周希
- 作品数：34 被引量：24H指数：3
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- Pax-8基因敲除小鼠心脏中NR4A1基因表达上调被引量：2
- 2011年
- 目的:寻找先天性心脏病室间隔缺损相关基因——转录因子Pax-8保护细胞凋亡的途径。方法:提取Pax-8基因敲除小鼠纯合子(Pax-8 KO-/-)和杂合子(Pax-8 KO+/-)的心脏总RNA,利用小鼠基因的基因芯片检测两组小鼠基因表达水平,找出差异表达的基因,并经半定量RT-PCR和荧光实时定量PCR技术初步筛选出转录因子Pax-8的下游基因。结果:基因芯片检测发现,与Pax-8 KO+/-组相比,在Pax-8 KO-/-小鼠中有25个基因表达下调,17个基因表达上调。用半定量RT-PCR验证发现,nuclear receptor sub-family4,group A,member 1(NR4A1)基因在Pax-8 KO-/-组上调。定量RT-PCR亦证实在Pax-8 KO-/-组NR4A1基因的表达水平较Pax-8 KO+/-组及Pax-8+/+(野生型)组分别上调1.53倍和4.79倍(P<0.01)。结论:NR4A1基因受Pax-8基因调控,在Pax-8保护细胞凋亡途径中发挥作用。
- 黄晓燕高瞻周希梁万前陈锡文陈通克杨德业
- 关键词：室间隔缺损细胞凋亡小鼠
- 氯沙坦对自发性高血压大鼠肾脏组织Bcl-2和Bax表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨氯沙坦对自发性高血压(SHR)大鼠肾脏组织Bax、Bcl-2表达的影响。方法:将40只11周龄雄性SHR大鼠随机分成4组:氯沙坦组[氯沙坦30 mg/(kg.d),灌胃]、培哚普利组[培哚普利2 mg/(kg.d),灌胃]、氨氯地平组[氨氯地平6 mg/(kg.d),灌胃]和对照组各10只,另设11周龄雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作正常对照组(n=10)。实验前及实验开始后测大鼠尾动脉收缩压1次/4周。饲养并灌胃8周后,收集肾脏组织,采用荧光定量PCR法和免疫组化法检测各组肾脏细胞凋亡因子Bax、Bcl-2表达的情况。结果:氯沙坦、培哚普利、氨氯地平均能显著降低SHR大鼠的收缩压,各组间差异无统计学意义。其中氯沙坦能显著降低SHR大鼠肾脏组织中Bax的表达(P<0.01),增加Bcl-2的表达(P<0.01),而培哚普利组、氨氯地平组无明显作用。结论:三种降压药均有明显的降压作用,其中氯沙坦在高血压病程中可抑制细胞凋亡因子Bax和促进Bcl-2的基因及蛋白质表达。
- 林娜娜黄晓燕施翔翔周希王本极杨德业
- 关键词：氯沙坦细胞凋亡自发性高血压
- RNA干扰下调高血压相关基因SLC7a8
- 目的通过RNA干扰(RNAi)技术选择性下凋大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)高血压相关基因SLC7a8的表达,探讨该基因在高血压发病机制中的作用。方法设计并合成3个针对大鼠SLC7a8基因的特异性siRNA片段(si...
