陈舒
- 作品数:99 被引量:91H指数:5
- 供职机构:浙江省血液中心更多>>
- 发文基金:浙江省医药卫生科学研究基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学电子电信文化科学更多>>
- ABH变异型个体血小板表面ABO抗原强度分析
- 许先国洪小珍刘瑛陈舒马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军
- S-亚硝基谷胱甘肽诱导脐带血CD34^+细胞来源的巨核细胞产生血小板被引量:1
- 2006年
- 为了探讨一氧化氮供体S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)对脐带血CD34+细胞分化来源的巨核细胞产生血小板的可能作用,我们采用免疫磁珠法从8例健康产妇足月顺产的胎儿脐带血中分选CD34+细胞,并在含血小板生成素(thrombopoietin,TPO,50ng/ml)、白细胞介素-3(IL-3,10ng/ml)、干细胞因子(stemcellfactor,SCF,50ng/ml)和重组人粒-巨噬细胞刺激因子(rHuGM-CSF,20ng/ml)的无血清培养基中培养14d。随后,用免疫磁珠法分选CD61+细胞。CD61+细胞在含有(实验组)和缺乏(对照组)GSNO(20mg/ml)的无血清培养基[含TPO(50ng/ml)、IL-3(10ng/ml)、SCF(50ng/ml)]中培养不同时间(30min、2h)。采用流式细胞仪检测培养体系中的血小板数;电子显微镜观察巨核细胞的形态学;倒置显微镜和流式细胞仪观察凝血酶诱导的血小板凝集;ELISA方法检测巨核细胞中cGMP的含量。结果显示,与对照组比较,实验组血小板数量明显增加(P<0.05);电子显微镜下可见巨核细胞有明显伪足形成和突出;凝血酶诱导后在倒置显微镜和流式细胞仪上均可观察到血小板凝集现象;GSNO作用后巨核细胞中的cGMP明显升高(P<0.05)。这些结果提示,GSNO可以促进脐带血CD34+细胞来源的巨核细胞产生具有一定功能的血小板,其产生的机制可能部分与cGMP途径有关。
- 戴兵何吉陈舒刘晋辉秦斐朱发明严力行
- 关键词:CD34^+细胞血小板
- 应用基因芯片技术检测人脐带血CD34^+细胞体外扩增的巨核细胞基因表达
- 2011年
- 目的 研究人脐带血CD34^+细胞体外扩增巨核细胞的基因表达,从分子水平探讨巨核细胞的表达机制。方法 采用密度梯度离心法和免疫磁珠分选系统获取人脐带血CD34细胞。100ng/mlTPO诱导培养12d后,应用抗CD41^+单克隆抗体免疫磁珠法分选巨核细胞。应用基因芯片技术检测巨核细胞、非巨核细胞和meg-01细胞株的基因差异表达。选择THBSl、HOXA9、B-actin、IL-8、ANXA6、FGF-8对检测结果进行RT—PCR验证。结果 巨核细胞样本与非巨核细胞样本比较,呈显著差异表达的基因有116个,其中52个上调,64个下调;巨核细胞样本与meg-01细胞株样本比较呈显著差异表达的基因有158个,其中71个上调,87个下调。THBSl在巨核细胞表达高于非巨核细胞,HOXA9在巨核细胞表达低于非巨核细胞;13一actin在巨核细胞与非巨核细胞的表达无差别。IL-8在巨核细胞表达高于meg-01细胞株;ANXA6在巨核细胞表达低于meg-01细胞株;FGF一8在巨核细胞与meg-01细胞株的表达无差别。结论 巨核细胞、非巨核细胞和meg—01细胞株基因表达存在显著差异,差异表达中的调控基因包括应激反应基因、免疫相关基因、DNA合成和修复基因、新陈代谢基凶、肿瘤基因和肿瘤抑制基因等。
- 何吉王芳朱发明秦斐陈舒刘晋辉吕杭军严力行
- 关键词:巨核细胞基因表达寡核苷酸序列分析体外研究
- 造血干细胞移植术后分子水平复发的研究及其临床应用
- 许先国陈舒应燕玲洪小珍刘瑛蓝小飞何吉朱发明吕杭军严力行
- 该项目从短串重复序列STR、红细胞血型和血小板血型等方面对造血干细胞移植术后复发进行分子水平的监测,取得了以下科研成果:1.优化了造血干细胞移植术后STR监测的荧光半定量技术,分析了各STR位点对受体特异性等位基因的检出...
