张杰
- 作品数：40 被引量：117H指数：6
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 人肝细胞核因子4α联合组蛋白去乙酰化酶和甲基化转移酶抑制剂诱导成纤维细胞转分化为肝细胞的研究
- 2017年
- 目的 利用人肝细胞核因子4α（HNF4A）与表观遗传修饰[组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）＋甲基化转移酶抑制剂（DNMTi）]联合诱导人成纤维细胞向肝细胞转分化，建立更为高效、新型的肝细胞转分化方法。
方法取第6～8代人皮肤成纤维细胞，置于5’氮杂胞苷（5-AzaC）与丙戊酸（VPA）中，并感染HNF4A重组慢病毒共同诱导20 d。用倒置相差显微镜动态观察诱导过程中的细胞形态变化，实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测并分析肝细胞特异性基因的表达，吲哚菁绿摄取实验、糖原过碘酸-无色品红（PAS）染色和尿素合成功能实验验证生物学功能。
结果 诱导过程中，细胞形态逐渐由长梭形转变为上皮样形态，并逐渐开始过表达肝特异基因及表现生物学功能。诱导第20天，细胞在形态学上有明显肝细胞上皮样变化，胞质丰富、核大而圆深染且核仁明显；Real-time PCR检测肝特异性基因均有不同程度的表达上调，以白蛋白（ALB）及转铁蛋白（TF）最显著，分别为118%及250%，差异有统计学意义（t＝7.418、5.131，P＝0.002、0.001）；吲哚菁绿摄取实验结果显示约35%呈阳性细胞；70%细胞呈糖原PAS染色阳性；尿素合成动态检测可见诱导细胞尿素分泌量呈逐增多趋势，到达肝样细胞（iHEPs）期（第20天），每106个细胞合成的尿素氮量达到了等量正常肝细胞合成的55%，即iHEPs从生物学功能上均显示转分化肝样细胞肝功能部分接近正常肝细胞水平。结论 HNF4A与表观遗传修饰（HDACi＋DNMTi）可以联合诱导人成纤维细胞转分化为肝细胞样细胞，肝样细胞在基因表达及生物学功能部分接近正常肝脏细胞。
- 邓洁敏伍耀豪曾乐祥蒋雯丽张杰周嘉嘉邱荣林陈子月邓小耿
- 关键词：肝细胞转分化组蛋白去乙酰化
- 112例改良腹腔镜脾切除术治疗儿童血液病的临床研究
- 目的 总结改良腹腔镜脾切除术治疗儿童血液病的经验和特点.方法 回顾性分析2005 年3 月至2014 年6 月112 例由同一主刀医师行腹腔镜脾切除术的血液病患儿的临床资料.其中,男性63 例,女性49 例,平均年龄8....
- 邓小耿伍耀豪曾乐祥周嘉嘉张杰邱荣林
- 左侧胎儿横纹肌样肾母细胞瘤1例分析被引量：2
- 2011年
- 患者男,2岁6个月,2010年3月8日因＂发现左侧腹部包块10d＂入院,入院时食欲胃纳好,无发热,无咳嗽、无咳痰,大小便通畅,无血尿,无尿频尿急。入院查体：神清、精神好,营养中等,
- 伍耀豪邓小耿张杰周嘉嘉曾乐祥
- 关键词：肾母细胞瘤横纹肌样胎儿入院查体腹部包块
- 应用商环行小儿改良包皮环切术800例治疗体会
- 2014年
- 目的探讨应用商环行改良包皮环切术的临床效果。方法应用商环行改良性包皮环切术,用3把血管钳提起包皮口,将商环内环倾斜塞入龟头与包皮内板之间,再将商环外环套于包皮外板外并卡紧,对800例患儿行包皮环切术,分析其手术时间、出血量、脱环时间、术后并发症、术后外观满意情况。结果手术时间为4.65±1.25 min,平均出血量<3 mL,术后并发症主要为感染0.50%(4/800)、包皮明显水肿3.12%(25/800)、伤口裂开0.25%(2/800)、伤口出血0.25%(2/800),脱环时间14±5 d,术后再粘连2.25%(18/800),外观满意率达99.38%(795/800),98.13%(785/800)的家长觉得治疗费用合理。结论应用商环行小儿改良包皮环切术,手术时间短、出血量少、术后并发症少、外观满意率高,是治疗小儿包茎、包皮过长的良好方法,具有优势。
