刘克剑
- 作品数：23 被引量：148H指数：8
- 供职机构：北京协和医学院比较医学中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗纤灵对阿霉素肾病大鼠Smads信号通路分子的影响被引量：13
- 2007年
- 目的探讨中药复方抗纤灵治疗阿霉素诱导的大鼠肾纤维化的作用及机理。方法雄性SD大鼠45只随机分为4组,正常组(7只)、假手术组(8只)、模型组(15只)、抗纤灵治疗组(15只)。用单侧肾切除并2次阿霉素诱导法建立大鼠肾纤维化模型,手术第4周和第8周检测尿素氮、血肌酐含量和内生肌酐清除率等指标,同时称量大鼠体重;抗纤灵治疗72天后取肾组织,HE染色、六胺银染色和免疫组化观察肾组织病变;采用Western印迹分别检测转化生长因子β受体Ⅰ(TβRⅠ)、转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)、Smad2、Smad7的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠尿素氮、肌酐均有明显上升,内生肌酐清除率下降;模型组大鼠肾小球基底膜增厚、节段性硬化和玻璃样变,硬化的肾小球周围所属肾小管萎缩,部分肾小管消失;部分肾小球肥大,周围肾小管扩张严重;肾小球集中现象明显;肾小管上皮细胞变性,蛋白管型严重;肾间质纤维组织增生和大量炎细胞浸润。模型组肾组织TβRⅠ、Smad2蛋白表达显著上调,而TβRⅡ、Smad7蛋白表达水平无明显变化。中药干预后,血尿素氮及血肌酐含量显著降低,内生肌酐清除率有所升高。抗纤灵治疗组大鼠的上述病理改变明显轻于模型组,肾组织TβRⅠ、Smad2蛋白表达明显减少。结论抗纤灵可抑制肾组织TβRⅠ、Smad2蛋白表达,从而改善阿霉素诱导的肾纤维化及肾功能。
- 张悦李靖刘克剑何立群刘煜敏陆海英林敏
- 关键词：抗纤灵肾纤维化SMAD
- 抗纤灵方对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路的影响被引量：16
- 2008年
- 目的:研究中药复方抗纤灵对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾纤维化大鼠TGF-β1-Smad通路的影响,借以初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法:雄性SD大鼠18只随机分为3组,假手术组、模型组、中药治疗组。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,抗纤灵治疗两周后检测梗阻肾羟脯氨酸含量;HE染色和电镜观察肾组织病变;采用RT-PCR检测肾组织TGF-β1 mRNA水平;蛋白免疫印迹法检测肾组织转化生长因子I型受体(TβRI)、转化生长因子II型受体(TβRII)、Smad2蛋白表达及磷酸化变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显增多;病理观察可见肾小球毛细血管基底膜明显增厚,间质成纤维细胞和胶原沉积明显增多;肾组织TGF-β1mRNA及TβRI、TβRII蛋白表达显著增多,Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均显著增多。与模型组比较,中药干预组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显减少;肾小球和肾小管基底膜仅见轻度增厚,间质成纤维细胞和胶原沉积较模型组减轻;肾组织TβRI、TβRII蛋白表达明显下调,Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均明显下调。结论:抗纤灵可抑制单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路,抑制梗阻肾TβRI、TβRII、Smad2蛋白表达及Smad2蛋白磷酸化,从而改善梗阻性大鼠的肾间质纤维化,减少纤维化肾脏中胶原蛋白含量。
