阮力
- 作品数:231 被引量:779H指数:15
- 供职机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 麻疹病毒L4株血凝素基因
- 麻疹病毒L4株比Edmonston株具有更高的血凝素活性,本发明从麻疹病毒L4株克隆了血凝素HA基因,发现该基因的DNA序列在第1080、1474、1655及1799位的四个碱基与文献报道的Edmonston株不同,并导...
- 阮力朱既明杨克俭徐水婵朱诚
- 文献传递
- 非复制重组痘苗病毒中白细胞介素6的表达及其对重组病毒免疫效果的影响被引量:6
- 2002年
- 目的 研究白细胞介素 6(IL 6)在非复制型痘苗病毒中的表达及其对重组痘苗病毒免疫效果的影响。方法 利用非复制型痘苗病毒表达载体pNEOCK1 1 β75IL6和重组病毒RVJ1 2 3 ,通过两步重组构建能同时表达IL 6和乙型肝炎病毒 (HBV)HBsAg的非复制型重组痘苗病毒RVJ1 2 3ΔCK1 1 β75IL6。免疫动物并观察其免疫效果。 结果 Southernblot证实痘苗病毒C、K片段间基因缺失的同时伴有IL 6基因的插入 ,IL 6和HBsAg可同时表达。鼻腔吸入分别免疫BALB c小鼠和新西兰白兔 ,ELISPOT实验证实免疫后两周小鼠肺淋巴细胞的抗 HBsAgIgA、IgG抗体分泌细胞 (ASC)数比对照组 (RVJ1 2 3ΔCK1 1 β75)显著增加 ,并可在小鼠血液、肺浸出液以及新西兰白兔血液、肺浸出液、其他分泌液样品中检测到抗 HBsAg的特异性的IgA、IgG抗体。与对照组相比 ,IgA、IgG抗体阳转率及抗体滴度提高。结论 非复制型痘苗病毒载体中表达的IL 6可增强其诱导的免疫反应 ,为细胞因子IL
- 郭斐陆柔剑孙朝晖马海伦李军阮力张颖妹马大龙
- 关键词:白细胞介素6免疫佐剂
- 截短血小板生成素cDNA在中华仓鼠卵巢细胞中的表达被引量:1
- 2001年
- 目的 将具有全长血小板生成素 (TPO)活性的N端截短血小板生成素cDNA(T1 84)作为目的基因 ,在中华仓鼠卵巢细胞 (CHO)中成功表达。方法 将N端截短血小板生成素cDNA克隆入以二氢叶酸还原酶 (DHFR)为筛选扩增基因的 pDC B真核表达载体 ,通过不断提高MTX浓度 ,促进N端截短血小板生成素在CHO细胞中的表达。结果 构建了N端截短血小板生成素cDNA的真核表达质粒 ,并能在CHO细胞中高效表达。结论 N端截短血小板生成素cDNA在CHO细胞中成功表达 ,其产物具有全长TPO的活性。
- 王志云田淑芳楚雍烈阮力
- 关键词:血小板生成素基因表达
- 表达人高致病性禽流感病毒H5N1(安徽株)结构基因的DNA疫苗在小鼠中诱导的免疫应答分析被引量:4
- 2010年
- 本研究旨在研发经济、高效的人高致病性禽流感病毒H5N1实验疫苗并优化免疫方案。首先优化并合成H5N1(安徽株)的血凝素基因(HAop)和神经氨酸酶基因(NAop)并证实其正确表达,再构建含有H5N1(安徽株)结构基因的多个单顺反子(HAwt、HAop和NAop)和双顺反子(HAop/M2和NAop/M1)DNA疫苗质粒。随后,采用不同途径的体内电转法在第0周和第3周2次免疫Balb/C小鼠,初步分析了抗原特异性体液免疫(HA血凝抑制抗体,NA特异性抗体,中和抗体)和细胞免疫应答(IFN-γELISpot)的特点。结果表明:含有优化血凝素基因(HAop)和优化神经氨酸酶基因(NAop)的DNA疫苗可以快速激发较强的免疫应答,尤其是细胞免疫应答;皮内电转所激发的体液免疫应答强于肌肉电转。本研究为新型H5N1疫苗的研发以及免疫方案的优化奠定了基础。
- 王文陈红谭文杰邓瑶王敏刘源殷霄张柯管洁周剑芳舒跃龙阮力
- 关键词:H5N1DNA疫苗
- 人乳头瘤病毒16型结构蛋白在昆虫细胞中的表达被引量:4
- 2001年
- 目的 在昆虫细胞中表达人乳头瘤病毒 16型 (HPV16 )结构蛋白 ,为HPV16型预防性基因工程亚单位疫苗的研究以及诊断试剂的研制奠定基础。方法 将目的基因克隆至杆状病毒转移载体 ,该重组质粒DNA与线性化的杆状病毒DNA共转染昆虫细胞Sf 9,通过同源重组获得重组杆状病毒 ,用SDS PAGE凝胶电泳和Westernblot法检测重组子在昆虫细胞中表达的目的蛋白。结果 获得了稳定高效表达HPV16结构蛋白的重组杆状病毒 ,L1和L2蛋白的相对分子质量分别为 5 70 0 0和970 0 0 ,L1蛋白的表达产量约占昆虫细胞总体蛋白的 2 5 %~ 30 %。结论 人乳头瘤病毒
- 魏兰兰韩立群任皎田厚文骆卫锋陆振华谷鸿喜阮力
- 关键词:人乳头状瘤病毒病毒蛋白质类病毒体
- 表达中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白的重组痘苗病毒的构建及免疫效果初步评价被引量:1