- 曾乐祥邓小耿伍耀豪张杰周嘉嘉邱荣林
- 关键词：改良包皮环切术商环脱环
- 394例小儿可触及隐睾的腹腔镜治疗体会被引量：1
- 2022年
- 目的:探讨腹腔镜在小儿可触及隐睾手术中的应用价值。方法:分析了2012年1月至2020年6月,我院小儿外科收治的394例隐睾患儿,分别施行腹腔镜睾丸下降固定术;腹腔镜结扎鞘状突,直接于阴囊取切口行睾丸下降固定术;腹腔镜打开同侧鞘状突,将睾丸拉入腹腔分离,再行睾丸下降固定术。结果:394例可触及隐睾患儿中双侧隐睾有113例(28.7%),右侧隐睾有160例(40.6%),左侧隐睾有121例(30.7%)。其中有325例存在一侧或双侧鞘状突未闭,均在术中同时行腹腔镜下鞘状突高位结扎术。另有6例患儿,术中发现同侧鞘状突已闭合,但睾丸位于腹股沟中段,遂于腹腔镜下打开鞘状突,将睾丸拉入腹腔分离后行睾丸下降固定术。394例患儿均能Ⅰ期将睾丸下降及固定于阴囊,术后均不存在腹股沟区切口。结论:腹腔镜下治疗小儿可触及隐睾,可以更彻底地分离精索血管及输精管,创伤小,手术效果好,术后美观,在临床中值得推广。
- 曾乐祥伍耀豪廖敏仪邱荣林苏健航周嘉嘉张杰郭正辉邓小耿
- 关键词：小儿腹腔镜睾丸下降固定术
- 小儿腹腔镜阑尾切除与开腹阑尾切除的临床对比研究被引量：8
- 2013年
- 目的 对比研究小儿腹腔镜阑尾切除术（LA）与传统开腹阑尾切除术（OA）的临床疗效及安全性.方法 回顾性分析2009年1月～2012年12月期间进行LA和OA的93例小儿阑尾炎患者的临床资料,对两组手术时间、术中出血情况、术后恢复情况等进行统计对比分析.结果 两组患儿手术及恢复顺利,术后无严重并发症.两组手术时间及术中出血量差异均无统计学意义（P＞0.05）;LA组术后肛门排气时间、下床活动时间、切口疼痛时间、术后住院天数均低于OA组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 与OA比较,小儿LA具有创伤小、并发症少,恢复快及美容等优势,是治疗小儿阑尾炎理想的手术方式.
- 周嘉嘉邓小耿张杰伍耀豪曾乐祥邱荣林陈汝福
- 关键词：小儿阑尾切除术腹腔镜开腹手术
- 应用淤胆血清“病理微环境”从ESC中筛选肝干细胞的研究被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨淤胆血清"病理微环境"培养体系诱导胚胎干细胞(ESC)向肝细胞分化的效果及对肝干细胞的筛选作用。方法:将小鼠ESC细胞系E14在无白血病抑制因子培养基中培养,使其自发分化为拟胚体,加入FGF-4和HGF初步诱导,然后置于5%淤胆鼠血清"病理微环境"筛选培养液中继续培养2周,然后进行细胞形态学观察,ALB和CK8/18免疫荧光染色,电镜检查和吲哚氰绿(ICG)摄取试验。结果:经初步诱导分化的ESC置于5%淤胆血清"病理微环境"筛选培养液中培养,初期细胞生长受抑制,部分细胞坏死、凋亡并脱落。1周左右可见上皮样细胞集落呈优势生长。2周左右可见较多肝细胞样集落形成单位(H-CFU),大部分细胞分化为多角形的肝细胞样细胞,呈现较好的均质性,从中央到周边呈逐渐分化成熟的趋势;免疫荧光染色显示ALB和CK8/18表达;电镜检查可见与肝细胞相似的超微结构;吲哚氰绿(ICG)摄取试验可见大量ICG阳性细胞,提示这些细胞具备部分肝细胞特性,且筛选诱导组ICG阳性率显著高于对照组(P<0.05)。结论:采用含淤胆血清的"病理微环境"培养体系从经FGF-4和HGF初步诱导的胚胎干细胞中有效筛选出了具有功能的肝细胞样细胞。
