张耀
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 相关领域：农业科学化学工程更多>>
- 马铃薯纺锤块茎类病毒山西分离物侵染性克隆的构建被引量：6
- 2012年
- 马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viriod,PSTVd)侵染马铃薯会严重影响薯块的产量和品质。根据PSTVd的同源序列设计引物,以山西省马铃薯感病块茎中提取的总RNA为模板,经RT-PCR方法扩增出全长cDNA片段,将其克隆到质粒pBS-T载体上,进行序列分析。结果表明,该类病毒全长359 nt,能通过分子内序列互补形成致密的二级结构。以该序列作为种子序列进行Blast搜索,该序列与PSTVd荷兰分离物(GenBank登陆号:AY372400.1)的序列一致性为100%。将该序列与东北株系、河北株系及已公布的弱株系(GenBank登陆号:M14814.1)、强株系(GenBank登陆号:U23058.1)、中间株系(GenBank登陆号:AY937179.1)比对,有12个核苷酸具有多态性,其中有5个发生在致病区。将线性化的质粒pBS-PSTVd及其PSTVd的体外转录产物接种番茄矮红宝的无毒苗,20 d后接种株轻微显症,RT-PCR检测均呈阳性。将RT-PCR产物测序,其结果与接种的PSTVd原序列完全一致,证实构建的PSTVd山西分离物的克隆具有侵染性。
- 白云凤闫建俊张耀张忠梁冯瑞云张维锋
- 关键词：马铃薯纺锤块茎类病毒体外转录侵染性克隆
- 籽粒苋AhNAD-ME的序列特征与表达被引量：2
- 2014年
- NAD(P)-苹果酸酶催化苹果酸氧化脱羧,产生丙酮酸和CO2,伴随NAD(P)的还原。在C4植物中,苹果酸酶参与了C4光合作用。本研究对克隆的双子叶C4植物籽粒苋NAD-苹果酸酶基因(AhNAD-ME)编码的氨基酸序列进行了生物信息学分析,结果表明,AhNAD-ME具有苹果酸酶的完整功能域,包括苹果酸N端结构域和苹果酸酶的NAD结合结构域;进化树表明,该序列属于NAD-ME的α亚基,该亚基定位于线粒体基质中。半定量RT-PCR分析表明,该基因主要在叶片和茎中表达,表达量随光照时间延长而增加。将AhNAD-ME基因重组到原核表达载体pEASY-E1中,电击法转化到大肠杆菌Transette(DE3)菌株中,IPTG诱导其高效表达,表达的融合蛋白的分子量与预期相符,主要以包涵体形式存在。
- 白云凤聂江婷张忠梁李平张维锋闫建俊冯瑞云张耀
- 关键词：籽粒苋原核表达
- RNA简约提取和无标记转化技术创新及应用
- 2015年
- 1项目简介
RNA化学性质活跃，易被RNA酶降解。为了灭活RNA酶，在RNA提取过程中，对器皿、器具等要高温烘烤、DEPC水浸泡，试剂需DEPC水配制。提取的RNA要用甲醛变性胶检测完整性。变性胶制作比较繁琐。
- 白云凤张维锋王国英冯瑞云赵晋锋张耀石红卫闫建俊聂江婷贺飞燕
- 关键词：RNA酶技术创新无标记简约化学性质
- 根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化的一些影响因素被引量：3
- 2013年
- 对根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化过程中涉及的外植体选择、预培养、共培养时间等因素进行优化。结果表明,马铃薯的茎段和叶片均能诱导出愈伤组织并分化成苗;在转化前对外植体预培养2d,再用OD600为0.5的农杆菌菌液侵染10min,共培养3d,转化效率较高。利用优化的农杆菌介导法进行转化,对再生苗进行PCR检测,结果表明,特异切割马铃薯纺锤块茎类病毒的核酶基因已导入了马铃薯。
- 闫建俊白云凤张忠梁冯瑞云张耀张维锋
- 关键词：马铃薯根癌农杆菌
- 玉米自交系秸秆品质性状鉴定评价及其相关分析被引量：5
- 2009年
- 对30份高油和30份普通玉米自交系秸秆的体外干物质消化率(IVDMD)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、可溶性糖(WSC)、酸性洗涤纤维(ADF)、酸性木质素(ADL)、中性洗涤纤维(NDF)7个品质性状进行了分析评价,比较了普通和高油系秸秆品质差异。结果表明,各品质性状变异较大,各性状自交系间差异均达极显著水平;不同品质性状变异程度不同,其中WSC变异最大,变异系数达33.49%;IVDMD与NDF,ADF,ADL极显著负相关,与WSC,EE极显著正相关,与CP显著正相关。根据青贮玉米育种的要求,筛选出5份IVDMD和WSC含量高、NDF和ADF含量低的自交系。高油系表现为高IVDMD,WSC和低NDF,ADF含量,总体上高油系秸秆品质优于普通玉米。
- 白琪林石平张耀
- 关键词：玉米高油玉米自交系秸秆品质性状
