目的:建立清热败毒颗粒剂的质量标准。方法采用薄层色谱法(TLC)鉴别处方中的板蓝根、连翘、紫花地丁和甘草,采用高效液相色谱法(HPLC)测定绿原酸的含量,色谱柱为Agilent ZORBAX SB唱C18柱(4.6 mm ×250 mm ,5μm);流动相为乙腈(A)与含0.2%甲酸的水溶液(B),梯度洗脱:0-12 min ,11%-12% A ;流速:1.0 ml/min;柱温:30℃;检测波长:327 nm ;进样量:20μl。结果薄层鉴别色谱中特征斑点明显,专属性强。绿原酸在6.19-396.00μg/ml浓度范围内呈良好线性关系,其回归方程为Y=60.2394 X+9.0963( r>0.9999),回收率为99.66%(RSD=2.82%)。结论该法简便、稳定可靠、重复性好,为控制清热败毒颗粒的质量标准提供了可借鉴的依据。
目的:研究知母皂苷B-Ⅱ(TB-Ⅱ)抑制人肺癌A549细胞增殖和迁移的机制。方法:使用0(空白对照)、1、10、100μg/ml的TB-Ⅱ处理A549细胞48 h后,分别提取细胞总RNA及总蛋白,采用实时定量荧光-聚合酶链反应和Western blot法分别检测细胞内白细胞介素18(IL-18)m RNA及蛋白表达;通过转染沉默A549细胞内IL-18基因,比较未转染组、阴性对照组和转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达,然后用10μg/ml的TB-Ⅱ处理转染后的细胞24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,划线法观察细胞迁移能力变化。结果:与空白对照比较,TB-Ⅱ处理后A549细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均增加(P<0.05或P<0.01),且与浓度呈正相关。与未转染组比较,转染组细胞内IL-18 m RNA及蛋白表达均降低(P<0.01);与TB-Ⅱ处理的未转染细胞比较,TB-Ⅱ处理72 h后的转染细胞增殖活性和迁移能力均增强(P<0.01)。结论:TB-Ⅱ可通过上调IL-18基因的表达来抑制A549细胞的增殖和迁移。