未作君 作品数:21 被引量:207 H指数:9 供职机构: 北京大学 更多>> 发文基金: 教育部跨世纪优秀人才培养计划 天津市重点科技攻关项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 化学工程 生物学 医药卫生 理学 更多>>
悬浮培养南方红豆杉细胞的紫杉醇生物合成路径中诱导子的作用位点 被引量:1 2004年 作者研究开发出一种基于分析中间响应模式确定悬浮培养诱导子作用位点的新方法。研究结果表明,一个诱导子的作用位点存在于浓度变化方向相反的相邻两个中间代谢物之间;该方法的有效性在悬浮培养南方红豆杉(Taxus chinensis(Pilg.)Rehd.var.mairei(Lemee et Levl.)Cheng et L.K.Fu)生物合成紫杉醇过程中得以证实;经确定,甲基茉莉酮酸、硝酸根和柠檬酸铵的作用位点在baccatin Ⅲ 至10-去乙酰基紫杉醇之间;水杉酸、花生四烯酸的作用位点存在3种可能性,即增强10-去乙酰基紫杉醇的合成、防止紫杉醇和cephalomannine的降解。该方法对指导诱导子配伍优化紫杉醇生产具有指导意义。 苗志奇 元英进 任德锋 未作君 吴金川关键词:诱导子 紫杉醇 南方红豆杉 超临界CO_2流体萃取大黄游离蒽醌的研究 被引量:15 2006年 研究了带夹带剂的超临界流体萃取大黄中的五种有效蒽醌类物质(大黄酚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸和大黄素甲醚)的工艺,考察了萃取条件(温度和压力)、CO2流量、萃取时间、夹带剂种类等对大黄游离蒽醌萃取率的影响。通过正交实验对萃取釜条件(萃取压力、温度和夹带剂用量)进行了优化;采用液相色谱对萃取产物进行了分析。结果表明,分离釜的温度和压力、CO2流量等对萃取效率影响较小;最佳工艺条件为:静萃取时间为60min、动萃取时间为30min、以乙醇作夹带剂、乙醇用量300mL·(100g大黄)-1、萃取温度45°C、萃取压力45MPa。在此条件下大黄游离蒽醌的萃取量达1.15%。 未作君 林立 倪晋仁关键词:超临界流体萃取 游离蒽醌 夹带剂 红豆杉细胞两液相体系中紫杉醇的分离研究 被引量:12 2001年 基于紫杉醇的光敏性和热敏性特点 ,且以三元萃取方法从两液相培养红豆杉细胞的有机溶剂中提取紫杉醇又不理想的情况下 ,本文提出了有机溶剂 -紫杉醇 -水-甲醇的多元萃取方法 ,并分别测定出甲醇在甲醇 -水 -油酸和甲醇 -水 -混合有机溶剂 (油酸和邻苯二甲酸二丁酯 )休系分配系数变化趋势图 ;分别测定出紫杉醇在甲醇 -水 -油酸和甲醇 -水 -混合有机溶剂体系分配系数变化趋势图。 陈海涛 未作君 元英进关键词:紫杉醇 红豆杉细胞 渗透势及营养物含量对南方红豆杉细胞生长和紫杉醇合成的影响 被引量:1 1999年 从渗透势和营养物含量两方面研究了南方红豆杉(Taxus Chinensis Var.Mairei)液体悬浮细胞的生长规律,并对不同营养物含量下紫杉醇的合成进行了研究,结果表明渗透势改变了细胞培养过程中的干湿比,但对营养物吸收速率影响并不显著;1/2 B5培养基对红豆杉细胞系生长有利,而B5培养基则有利于紫杉醇的合成,频繁的换液有利于紫杉醇的胞外释放。 未作君 苗志奇 元英进 孙安慈 胡昌序关键词:渗透势 南方红豆杉 紫杉醇 细胞培养 紫杉醇生物合成途径中关键代谢产物的质量浓度变化模式 1999年 利用短期诱导实验,最大程度消除诱导子以外其它因素的影响。利用刺激响应机制,研究了在硝酸银、花生四烯酸短期诱导下,紫杉醇生物合成途径中关键代谢产物的质量浓度变化模式。实验表明,在10μmol/L硝酸银诱导下,Baccatin Ⅲ,10-DAB(10-deactyle-Baccatin Ⅲ)的质量浓度出现下降,同时紫杉醇的质量浓度提高到对照组的三倍,三种物质质量浓度变化呈现负相关;在0.1μmol/L花生四烯酸诱导下,Baccatin Ⅲ,10-DAB出现上升,同时紫杉醇质量浓度也比对照组高出三倍,三种物质质量浓度变化呈现正相关。