马丹
- 作品数：19 被引量：81H指数：5
- 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程理学生物学更多>>
- 实时荧光定量RT-PCR法快速定量检测果蔬中星状病毒被引量：3
- 2017年
- 目的:针对不同果蔬表面建立星状病毒富集与RNA提取方法,结合已报道的实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)引物和探针,实现果蔬中星状病毒的高灵敏快速定量检测。方法:利用10倍梯度稀释的星状病毒c RNA分子检测Ct值及其对应的初始浓度,构建标准曲线,为星状病毒的定量检测提供参考。将ISO/TS 15216-2:2013针对果蔬中诺如病毒和甲肝病毒RNA的提取方法用于星状病毒的检测,利用人工感染的大白菜和草莓样品,分析病毒回收率、灵敏度及检测重复性。最终通过60份果蔬样品的检测验证该方法的实用性。结果:所建立的实时荧光定量RT-PCR方法扩增效率达95.9%,检测低限为5.6拷贝/反应。人工感染的大白菜样品中病毒回收率在0.94%~9.63%之间,而人工感染草莓样品中病毒回收率最高达1.03%。对同一感染浓度的样品在不同时间的检测结果变异系数均小于2%。最终检出1份来自北京农贸市场的草莓样品为星状病毒阳性,检测阳性率达1.67%。结论:建立的果蔬中星状病毒荧光RT-PCR定量检测方法快速、高效、灵敏,在食源性病毒的日常筛查和风险评估工作中具有重要的应用价值。
- 马丹魏海燕徐蕾蕊魏咏新汪琦张西萌付溥博刘莉赵晓娟曾静
- 关键词：星状病毒实时荧光定量RT-PCR果蔬
- MS2噬菌体在贝类食源性病毒检测中过程质控应用被引量：5
- 2016年
- 目的研究MS2噬菌体作为过程质控品在贝类食源性病毒检测中的应用。方法采用双层琼脂培养法制备MS2噬菌体悬液,计算效价;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检验其稳定性;比较3种RNA提取方法的提取效率,确定M S2噬菌体的最适添加量范围;分析M S2噬菌体添加对贝类食源性病毒检测的影响。结果稳定性研究表明-20℃和-80℃28 d MS2噬菌体(悬液的效价浓度为7.13×1011pfu/m L)时RNA含量无明显变化[t=0.464,P=0.653(-20℃);t=0.602,P=0.561(-80℃)]。MS2噬菌体最适添加量范围为7.13×108~7.13×107pfu/m L。在最适添加范围内,试剂盒方法和Trizol裂解结合磁珠纯化方法回收率均>1%。2种阳性样品均被检出,其Ct值比较接近,M S2噬菌体对贝类食源性病毒检测无影响(t=0.170,P=0.873)。结论M S2噬菌体可作为贝类食源性病毒qRT-PCR检测的过程质控品,是监控假阴性结果的一种简便有效的方法。
- 徐蕾蕊魏海燕马丹汪琦张西萌李丹付溥博刘莉魏咏新曾静
- 关键词：MS2噬菌体贝类
- 美国转基因植物食品监管体系介绍被引量：3
- 2015年
- 美国对转基因食品的监管分工明确,权责清晰。从转基因植物的研发到商业化,再到转基因植物食品的加工和上市,不同部门分工合作。美国的转基因植物食品的监管主要由农业部和食品药品监督管理局两个部门——农业部和食品药品监督管理局协同监管。农业部负责转基因植物的监管,主要的监管部门是农业部下属的动植物安全检疫局,食品药品监督管理局负责转基因植物食品的监管。本文对美国转基因植物食品的监管体系进行分析介绍,为我国转基因食品的监管提供参考。
- 魏咏新张锡全魏海燕汪万春徐蕾蕊马丹曾静
- 关键词：转基因植物转基因食品
- 加拿大转基因食品监管体系简介被引量：5
- 2015年
- 转基因食品在加拿大属于新资源食品。加拿大没有针对转基因食品的专门立法和管理部门,对转基因食品的管理涉及多部法律规章和管理部门。加拿大政府转基因食品安全管理以产品本身为基础,而不涉及产品生产过程,主要体现在全面的上市前安全评估制度和食品标签制度和食品标签制度两个方面。转基因食品在加拿大进行商业化上市销售前需经过加拿大卫生部、环境部和渔业海洋部等部门严格的安全性评估过程,上市后接受加拿大卫生部和加拿大食品检验局通过食品标签制度管理。当某一转基因食品通过安全性评估上市销售后,加拿大政府对转基因食品的种植不作继续监管,并且对转基因食品的标签也没有强制要求,也没有明确的转基因成分含量限值。
- 徐蕾蕊魏海燕汪万春马丹曾静
- 关键词：转基因食品安全性评估食品标签
- 纳米免疫磁分离-实时荧光聚合酶链式反应快速检测海产品中副溶血性弧菌被引量：8
- 2014年
- 采用副溶血性弧菌单克隆抗体、纳米免疫磁分离技术,结合实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,建立海产品中副溶血性弧菌纳米免疫磁分离-实时荧光PCR检测方法。副溶血性弧菌纳米免疫磁珠在菌体浓度为103 CFU/mL水平时,对副溶血性弧菌的捕获率达到74%。在纯培养、无需增菌情况下,该方法检测灵敏度达到140 CFU/mL;通过134株副溶血性弧菌和74株非目标菌的测试,实时荧光PCR技术具有良好的特异性;在食品基质添加实验中,其检测限为2 CFU/25 g样品,增菌时间缩短到8 h。
