张燕霞
- 作品数：60 被引量：389H指数：11
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划广西壮族自治区科技攻关计划陕西省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2011年
- 本研究在CSFV 5′端非编码区设计一对引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的重组质粒为标准品,建立了一种检测CSFV的荧光定量PCR方法（FQ-PCR）,对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,可特异地检测CSFV,该方法在101~107拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,灵敏度可达10拷贝/μL,重复检测的变异系数均小于5%。临床样品检测表明建立的方法与套式PCR灵敏度相近。结果表明该方法重复性良好,可用于临床诊断。
- 任夫波张志张丽丽杨若松韩艳张燕霞李晓成单虎
- 关键词：猪瘟病毒荧光定量PCRTAQMAN探针
- 猪圆环病毒2型湖南株的分离与序列分析被引量：6
- 2010年
- 为了解湖南省猪群中猪猪圆环病毒2型（PCV-2）的流行变异情况，从2003年-2008年湖南省疑似PMWS病死猪组织中分离获得7株PCV-2流行毒株，分别命名为HuN-03、HuN-05、HuN-0601、HuN-0602、HuN-0701HuN-0702、HuN-08。用PCR方法对这7株病毒进行全基因扩增及测序分析。结果显示，7株PCV-2分离株基因组全长均为1767bp，有典型的PCV-2基因组结构；病毒毒株间同源性在94．9％～99．3％之间，与GenBank中的13株PCV-2基因组同源性在93．6％～99．7％之间，与2株PCV-1亲缘关系较远，同源性只有75．7％～76．5％；在遗传演化关系上，7株分离株分属4个进化方向，HuN-0601可能是外来毒株，HuN-03在一个独立的进化方向内，可能是其他5株病毒的母源性毒株，其他5株病毒可能代表了两个遗传种群，一个是国际流行稳定毒株，一个是国内地域性流行毒株。
- 何世成刘道新张志鲁杏华吴发兴邹敏谈志祥郭成玲张燕霞
- 猪源牛病毒性腹泻病毒的流行初探被引量：43
- 2008年
- 根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)代表株NADL的NS5B基因序列,设计合成2对引物进行套式PCR,检测从浙江、安徽、湖南、江西、广西、辽宁等地采集的43份猪病料中BVDV的流行情况,结果有7份病料可以扩增出360bp的特异性条带,阳性率为16.3%。为追踪BVDV在猪体中的流行来源,我们又对细胞培养用国产及进口犊牛血清进行了检测,结果也能扩增到目的条带。对这些病料和血清中扩增出的目的条带进行克隆、测序,并用DNASTAR软件分析,结果表明这些目的片段均为BVDV序列,这些不同BVDV序列可以分为两个亚群,ZJ133、HN386、LN247、NCS-J属于BVDV-Ⅰa亚型,ZJ114、AH138、JX60、GX96、NCS-G、DZ属于BVDV-Ⅰb亚型。这些毒株与BVDVI型间的同源性为80.3%-98.6%,与BVDV-Ⅱ型的同源性为72.2%-74.4%。本文研究结果说明我国猪群中BVDV感染情况已经比较严重,应该予以重视。
- 宋永峰张志张燕霞吴发兴李晓成
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒
- 蓝舌病毒群特异性RT-PCR检测技术及其应用被引量：2
- 2008年
- 目的:建立一种适于蓝舌病毒(BTV)群特异性基因检测的RT-PCR方法。方法:根据本实验室设计的一对BTVNS1基因通用型检测引物建立BTV群特异性RT-PCR检测技术;对不同血清型BTV及鹿流行性出血热病毒(EHDV)进行检测,验证其特异性;同时,利用该方法检测血清模拟样品及抗病毒血清样品。结果:所设计的检测方法特异性好,与EHDV无交叉反应,可检测至少17个血清型BTV,并能有效检出不同病毒浓度的模拟样品及不同型的血清样品。结论:建立的RT-PCR方法可用于BTV群的特异性通用检测。
- 尹惠琼张燕霞孙宇张兰兰孙卫华杨姝李晓成章金刚
- 关键词：蓝舌病毒BTV
- 7株猪圆环病毒2型ORF2基因的克隆及序列分析被引量：3
- 2011年