- 杨德业张敏黄晓燕周希施翔翔黄芳张怀勤
- 文献传递
- siRNA干扰SLC7a8对NRK-52E细胞摄取左旋多巴的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:通过RNA干扰(RNAi)技术选择性下调高血压相关基因SLC7a8的表达,探讨对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)摄取左旋多巴的影响。方法:设计并合成3个针对大鼠SLC7a8基因的特异性siRNA片段(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3),以含非特异性编码序列的siRNA-con为对照。将上述3个片段及阴性对照通过阳离子脂质体法转染至NRK-52E内,通过流式细胞仪估算转染效率后经RT-PCR初步筛选高效率干扰片段,用Western blotting检测蛋白水平的干扰效率,采用紫外分光光度法检测空白对照组(blank)、siRNA-con转染组和SLC7a8基因特异性沉默组不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120min)NRK-52E内左旋多巴的浓度。结果:流式细胞仪测定siRNA转染NRK-52E效率为94%,RT-PCR初步筛选结果显示siRNA-1、3干扰效率较高,Western blotting检测显示siRNA-3组在蛋白水平的干扰效率较高,而对照组siRNA-con与空白对照组(blank)的SLC7a8表达差异不明显。通过紫外分光光度法检测NRK-52E对左旋多巴的吸收结果显示干扰组不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120min)细胞内左旋多巴浓度均低于siRNA-con转染组和空白对照组;对照组siRNA-con与空白对照组相比则无明显差异。结论:RNA干扰技术能选择性下调大鼠肾小管上皮细胞SLC7a8的表达水平;SLC7a8基因特异沉默后NRK-52E对左旋多巴的摄取在各个不同时点(6、12、24、36、48、60、72、120min)均降低。
- 张敏黄晓燕周希施翔翔黄芳张怀勤杨德业
- 关键词：RNA干扰肾小管上皮细胞左旋多巴
- Pax-8在ALK3基因敲除小鼠心脏发育不同阶段中的表达
- 目的研究胚胎发育不同时间心脏特异性骨形态形成蛋白受体IA(BMPR1 A,又名AL K3)基因敲除小鼠心肌组织中的Pax-8的mRNA表达水平,提示Pax-8基因与ALK3基因的关系及其在心脏发育中的作用。方法实验组为心...
- 杨德业周希黄晓燕褚茂平高瞻戴晓春
- 文献传递
- Pax-8基因在大鼠心肌细胞凋亡中的作用被引量：10
- 2009年
- 目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠心肌细胞中转录因子Pax-8的表达,观察其对心肌细胞凋亡和增殖的影响。方法将H9C2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞分为3组:针对Pax-8基因的小干扰RNA(Pax-8 siRNA)组,非特异性siRNA(NCsiRNA)组和空白对照组。前两组分别给予相应siRNA(5μl)和Lipofectamine 2000(5μl)配制成的siRNA-脂质体复合物溶液,空白对照组给予等量的细胞培养基。采用RT-PCR和Western blotting测定Pax-8的mRNA和蛋白质表达,荧光光度法检测半胱天冬酶(Caspase)-3活性以反映细胞凋亡,CCK-8法检验细胞的增殖抑制率。结果与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8 siRNA组的Pax-8 mRNA表达分别下调60.30%(P<0.05)和63.09%(P<0.05),蛋白表达分别下调50.38%(P<0.05)和54.17%(P<0.05),而NCsiRNA组与空白对照组间无显著差异(P>0.05)。Pax-8 siRNA组的Caspase-3活性较NCsiRNA组和空白对照组明显升高(P<0.01),而后两者间无显著差异(P>0.05)。Pax-8 siRNA组的细胞增殖抑制率明显高于NCsiRNA组(P<0.01)。结论Pax-8 siRNA能选择性下调心肌细胞中Pax-8的表达,并促进细胞凋亡、抑制细胞增殖。
- 高瞻来丹丹张敏周希黄芳黄晓燕张怀勤杨德业
- 关键词：肌细胞心脏细胞凋亡RNA干扰室间隔缺损
- Pax-8基因真核表达载体的构建及其功能研究
- 杨德业周希黄晓燕陈长曦陈必成
- 线粒体功能在Pax-8基因干扰心肌细胞凋亡中的作用
- 杨德业戴晓春黄晓燕周希高瞻王本极
- 氯沙坦对SHR大鼠肾脏组织Bcl2和Bax表达的影响
- 杨德业林娜娜黄晓燕施翔翔周希王本极
- 大鼠SLC7a8基因的克隆及真核表达载体的构建
- 克隆大鼠左旋氨基酸转运体(SLC7a8)基因cDNA的读码框(CDS)，构建携带SLC7a8基因的重组真核表达载体，为进一步研究其在自发性高血压大鼠(SHR)中的功能作准备。
- 杨德业王本极黄晓燕林素周希戴晓春
- 关键词：真核表达载体基因克隆高血压肾脏组织
