,所述... 闫文朝 韩利方 钱伟锋 王天奇 张旻文献传递 10种药物对结肠小袋纤毛虫抑杀效果研究 为筛选有效的抗结肠小袋纤毛虫药物,本研究选取替硝唑、阿奇霉素等10种广谱抗细菌、真菌和原虫药物,体外检测了这些药物对小袋虫滋养体抑杀效果。参考这些药物对细菌、真菌、或原虫的治疗剂量,设置高、中、低剂量来确定药物是否有效,... 孙晨阳 赵立卓 何凯 严文岚 王天奇 钱伟锋 张旻 位治国 闫文朝关键词:药物筛选 阿奇霉素 替硝唑 一种抑杀球虫卵囊的泡沫消毒剂及其制备方法 本发明涉及消毒剂领域,具体来说是一种抑杀球虫卵囊的泡沫消毒剂及其制备方法,不仅提供了一种抑杀球虫卵囊的泡沫消毒剂的组分,由以下质量百分比的原料组成:亚硝酸钠0.103%~0.41%、冰乙酸0.18%~1.44%、发泡剂0... 闫文朝 韩利方 钱伟锋 张旻 位治国 吕超超 王天奇文献传递 新孢子虫急性感染对小鼠器官中TLR3表达的影响 被引量:1 2019年 为了研究新孢子虫急性感染对小鼠体内不同器官中Toll样受体3(TLR3)表达的影响,试验将培养、纯化的新孢子虫Nc-1株速殖子通过腹腔注射途径感染5周龄C57BL/6小鼠(8×106个速殖子/只),感染后第2天和第8天分别采集小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏和脑,通过荧光定量PCR和免疫组织化学方法,分别从mRNA和蛋白质水平检测各器官中TLR3的表达量。结果表明:感染组小鼠脾脏和肺脏中TLR3mRNA的相对表达量较对照组显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),其中脾脏中第2天和第8天TLR3mRNA的相对表达量为对照组的6倍或9倍,肺脏中TLR3mRNA的相对表达量约为对照组的4倍;肝脏和心脏中TLR3mRNA的相对表达量约为对照组的2倍,但差异均不显著(P>0.05),脑中TLR3mRNA的相对表达量未见明显变化。免疫组织化学结果与荧光定量PCR结果基本一致。说明新孢子虫急性感染可上调小鼠多个器官中TLR3的表达。 苏钰 吕超超 张慧芬 刘玉婷 纪伟霞 钱伟锋关键词:新孢子虫 小鼠 荧光定量PCR 免疫组化