- 刘煜敏张悦何立群刘克剑李靖陆海英韩志芬庞慧芳林敏
- 关键词：输尿管梗阻转化生长因子Β
- SIVmac239感染恒河猴急性期回肠派氏淋巴结中淋巴细胞亚群的变化被引量：1
- 2012年
- 目的分析SIVmac239感染早期中国恒河猴回肠派氏淋巴结淋巴细胞数量及亚群的变化,探讨这些变化与疾病进展的可能关系。方法以静脉注射SIVmac239制备恒河猴AIDS模型,对回肠派氏淋巴结进行CD4和CD8免疫组化标记,分离Peyer’s集合淋巴结淋巴细胞,分别标记CD3、CD4、CD8、CD28、CD95单克隆抗体,以流式细胞仪检测T细胞及其亚群的表达情况。结果 SIVmac239感染急性期中国恒河猴Peyer淋巴结中CD4+/CD8+比值持续下降,记忆性细胞比例升高,但Peyer淋巴结形态及CD4+T细胞数量未见明显变化,CD8+T细胞从第5天开始持续升高。结论 SIVmac239感染急性期,中国恒河猴回肠派氏淋巴结形态及CD4+T细胞数量基本维持,向记忆性细胞的转化增加,但是CD4+/CD8+比值下降。
- 刘克剑丛喆吴芳新王卫熊竞魏强秦川
- 关键词：T淋巴细胞恒河猴
- 猴艾滋病急性期肠粘膜相关淋巴组织NK细胞表型及功能被引量：2
- 2012年
- 目的研究猴艾滋病毒感染急性期恒河猴肠道相关淋巴组织(mucosal associated lymphoid tissues,MALTs)NK细胞亚群和功能变化。方法 SIV静脉感染恒河猴后,定期进行动物感染指标测定,并在感染后不同时间点取肠组织,分离派氏淋巴结单个核细胞(peyer's patch mononuclear cells,PPMC)和粘膜固有层单个核细胞(lamina propria mononuclear cells,LPMC),进行T细胞和NK细胞表面抗体染色,流式分析。结果 SIV感染急性期MALTs CD56CD16+NK细胞亚群比例增幅明显,同时细胞毒性功能增强;CD56-CD16-NK细胞亚群数量减少,功能无明显变化;CD56+CD16+和CD56+CD16-NK细胞数量比例略有增加趋势,但免疫调节功能显著降低。结论SIV感染急性期恒河猴肠道MALTs中NK细胞脱颗粒作用增强,表型功能呈现出较强可塑性。该研究对探索艾滋病粘膜免疫机理、抗病毒治疗及药物研发具有参考意义。
- 吴芳新王卫刘克剑丛喆赵长城熊竞苏爱华鞠斌魏强
- 关键词：恒河猴NK细胞
- 恒河猴感染SIVmac239极早期肠粘膜屏障功能损伤研究
- 艾滋病是影响人类健康最严重的传染性疾病之一。粘膜系统是人免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，HIV)攻击的主要部位，胃肠粘膜疾病是人获得性免疫缺陷综合征的主要临床症状。最初人们认为这些...
- 刘克剑
- 关键词：艾滋病疾病预防
- 健康中国恒河猴各淋巴组织中T淋巴细胞表型及分布被引量：4
- 2012年
- 试验旨在明确T淋巴细胞在中国恒河猴各组织中的表型与分布,为疾病模型研究提供基础数据。取外周血、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结及肠道组织,从中分离出淋巴细胞。使用流式细胞术检测分析各种表型的淋巴细胞在组织间的分布。结果表明,淋巴结中CD4+/CD8+T细胞比值高于外周血,肠道固有层中最低,三者差异显著。记忆性T细胞在外周血和肠道固有层T细胞中比重较大,而淋巴结中主要为幼稚T细胞。CD4+T细胞中中心记忆T细胞Tcm为主要亚群,而CD8+T细胞主要为效应记忆细胞Tem。外周血与肠道固有层中增殖T细胞比例相当,而淋巴结中T细胞增殖水平相对较低。各组织中CXCR4受体表达量普遍高于CCR5受体,其中肠道固有层CCR5受体表达水平最高。值得注意的是,有一小群表型CD3+CD4+CD8low的细胞仅在肠道固有层中存在,经分析其功能活性应高于肠道CD4单阳性T细胞。因此,测定了健康中国恒河猴各表型T淋巴细胞在多种淋巴组织中的基础数值,为相关模型研究奠定基础。
