张可伟
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 供职机构：山东农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家转基因植物研究与产业化专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- MAR序列研究进展被引量：4
- 2002年
- MAR是与核基质结合的一段染色体DNA序列 ,将其连到目的基因两侧并转到生物体中 ,发现它能增加转基因表达水平 ,并能在一定程度上降低转化体之间转基因表达的差异。MAR序列已成为近几年来植物基因工程研究领域颇受关注的热点之一 ,许多MAR序列片段以及与之相结合的核基质蛋白已相继从不同生物中分离和鉴定。本文主要综述MAR序列的特征、作用机制。
- 王健美张可伟叶文静郑成超
- 关键词：MAR序列核基质转基因表达
- 植物MAR序列的分离鉴定与高效表达载体的构建
- 转基因技术广泛应用于物种改良和分子生物学的基础研究，随着大量转基因植株的获得，人们发现外源基因沉默和外源基因表达量过低的问题普遍存在。造成基因沉默原因很多，主要有甲基化、位置效应、共抑制、染色体包装方式及反式作用等。如何...
- 张可伟
- 关键词：核基质体外结合外源基因表达高效表达载体
- 文献传递
- 一个烟草强核基质结合序列及其分离鉴定方法与应用
- 一个烟草强核基质结合序列(MAR)及其分离鉴定方法和应用，属细胞生物学和真核基因表达调控领域。具体涉及从烟草基因组中分离出一段新的强MAR序列，具有典型的MAR序列特征，在体外与核基质有较强的特异结合能力。将该MAR序列...
- 郑成超张可伟王健美杨国栋
- 文献传递
- 6个植物MARs序列的ARS功能鉴定与分析被引量：2
- 2003年
- 利用酵母表达系统,对来自烟草和拟南芥的6个植物MARs序列分别进行了ARS功能鉴定.结果表明,在酵母细胞内,TM1和AM4有强的自主复制功能,其活性与来自酵母染色体的ARS相当,其他4个植物MARs序列无ARS活性.为了进一步分析植物MAR序列中ARS的活性区,利用PCR方法对TM1和AM4进行亚克隆,相应的亚克隆分别命名为TM1—1,TM1—2,TM1—3,AM4—1,AM4—2和AM4—3.实验发现,TM1—3和AM4—3不仅具有比完整MARs更高的ARS活性,而且在酵母转化效率、转化稳定性及生长速度方面也优于完整片段.本研究结果为阐明MAR的作用机制与自主复制功能的关系提供了重要线索.
- 李宏杨予涛张可伟郑成超
- 关键词：植物酵母核基质染色体
- 核基质结合序列(MAR)与基因表达调控被引量：6
- 2004年
- 核基质结合序列 (MAR)是能在体外与核基质特异结合的DNA序列 ,广泛存在于染色质Loop结构的边界序列中。随着研究的深入 ,发现MAR序列不仅在染色质折叠中起到重要作用 ,影响邻近内源基因表达 ,而且将MAR序列构建到外源基因表达盒两侧转化动植物时 ,也影响外源基因的表达。因此 ,MAR序列是基因组中一种重要的基因间边界序列 ,为阐明非编码序列在基因表达中的作用和构建真核生物高效表达载体提供了新途径。
- 张可伟王健美郑成超
- 关键词：染色质基因表达转基因沉默
- 强MAR的分离及其体内外功能鉴定被引量：15
- 2002年
- 将MAR（matrix attachment region）构建到外源基因表达盒两侧可以促进外源基因的表达克服基因沉默.用PCR方法从烟草和拟南芥中分离到4个新的MAR序列（TM2,TM3,AM1和AM2）,以水稻悬浮细胞为材料,提取大量细胞核制备核基质,以已发表的MAR（TM1）为对照,对4个新MARs序列进行体外结合实验.结果表明TM2和TM3与核基质的结合能力强于已知MAR序列.将4个新MARs和对照分别顺向构建到表达载体pBI121 gus基因表达盒两侧,用农杆菌介导法转化烟草,获得转基因植株.对转基因植株体内GUS酶活性检测表明,TM1,TM2,TM3和AM1均能使外源基因表达增强,其中TM2增强5倍,TM1增强1.5倍,TM2增强效果强于对照TM1.表明分离到一个新的强MAR,可以用于高效表达载体的构建.对5个MARS的序列特征、体外结合能力及外源基因表达影响三者之间的关系进行了分析,并对获得的强MAR在植物基因工程中的应用进行了讨论.
- 张可伟王健美杨国栋郭兴启温孚江崔德才郑成超
- 关键词：体外结合外源基因表达高效表达载体植物基因工程