- 张蕾曾静魏海燕马丹程晋霞张西萌张海予
- 关键词：副溶血性弧菌
- 2008～2017年间北京进出口水产品中副溶血性弧菌耐药性分析被引量：4
- 2018年
- 目的了解北京进出口水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的耐药情况。方法对2008~2017年间北京进出口水产品中分离出的320株副溶血性弧菌应用药敏纸片扩散法(K-B法)进行21种常用抗生素药敏测试。结果 89.1%的实验菌株同时对氨苄西林耐药,而对环丙沙星、诺氟沙星、庆大霉素、多粘菌素B、亚胺培南全部敏感;分别有高达94.7%和82.1%的菌株对红霉素和链霉素表现为中介。结论实验菌株存在大量中介耐药和异质性耐药的情况,应进一步加强水产品中副溶血性弧菌耐药性的监测工作,以期指导临床和水产养殖中抗生素的使用。
- 付溥博张西萌马丹徐蕾蕊魏海燕魏咏新曾静
- 关键词：副溶血性弧菌水产品耐药性
- 星状病毒核酸检测标准物质的研制被引量：9
- 2016年
- 目的：研制用于食品中星状病毒核酸检测的c RNA标准物质。方法：利用基因克隆体外转录方法制备星状病毒c RNA纯品,初步定量后稀释至适宜浓度进行分装,其中一部分分装样品添加RNAsafe处理,剩余部分不做处理,制备2种标准物质样品。采用实时荧光定量实时聚合酶链式反应（real-time-polymerase chain reaction,RTPCR）方法检验2种标准物质样品均匀性和稳定性。样品中RNA浓度（拷贝/μL）通过荧光定量RT-PCR和数字PCR联合定值获得,并进行不确定度分析。结果：均匀性结果显示2种样品组间精密度与组内精密度差异均无统计学意义（P〉0.05）。稳定性检验表明20-25℃10 d、4℃14 d、-20℃3个月及-80℃和液氮6个月2种样品c RNA含量无显著变化。RNAsafe（-）标准物质定值为：（1.652±0.143）×10^8拷贝/μL（-80℃）和（1.652±0.135）×10-8拷贝/μL（液氮）。结论：RNAsafe（-）标准物质样品可作为用于星状病毒核酸检测的标准物质。
- 徐蕾蕊魏海燕林长军马丹汪琦张西萌李丹付溥博刘莉魏永新赵晓娟曾静
- 关键词：星状病毒核酸标准物质
- 食品微生物检测试剂盒评价方法建立与应用被引量：2
- 2015年
- 目的建立实用可行的食品微生物检测试剂盒的评价方法。方法本研究以ISO 16 140为理论基础、GB 4789.10-2010为参比方法 ,从检测特异性、灵敏度、耐变性/统计学分析等方面对3M公司Petrifilm大肠埃希氏菌检测试剂盒(PEC)进行了可替代性评价。结果 PEC法对目标菌检测的特异性为84%,对非目标菌检测的特异性为100%;灵敏度检测中在25份低浓度添加样品里,PEC法的灵敏度有22份可以达到10 CFU/g,3份火腿样品的结果为阴性,国标法所有样品灵敏度均可达到10 CFU/g;耐变性评价中,PEC法在35℃/37℃、18 h/24 h耐变性条件的比较中检测结果差异均无统计学意义(P>0.05);应用2种方法对添加高、中、低3个水平的大肠埃希菌的五大类样品进行测试,线性方程为y=0.942 1x+0.328 4,相关系数为0.798 9,5类样品不同方法测试结果差异均无统计学意义(P>0.05);应用2种方法对30份自然样品进行检测,PEC法检测出4份阳性样品,国标法检测出6份阳性样品,2种方法阳性符合率为93.33%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论以ISO 16140为理论基础可建立一套评价方法 ,此方法可系统的对微生物检测用试剂盒的可替代性进行评价。
- 付溥博张西萌韩笑刘莉马丹魏海燕王紫薇曹嘉悦朱涵俊曾静
- 关键词：食品微生物
- 环介导等温扩增法检测转基因玉米MON88017品系被引量：6
- 2017年
- 建立了转基因玉米MON88017品系环介导等温扩增法检测方法。针对MON88017玉米基因组与外源基因结合处序列,设计5条特异引物,并对反应条件、特异性、灵敏度、稳定性、结果判断方法等参数进行研究,同时与实时荧光PCR检测方法进行比较,最终进行了5家同类型实验室的协同验证。结果表明本研究所建立的MON88017环介导等温扩增检测方法具有良好的特异性,其最低检出限为0.5%,在特异性、灵敏度和检测范围等指标上均优于传统的PCR技术,并且不依赖昂贵的大型设备,可以实现现场快速检测,检测成本与检测所需时间远低于实时荧光PCR。该方法具有快速、简便的优点,能满足实际工作要求。
- 马丹张沫琦魏海燕魏咏新徐蕾蕊曾静
- 关键词：转基因玉米
- 3D人工皮肤模型用于化学品皮肤刺激性实验的评估被引量：4
- 2014年
- 目的采用"EpiSkin"3D人工皮肤模型,对20种化学品的刺激性进行评价。方法 20种化学品(固体10 mg、液体10μl)局部接触检测模型表面15 min,用MTT方法测定细胞活力。结果以相对细胞活力值为判定刺激性的依据,在20种化学品中,检测模型特异性为70%,灵敏度为90%。结论 "EpiSkin"3D人工皮肤模型能正确分类所测试的化学品,可以尝试用于化学品皮肤刺激性测试。
- 马丹赵晓娟付溥博张西萌魏海燕刘莉曾静
- 关键词：刺激性化学品