- 熊竞刘克剑吴芳新丛喆王卫陈霆魏强
- 关键词：中国恒河猴记忆T细胞KI67CCR5
- Smad通路UPP依赖性的蛋白质降解机制被引量：2
- 2005年
- Smad通路是TGF-β信号转导的主要通路。Smad是细胞内信号转导通路中的胞液递质,调节细胞生长、分化。它由配体结合的跨膜受体激活,随机通过细胞质进入细胞核,在细胞核中作为转录因子激活TGF-β靶基因的表达。泛素-蛋白酶体通路(ubiquitinproteasomepathway,UPP)是一种细胞胞质和核内蛋白ATP依赖性的非溶酶体降解机制,具有高度选择性地进行细胞内蛋白质的降解。该文重点介绍Smad通路的泛素-蛋白酶体通路依赖性的蛋白质降解机制。
- 李靖张悦韩志芬庞慧芳李玉梅刘克剑
- 关键词：SMAD通路泛素-蛋白酶体通路蛋白质降解
- 中药抗纤灵抗肾纤维化信号传递机制的研究
- 张悦刘煜敏刘克剑李靖周娟陆海英陆敏何立群韩志芬庞惠芳
- 肾纤维化是肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同病理基础。西医缺乏有效的治疗方法，深入探讨中医药抗纤维化作用的分子机制，将有助于阐明中医药抗纤维化的现代科学理论基础。抗纤灵是曙光医院临床长期使用的经验方。本文采用体内和体外实验相...
- 关键词：
- 关键词：肾纤维化抗纤灵中药信号传递
- 丹参酚酸B对肾纤维化大鼠肾组织MMP-2表达的影响被引量：34
- 2009年
- 目的:探讨丹参酚酸B(SA-B)对肾间质纤维化大鼠的作用及机制。方法:36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和SA-B治疗组。单侧输尿管结扎术(UUO)建立肾间质纤维化模型。造模的同时SA-B治疗组灌喂SA-B水溶液(12.5mg/kg)。第14、21天处死大鼠,观察肾功能的变化,HE和PASM染色光镜下观察肾组织的病理变化,用盐酸水解法检测肾组织中羟脯氨酸的含量,Westernblot法检测肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白抑制剂-2(TIMP-2)蛋白表达,明胶酶谱观察MMP-2活性。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血肌酐、尿素氮和羟脯氨酸的含量均有明显上升;肾小球正常,肾间质增宽,间质内有大量的炎性细胞和间质细胞出现,肾小管扩张较明显,后期可见到部分肾小管萎缩,肾小管的基底膜明显增厚;肾组织的MMP-2蛋白、活性和TIMP-2蛋白水平均高于同期假手术组。SA-B干预后,血肌酐、尿素氮和羟脯氨酸的含量明显降低;上述病理改变明显轻于模型组,肾组织的MMP-2蛋白、活性水平和TIMP-2蛋白表达明显减少。结论:SA-B可抑制肾组织MMP-2和TIMP-2的蛋白表达,从而改善UUO大鼠的肾间质纤维化和肾功能。
- 陆海英张悦刘煜敏陆敏周娟刘克剑李靖
- 关键词：丹参酚酸B肾间质纤维化基质金属蛋白酶-2
- 中药抗纤灵方对大鼠单侧输尿管梗阻所致肾纤维化的作用
- 目的：探讨中药复抗纤灵对大鼠单侧输尿管结扎（UUO）所致肾纤维化的作用及机制。方法：雄性 SD 大鼠20只,随机分为正常组（5只）、假手术组（5只）、模型组（5只）、抗纤灵治疗组（5只）。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维...
- 张悦刘克剑刘煜敏李靖何立群庞惠芳徐伟珍
- 关键词：抗纤灵方单侧输尿管梗阻肾间质纤维化肝细胞生长因子
- 文献传递