- 根据GenBank中猪圆环病毒2型的ORF2序列,设计1对引物,运用PCR方法,对中国动物卫生与流行病学中心监测室从福建、湖南和辽宁3省分离的7个毒株进行ORF2基因扩增。将其克隆到pGEM-Teasy载体,筛选阳性重组质粒进行测序。应用DNAstar软件将测序结果与国内外参考毒株进行比对,并对Cap蛋白的细胞表位、糖基化位点等进行分析。结果表明,HUN、HUN-2和LN-19分离株ORF2基因大小为702bp,编码233个氨基酸;FJ-3、FJ-4、HUN-11和LN-3的ORF2基因大小为705bp,编码234个氨基酸。Cap蛋白5个表位区A(47～63)、B(65～87)、C(113～139)、D(165～200)和E(C端最后4个氨基酸)均发生一定变异。同源性分析表明,24株序列同源性为90.5%～99.9%,FJ-3与美国株同源性最低(90.5%),HUN和AF055393、DQ180392同源性最高(99.9%);FJ-3和FJ-4为94.5%,HUN-11和HUN-2为94.3%,HUN和HUN-2为99.3%,HUN和HUN-11为95%,LN-3和LN-19为94.7%,表明各地区ORF2基因比较稳定,但也存在一定差异。
- 程伟张志吴发兴张燕霞李晓成陈德坤
- 关键词：猪圆环病毒2型克隆
- 猪生殖与呼吸综合征病毒HN6株ORF5基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 2007年
- 用RT-PCR方法从河南分离的1株(HN6)猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸中扩增缺失N端疏水序列的基因片段dORF5(deleting ORF5),并将其克隆到pMD18-T载体中测序,再亚克隆到原核表达载体pET-32a上。重组质粒转化大肠杆菌BL21,用不同浓度IPTG分别于37℃诱导,经SDS-PAGE分析,所表达的融合蛋白的分子质量约31.4 ku,薄层扫描分析显示,表达量占菌体总蛋白含量的28.8%。Western-blotting结果表明,重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。证实,该蛋白可用于PRRSV的诊断。
- 郭爱英吴发兴陈杰郑喜邦李晓成张燕霞黄保续
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达
- 猪蓝耳病病毒通用RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：10
- 2011年
- 参考Genbank发表的美洲型猪蓝耳病病毒(Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome Virus,PRRSV)VR-2332、CH-1a、JXA1等毒株的主要结构蛋白基因序列,设计了一对引物,扩增目的片段为690 bp,进行了RT-PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了美洲型PRRSV通用RT-PCR检测方法。应用此方法对2009年1-12月收集的126份临床样品进行了检测,检出率达44.4%。符合性检测结果表明,该方法比高致病性PRRSV检测方法具有更广的监测范围。该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于PRRSV的临床发病检测及流行病学监测等工作。
- 张燕霞吴发兴刘爽郑辉张志李晓成
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF
- Ghrelin的生物学功能及应用前景被引量：4
- 2008年
- 脑肠肽是在中枢系统和胃肠道双重分布的多肽,目前已经发现60多种。Ghrelin是1999年发现的一种含有28或27个氨基酸残基的内分泌激素,主要由胃粘膜的一种内分泌细胞分泌,也分布于其他许多组织中,如垂体﹑下丘脑和胰腺等,是一种脑肠肽。Ghrelin与其特异性受体结合后,会产生一系列生物学效应。
- 王楠吴发兴李晓成黄保续王洪斌张燕霞
- 关键词：GHRELIN
- 2011年我国猪病流行特征分析被引量：9
- 2012年
- 通过流行病学调查和实验室监测数据分析,认为2011年我国猪群疫病有以下特点:一是腹泻病成为影响猪群的重要疫病,二是多重感染非常普遍,三是圆环病毒感染居高不下,四是繁殖障碍仍然严重影响猪群,据此提出了加强管理、合理使用疫苗和兽药等疫病防控的具体措施,并期望猪伪狂犬病能成为下一个净化的疫病。
- 张志刘爽吴发兴郑辉张燕霞李晓成
- 关键词：猪病疫病防控
- 猪2型圆环病毒ORF2基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2007年
- 采用PCR方法从已构建好的猪圆环病毒2型(PCV2)全基因重组质粒(pMD18-T-PCV2)中扩增出大小为579bp的ORF2基因,克隆到表达载体pET-32a,经IPTG诱导,成功表达了ORF2基因编码的结构蛋白。表达的重组蛋白为融合蛋白,分子量40Ku,表达量20%左右。经Western-blot检测,重组蛋白可被PCV2阳性血清识别。
- 栾爽艳张志张燕霞单虎黄保续李晓成
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2基因