诱导作用下的中间代谢产物的变化模式为从次生代谢水平对诱导子进行分类提供了依据,提供了诱导子对紫杉醇生物合成途径的影响信息与配伍信息。 苗志奇 未作君 元英进关键词:紫杉醇 硝酸银 花生四烯酸 植物细胞培养 溶胶-凝胶法制备Ni-SiO_2催化剂的表征与性能 被引量:22 2004年 以正硅酸乙酯和硝酸镍为原料,采用溶胶-凝胶法,将硝酸镍分别溶于水和乙醇制得凝胶,分别经超临界干燥和常规干燥制备了-系列Ni-SiO2气凝胶和干凝胶催化剂,运用BET、XRD、TPR、IR、H2-TPD和活性评价等方法对催化剂的物理化学性质和催化间二硝基苯加氢性能进行研究.结果表明,Ni-siO2气凝胶催化剂均具有较高的比表面积,但由于金属镍烧结导致活性比表面积较小,加氢性能较差;以乙醇为溶剂制备的干凝胶催化剂的镍物种分散度较高,但镍与载体之间的相互作用过强,致使催化剂的还原度降低,活性组分利用率下降;以水为溶剂制备的干凝胶催化剂具有较高的活性比表面积,表现出很高的催化活性和选择性. 刘迎新 未作君 陈吉祥 张继炎 李新学 魏雄辉关键词:溶胶-凝胶法 超临界干燥 镍催化剂 间二硝基苯 间苯二胺 超临界CO_2萃取大黄总蒽醌工艺研究 被引量:13 2006年 对大黄游离蒽醌的超临界萃取工艺进行了优化,确定最优萃取工艺条件为:静萃取时间60 m in,动萃取时间30 m in,夹带剂乙醇相对大黄用量3 mL/g,萃取温度45℃,萃取压力45 MPa。然后分别采用无机酸和生物酶对大黄结合蒽醌进行水解,以提取总蒽醌。结果表明:当盐酸浓度为5 mol/L,淀粉酶质量浓度为2 g/L,纤维素酶质量浓度为1 g/L时,大黄结合蒽醌的糖苷键达到最优水解,此时总蒽醌质量分数分别为2.46%、2.33%和2.23%。 未作君 林立 倪晋仁关键词:超临界萃取 结合蒽醌 酶水解 酸水解 硝酸银作用下南方红豆杉细胞悬浮培养生产紫杉醇动力学研究 被引量:11 2000年 研究了诱导子硝酸银对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的影响,表明10 μmolL~(-1)的硝酸银最有利于紫杉醇的生成.并通过动力学模型对硝酸银的作用位点进行分析,确定了硝酸银在紫杉醇代谢路径中的作用位点位于BaccatinⅢ和紫杉醇之间。 未作君 胡宗定 元英进关键词:红豆杉 硝酸银 作用位点 细胞悬浮培养 紫杉醇 溶氧浓度对东北红豆杉悬浮细胞的生理影响 被引量:3 2004年 研究了均匀溶氧体积浓度变化对东北红豆杉悬浮植物细胞的生理影响 ,结果表明纯氧(DO =35 0 )和缺氧 (DO =0和 1 0 )培养条件均抑制了细胞的呼吸 ,导致了细胞线粒体活性降低。缺氧培养条件下细胞内外可溶性蛋白含量变化不大 ,而在纯氧 (DO =35 0 )和DO =4 0的培养条件下 ,胞内可溶性蛋白呈现增高趋势。此外 。 未作君 元英进 倪晋仁关键词:溶氧浓度 东北红豆杉 酶活 可溶性蛋白 紫杉醇合成中甲基茉莉酮酸作用位点与配伍特性研究 被引量:13 2000年 在简化的紫杉醇生物合成途径基础上 ,提出了一种拟稳态转移模型。模型从诱导子作用下酶活力改变的角度 ,成功地解释了诱导子作用下紫杉烷含量的变化 ,并给出了不同位点酶活力的提高与各代谢产物浓度转移模式间的关系 ,提供了一种从中间代谢产物拟稳态的转移模式确定诱导子的作用位点的方法。在适宜浓度甲基茉莉酮酸(MJ)诱导下10去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10 -DAB)与巴卡亭Ⅲ(BaccatinⅢ)含量下降而紫杉醇含量上升;确定MJ在紫杉醇合成途径上的作用位点在BaccatinⅢ与紫杉醇之间 ,诱导子作用位点的确定为从机理上弄清诱导子的诱导机制提供了方向 ,奠定了多诱导子协同配伍方案的基础。 苗志奇 未作君 元英进关键词:紫杉醇 MJ 作用位点 诱导子 抗癌药物