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杂交兰转录组SSR信息分析及EST-SSR标记开发应用被引量：5: 2020年; 该研究主要开发筛选适用于杂交兰的EST-SSR引物,为杂交兰种质资源评价和遗传变异研究等提供可靠的分子标记。该研究对杂交兰进行转录组高通量测序,挖掘SSR位点和开发EST-SSR标记,并对不同种质的遗传多样性进行分析。结果表明,从31724条杂交兰Unigene中检测出18603个SSR位点,SSR出现频率为58.64%;SSR位点中的主导类型是单核苷酸重复,占总SSR的65.10%,其次是二核苷酸(23.56%)和三核苷酸(10.76%)重复;优势重复基元为A/T、AG/CT、AT/AT和AAG/CTT,分别占总位点的64.72%、13.74%、8.19%和2.51%。利用Primer Premier 5.0共设计了565对SSR引物,从筛选出的64对有效扩增引物中随机选择28对引物,对40份杂交兰种质进行多态性验证与遗传关系分析,其中16对(占57.14%)引物表现出可重复的高多态性,平均多态信息量(PIC)达0.789。基于扩增的多态性SSR信息,40份种质资源可聚为4类,聚类结果与其遗传背景基本一致。该研究印证了转录组测序获得的Unigene是SSR标记开发的有效来源,开发的EST-SSR引物可为杂交兰及近缘种的良种鉴别、遗传图谱构建、分子标记辅助育种及功能基因挖掘等提供有价值的候选标记。; 钟淮钦林榕燕林兵吴建设樊荣辉叶秀仙; 关键词：杂交兰转录组 EST-SSR 多态性

文心兰花粉活力与杂交结荚性研究被引量：11: 2015年; 为分析文心兰花粉活力与杂交结荚性，以20个文心兰种质为材料，利用2，3，5-氯化三苯基四氮唑对花粉活力进行测定，并配制杂交组合进行杂交授粉试验。结果表明：文心兰花朵开放当天其花粉活力最高，不同品种间花粉活力有差异，其中16个种质的花粉具有活力，活力变化范围为2．00％～72．33％；以花粉具有活力的品种作为父本，共配制杂交组合27个，其中14个组合获得发育成熟的果荚，结荚率变幅为8．33％～94．83％，文心兰种间杂交结荚组合比率为70．00％，高于属间杂交的41．18％。; 罗远华黄敏玲林兵钟淮钦叶秀仙吴建设; 关键词：文心兰花粉活力杂交结荚率

杂交兰ChCAO基因克隆及其在叶艺品系中的表达特征: 2024年; 【目的】叶绿素酸酯a加氧酶(CAO)是叶绿素b形成过程中的关键酶,对杂交兰CAO基因进行克隆及表达特征分析可为探究其在杂交兰叶艺形成中的调控作用奠定基础。【方法】以杂交兰‘紫妍氏’(K21)及其叶艺品系‘中透紫妍氏’(K21-3)为试验材料,用RT-PCR和RACE技术从叶片中克隆获得ChCAO基因,对ChCAO进行结构特征、理化性质、序列比对以及系统进化关系等分析;用qRT-PCR法对ChCAO在不同组织及叶艺品系叶片中的表达特性进行分析;并用VIGS技术对ChCAO进行沉默表达。【结果】ChCAO基因编码区长1608 bp,编码535个氨基酸,ChCAO与墨兰CAO亲缘关系最近,并与其他兰科植物CAO聚为一类。qRT-PCR结果显示,ChCAO基因表达具有组织特异性,在叶中相对表达量最高,根中相对表达量最低;此外,ChCAO在K21绿叶和K21-3绿叶区域叶片中的相对表达量显著高于K21-3叶艺区域叶片中的相对表达量。构建该基因的VIGS沉默载体转化烟草,发现沉默ChCAO后烟草叶片呈黄化状态,叶片中的叶绿素含量及ChCAO基因的相对表达量也显著降低。【结论】克隆获得了杂交兰ChCAO基因,并对其功能进行了初步鉴定,为进一步研究杂交兰叶艺形成机理提供重要依据。; 林榕燕孔兰吴建设林兵钟淮钦; 关键词：杂交兰基因克隆

杂交兰无菌播种及根状茎培养技术研究被引量：6: 2019年; 以杂交兰品种台北小姐与小叶虎头兰杂交果荚、台北小姐自交果荚作为材料,比较了不同活性炭浓度对其种子萌发的影响,以及二者种子萌发形成的根状茎在同一种培养基中的增殖与分化情况。结果表明:添加活性炭1.0g·L^-1的培养基较适宜台北小姐自交组合种子无菌萌发,而台北小姐与小叶虎头兰杂交组合种子无菌萌发较适宜的培养基则为不添加活性炭;在1/2MS+6BA0.5mg·L^-1+IBA0.1mg·L^-1+活性炭1.0g·L^-1培养基中,台北小姐自交组合根状茎的增殖效果较好,而台北小姐与小叶虎头兰杂交组合根状茎分化较好。; 林榕燕陈艺荃林兵钟淮钦钟淮钦; 关键词：杂交兰无菌播种根状茎增殖分化

蝴蝶兰花青素苷合成途径关键酶基因的克隆与表达被引量：6: 2013年; 采用RT-PCR技术从蝴蝶兰‘满天红’花瓣中克隆获得花青素苷生物合成途径中CHS、DFR、F3′5′H和ANS等4个关键酶基因的保守序列,长度分别为302、275、285和285bp。序列分析表明:4个关键酶蛋白与石斛兰、大花蕙兰等其他植物来源的花青素苷生物合成相关蛋白均具有较高的同源性,分别为81%～95%、67%～91%、68%～92%和83%～89%。系统进化分析表明4个关键酶基因的系统进化基本上符合植物分类学分类。实时荧光定量PCR检测结果表明,CHS和F3′5′H基因在大花蕾期及始花期的表达量最高,盛花期表达量降低;在花瓣、唇瓣中的表达量大于萼片,在叶片、根中仅有微量表达。; 钟淮钦黄敏玲黄敏玲樊荣辉; 关键词：花青素苷基因克隆基因表达