- 李治熹邓小耿张杰周嘉嘉伍耀豪谢平邱荣林
- 关键词：胚胎干细胞肝细胞移植诱导分化
- 体外诱导小鼠胚胎干细胞分化为肝细胞的研究被引量：6
- 2006年
- 目的 基于肝脏发育生物学进展，建立有效诱导胚胎干细胞（ESC）向肝细胞分化的体外培养体系。方法 小鼠ESC细胞系E14，在内含1000U／ml的rmLIF的无饲养层高糖DMEM培养基中培养，去除rmLIF后用悬滴培养法制备成拟胚体。依次加入10^-7M的Dexamethasone、10μg／L的FGF-4、25μg／L的HGF等诱导因子，继续培养1～2周。然后取分化细胞，行细胞形态学观察、免疫细胞化学染色检测白蛋白和CK8／18的表达、RT-PCR检测白蛋白和转甲状腺蛋白等肝细胞特征性蛋白的mRNA转录水平。糖原染色、尿素合成功能检测则对其功能进行检验。结果 ESC体外培养生长旺盛，呈”巢状”克隆性增殖。去除rmLIF后悬浮培养，一般2～3d可制备成拟胚体。序贯加入Dex、FGF-4和HGF等诱导因子进行分化培养后，约于ED12可见分散、克隆样增殖的小上皮样细胞集落，ED19左右有较多细胞分化为多角形的肝细胞样细胞。免疫组化染色，见胞浆内出现棕黄色颗粒，表达肝细胞特有的白蛋白以及CK8／18等蛋白。RT-PCR显示有白蛋白、转甲状腺蛋白等的mRNA转录。糖原染色见胞浆内存在红色颗粒，呈阳性反应；尿素合成功能检测显示，培养液内可见尿素氮的逐日升高，说明细胞具有肝细胞特有的糖原合成、尿素合成和分泌功能。结论 加入FGF-4、HGF和Dex等肝脏胚胎发育时期的关键性调控因子的体外培养体系可以诱导胚胎干细胞分化为肝细胞样细胞。
- 邓小耿闵军张杰曾炳胜方天翎陈积圣
- 关键词：细胞培养动物实验替代试验
- 腹腔镜下小儿肝母细胞瘤切除术(附两例报道)
- 背景及目的 相比较常规肝手术而言,小儿腹腔镜手术存在视野小,操作空间受限等因素,在肝肿瘤切除时亦增加出血及胆瘘的并发症可能性.本文通过两例小儿腹腔镜肝母细胞瘤切除病例报道,对手术进行总结.临床资料 自2013 年到201...
- 张杰邓小耿陈亚进张磊周嘉嘉伍耀豪曾乐祥
- 腹腔镜下单孔法治疗小儿腹股沟斜疝的优势探讨被引量：7
- 2013年
- 目的通过比较腹腔镜下单孔法及双孔法治疗小儿腹股沟斜疝的临床应用,探讨腹腔镜下单孔法在治疗小儿腹股沟斜疝中的优势。方法通过回顾性分析我科自2006年1月至2011年3月收治的80例小儿腹股沟斜疝患儿,分别采用腹腔镜下双孔法及单孔法缝扎腹股沟斜疝单侧疝囊内环治疗,每组各收治40例,年龄在6个月到5岁范围。结果在缝合正常大小内环口的病例中,腹腔镜下单孔法缝扎单侧内环口操作时间平均为11.8min(手术用时范围10～13min),双孔法操作平均时间为12.3min(手术用时范围11～14min);而在缝合较大内环口的用时时间上,单孔法手术用时明显较双孔法手术时间短(11.3min,14.23min)。术后随访平均6个月(3个月～1年),手术患儿均无腹股沟斜疝复发。结论相比较腹腔镜下双孔法高位结扎腹股沟疝疝囊,采用腹腔镜下单孔法高位缝扎腹股沟斜疝疝囊,不仅具有美观、创伤小的优势,同时操作时间较短,更适合治疗较大内环口的腹股沟斜疝。
- 张杰邓小耿伍耀豪周嘉嘉曾乐祥丘荣林
- 关键词：腹股沟斜疝儿童