- 2015年
- 目的:以痘苗病毒天坛株为载体,构建表达中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-Co V)S蛋白的重组病毒疫苗,并进行免疫效果评价。方法:通过PCR扩增获得去除跨膜区的S蛋白基因片段SQ,并构建重组痘苗病毒载体质粒p JSC11Lac Z7.5SQ,将重组质粒与痘苗病毒同源重组并单斑纯化获得重组病毒毒株RVVMERS-SQ,重组病毒免疫小鼠后用酶联免疫吸附实验(ELISA)和假病毒微量中和实验检测其诱发的S蛋白体液免疫反应水平。结果:构建了表达MERS-Co V去跨膜区S蛋白的重组病毒RVVMERS-SQ,其免疫小鼠后诱发了强的S蛋白体液免疫反应,血清Ig G抗体滴度为1∶3200,中和抗体滴度达到1∶1000。结论:重组痘苗病毒RVVMERS-SQ可在BALB/c小鼠体内诱发强的免疫反应,为MERS-Co V疫苗的研发提供了实验基础。
- 王平兴任皎赵莉邓瑶阳静李善琴阮力谭文杰田厚文
- 关键词:病毒载体
- 人乳头瘤病毒58型L1壳蛋白在原核细胞中的高效表达及抗体制备被引量:4
- 2001年
- 目的 人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)是重要的高度致瘤性病毒之一 ,用原核细胞表达HPV5 8L1主要壳蛋白 (McP) ,并制备相应抗体血清 ,为基因工程疫苗研制打下基础。方法 用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV5 8L1完整编码区基因 ,并克隆、测序。构建原核表达载体pRSETB 5 8L1,表达的L1蛋白经SDS PAGE纯化 ,免疫BALB c小鼠。结果 在原核细胞中表达了HPV5 8L1壳蛋白 ,该壳蛋白的相对分子质量为 6 0 0 0 0 ,此蛋白与HPV16L1抗体有交叉反应。获得抗HPV5 8L1壳蛋白特异性抗体 ,抗体滴度为 1∶80 ,并用该抗体鉴定了昆虫细胞中表达的HPV5 8L1壳蛋白。结论 HPV5 8壳蛋白在原核细胞中获得有效表达 ,纯化免疫小鼠后能产生抗HPV5 8L1特异性抗体 ,此抗体可用于鉴定真核细胞表达的HPV5
- 田厚文韩立群任皎骆卫峰阮力
- 关键词:人乳头状瘤病毒病毒包膜蛋白质类抗体
- 含S(主蛋白)和前S1(大蛋白)乙肝表面基因工程融合抗原的纯化工艺
- 工艺所属技术领域为生物技术和蛋白质纯化本发明建立了哺乳动物细胞CHO-dhfr-表达的含S和前S1乙肝表面融合抗原的纯化工艺流程:细胞培养原液→离子交换柱层析→疏水柱层析→分子筛柱层析,该工艺乙肝表面抗原S1和前S蛋白回...
- 李军阮力陈红王文田淑芳杨芙蓉宗芳张陵林
- 文献传递
- 一种含poly I:C佐剂的新型乙肝疫苗制剂
- 本发明涉及一种含poly I:C佐剂的新型乙肝疫苗制剂。所属技术领域:1.生物技术2.基因工程疫苗。本发明涉及一种乙型肝炎疫苗的新配方,该疫苗的主要成分为基因工程乙型肝炎病毒表面抗原、铝佐剂、聚肌苷酸胞嘧啶核苷酸(pol...
- 谭文杰揣侠陈红文波阮力
- 文献传递
- 六株不同地区分离的H7N9流感病毒假病毒制备与生物学特性研究被引量:1
- 2017年
- 目的 选择不同地区分离的H7N9亚型流感病毒代表株,制备各代表株的假病毒,为H7N9疫苗对不同地区毒株的免疫保护效果评价奠定基础.方法 通过对29株H7N9流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)的氨基酸序列分析,获得6株不同地区H7N9亚型流感病毒代表株病毒;采用基于慢病毒载体的假病毒包装系统,以HA与神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)作为包膜质粒,包装获得6株带有荧光素酶报告基因的假病毒;通过电镜负染、Western blot检测、感染MDCK后的荧光素酶读值和血凝试验等了解6株假病毒的生物学特性,通过血清交叉中和试验了解其在中和抗体检测中的应用情况.结果 筛选获得6株不同地区分离的H7N9流感病毒代表株并制备了相应的假病毒颗粒,电镜下可观察到典型的流感病毒形态,Western blot可检测到HA、NA和P24的表达;滴度测定结果显示6株假病毒对MDCK细胞的感染力为104- 105TCID50/50μl,血凝活性可达64- 512;SH1上海株H7N9 HA疫苗免疫血清针对6株流感假病毒100TCID50剂量的中和效力不同,提示6株假病毒可用于疫苗的交叉免疫效果评价.结论 成功获得6株H7N9不同地区代表株流感假病毒,为疫苗的免疫效果评价奠定了基础.
- 黄保英李善琴齐香荣任皎宋敬东谭文杰田厚文阮力
- 关键词:假病毒血凝素抗原特性