观赏向日葵类胡萝卜素合成相关酶基因的克隆与表达: RT-PCR技术从观赏向日葵新品种'闽葵3号'花瓣中克隆到类胡萝卜素关键酶PDS、ZDS等2个结构基因的保守序列,序列分析表明这2个结构基因与已知其他植物均具有较高的同源性,分别为82％～95％和86％～...; 钟淮钦吴建设黄敏玲樊荣辉钟海丰; 关键词：向日葵类胡萝卜素合成基因基因克隆基因表达

一种文心兰杂交种子无菌播种的育苗方法: 本发明提供一种文心兰杂交种子无菌播种的育苗方法，选用成熟但未开裂的文心兰杂交蒴果，经预处理后，并通过种子萌发培养、原球茎分化培养、生根培养、试管苗移栽以达到快速育苗的目的。采用本发明育苗方法仅需5至7个月就能获得文心兰杂...; 罗远华黄敏玲钟淮钦樊荣辉叶秀仙吴建设; 文献传递

小苍兰3种病毒多重RT-PCR检测体系的建立被引量：4: 2012年; 根据GenBank中已发表的小苍兰花叶病毒Freesia mosaic virus(FreMV)、黄瓜花叶病毒Cucumbermosaic virus(CMV)和菜豆黄花叶病毒Bean yellow mosaic virus(BYMV)外壳蛋白(CP)基因序列保守区域分别设计特异性引物,通过优化多重PCR反应条件,建立能同时检测小苍兰3种病毒的多重PCR检测体系。该体系能够一次扩增出FreMV、CMV和BYMV的特异片段,其大小分别是340、628和212bp。测序结果表明,3种病毒序列与相应的参考序列相似性均达97%以上。灵敏度测定结果表明,从≥10-2 mg的感病植物组织中能够检测到这3种病毒。; 樊荣辉黄敏玲吴建设罗远华; 关键词：小苍兰病毒黄瓜花叶病毒菜豆黄花叶病毒多重PCR

鹿角蕨孢子萌发与快速繁殖技术研究被引量：3: 2020年; 【目的】建立鹿角蕨孢子萌发与快速繁殖技术体系,为鹿角蕨规模化育苗提供技术支撑。【方法】以鹿角蕨孢子为外植体,采用3种不同消毒方法进行孢子灭菌与萌发;利用正交设计法,探讨基本培养基(MS、改良1号和改良2号)及植物生长调节剂(6-BA、KT、NAA和IBA)等对绿色球状体(GGB)增殖、丛生芽增殖及生根培养等关键环节的影响,筛选出适宜的孢子消毒方法及GGB增殖、丛生芽增殖和生根培养基配方。【结果】适宜孢子消毒的方法为超声波清洗器振荡清洗40 min,污染率低,仅为6.7%,孢子萌发率高达100.0%;各试验因素对GGB增殖影响的主次关系为基本培养基>6-BA>CH>NAA,以改良1号为基本培养基较好,6-BA适宜浓度为0.5 mg/L,NAA适宜浓度为0.1 mg/L,CH适宜浓度为0.2 g/L,42 d平均增殖系数达5.5;各试验因素对丛生芽增殖影响的主次关系为IBA>6-BA>NAA>KT,IBA适宜浓度为0.5 mg/L,6-BA适宜浓度为0.3 mg/L,KT适宜浓度为0.1 mg/L,NAA适宜浓度为0.3 mg/L,60 d平均增殖系数达5.3;添加NAA 0.3 mg/L为最适浓度,生根率为100.0%;试管苗移栽60 d成活率达98.5%。【结论】超声波清洗器振荡清洗40 min能有效降低鹿角蕨孢子污染率,提高孢子萌发率。鹿角蕨GGB增殖培养基以改良1号+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1 mg/L+CH 0.2 g/L较适宜,丛生芽增殖培养基以改良2号+6-BA 0.3 mg/L+KT 0.1 mg/L+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.5 mg/L较适宜,生根培养基以改良1号+NAA 0.3 mg/L较适宜。; 叶秀仙陈艺荃方能炎吴建设钟淮钦; 关键词：鹿角蕨超声波正交设计快速繁殖

保鲜剂及冷藏对鹤望兰切花瓶插品质的影响被引量：4: 2006年; 本文探讨不同保鲜剂、预处理液及冷藏时间对鹤望兰切花瓶插寿命和观赏品质的影响。结果表明,供试的8组瓶插保鲜液中,以配方5%S+300mg/L8-HQC+100mg/LCA+150mg/LSTS+100mg/LCoCl2+25mg/LEDTA-Na保鲜效果最佳,切花瓶插寿命(23.5d)比CK延长15.2d,小花开放率(56.1%)比CK提高1.19倍。供试的5组冷藏预处理液中,以10%S+300mg/L8-HQC+75mg/LKH2PO4.3H2O效果最佳,切花经过2～3周8～10℃冷藏后,瓶插寿命(13.7d)比CK延长7.9d,小花开放率(43.6%)比CK提高98.2%;该处理组鹤望兰切花的适宜冷藏时间可延长为3周。; 陈源泉陈诗林黄敏玲林兵吴建设叶秀仙; 关键词：鹤望兰切花保鲜剂预处理冷藏瓶插寿命

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吴建设

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