- 关键词:
- 关键词:造血干细胞移植红细胞血小板
- 红细胞血型系统基因诊断新技术的综合研究
- 洪小珍朱发明应燕玲许先国陈舒马开荣蓝小飞
- 红细胞血型系统在输血医学、器官移植、临床疾病关联等方面具有重要意义,红细胞基因诊断技术的研究有助于提升血型分型准确性,减低输血不良反应。该项目综合研究了红细胞血型系统基因诊断方法、基因数字化配合技术、稀有表型分子机制、稀...
- 关键词:
- 关键词:红细胞血型系统基因诊断输血医学器官移植
- DNA甲基化对自发性ABO变异型抗原差异表达影响机制的研究
- 应燕玲许先国蓝小飞马开荣陈舒何吉朱发明
- ABO抗原是血型系统中重要的抗原,ABO变异型个体往往出现抗原强度的减弱,在临床上引起定型或配血困难,因此通过研究了解ABO血型变异型抗原差异表达的分子机制,将有助于预防输血不良反应的发生。该研究通过血清学和基因分型方法...
- 关键词:
- 关键词:基因分型方法表观遗传学
- 人血小板膜糖蛋白ITGB3基因终止突变C.1476G〉A的体外表达研究
- 2016年
- 目的对ITGB3基因新的终止突变c.1476G〉A进行体外表达研究,以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3e.1476G〉AcDNA的真核表达载体,转化感受态细胞,提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞株(Chinesehamsterovariancancer,CHO)细胞,经G418筛选获取稳定表达细胞株。采用实时荧光定量PCR、Western印迹和流式细胞术分别检测CHO稳定表达株ITGB3基因的mRNA表达和血小板膜糖蛋白llIa(glycoproteinIIIa,GPⅢa)糖蛋白水平。结果成功构建野生型和突变型ITGB3cDNA的真核表达载体,转染筛选后分别获得了稳定表达的CHO细胞株。突变型细胞株中CD61抗原表达量仅为野生型的37%,而ITGB3mRNA转录水平为野生型的6%。Western印迹结果显示,野生型细胞株稳定表达完整的GPⅢa蛋白,而突变型CHO细胞株无完整的GPⅢa蛋白表达。结论ITGB3c.1476G〉A终止突变可导致ITGB3基因的转录水平降低,影响GPⅢa蛋白合成及CD61抗原的表达水平。
- 刘瑛许先国陈舒洪小珍陶苏丹何吉朱发明吕杭军
- 关键词:体外表达
- 1种用于分析疾病相关ABO抗原丢失的染色体杂合性缺失方法
- 目的建立1种9号染色体杂合性缺失(LOH)的分析方法,以解释因ABO基因附近染色体的LOH导致的疾病相关ABO抗原丢失现象。方法在9号染色体长臂和短臂上共选取13个微卫星位点,其中10个位点(D9S1677、D9S289...
- 许先国应燕玲洪小珍蓝小飞马开荣陈舒朱发明吕杭军
- 关键词:ABO血型血液病染色体杂合性缺失
- 文献传递
- 应用Solexa技术检测脐血CD34^+细胞体外诱导的巨核细胞mRNA表达
- 2011年
- 目的应用Solexa技术研究人脐带血CD34+细胞体外诱导巨核细胞的mRNA表达。方法采用密度梯度离心法和免疫磁珠分选系统获取人脐带血CD34+细胞。100 ng/ml促血小板生成素诱导培养12 d后,应用抗CD41+单克隆抗体免疫磁珠法分选获得巨核细胞和非巨核细胞。应用Solexa技术检测巨核细胞和非巨核细胞的mRNA表达差异。结果获取的Tag初始数量巨核细胞和非巨核细胞分别为3 773 147和3 533 805个。整个清晰的Tag数量分别为3 291 132和2 967 947个,明显独特的tag数量分别为197 769和245 318个。其中上调基因表达数量为1161个,下调为902个。上调Tag表达数量为2717个,下调为1519个。结论巨核细胞和非巨核细胞mRNA表达存在显著差异,差异基因编码产物与细胞发育、黏附、凋亡、代谢、细胞内及细胞间的信号转导以及免疫应答等功能相关,进一步深入将有助于探讨巨核细胞的表达机制、信号传导及调控机制。
- 王芳何吉朱发明刘晋辉秦斐陈舒徐罡吕行军严力行
- 关键词:巨核细胞MRNA表达体外扩增
- 一种人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR-SBT基因分型方法及试剂
- 本发明属于基因分型检测方法技术领域,具体涉及一种用于人类红细胞血型系统ABO抗原的多重PCR‑SBT基因分型方法。本发明还涉及一种人类红细胞血型系统ABO抗原基因分型的多重PCR‑SBT试剂。本发明所提供的试剂和方法可作...
- 朱发明应燕玲洪小珍何吉许先国陈舒马开荣
- 文献传递