李妍
- 作品数：21 被引量：24H指数：3
- 供职机构：北京市结核病胸部肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市科委国际合作项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 观察改良的药物敏感性检测法对检出耐药结核分枝杆菌的影响
- 2010年
- 目的利用经改良的最低抑菌浓度法（IMIC）检测结核分枝杆菌临床分离株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素和氧氟沙星的药物敏感性，观察其对耐药结核分枝杆菌检出的影响。方法利用改良的最低抑菌浓度法检测135株临床分离株对INH、RFP、EMB、SM及OFLX的敏感性。结果在相同的药物浓度中，与接种1×10 5／ml菌量的试验管相比135株接种1×10 7／ml活菌数的试管中有68．89％的结果与之相同，有311％的结果与之不相同。判断结果由阴性转阳性的标本共有20株，（其中耐RFP的1株、耐INH的3株、耐OFLX的3株、耐EMB的5株以及耐SM的8株）约占135株受试菌株总数的148％。结论利用改良的最低抑菌浓度法可发现潜在的耐药结核病患者，提高耐药菌的检出率。
- 张健源赵雁林孙照刚姜广路李妍王甦民刘毅聂理会高铁杰张治国任卫聪李传友
- 结核分枝杆菌对人急性白血病单核细胞株THP-1凋亡和死亡水平的影响被引量：1
- 2009年
- 目的通过对不同毒力的结核分枝杆菌感染细胞后的细胞凋亡和死亡程度的检测,以期发现结核分枝杆菌和细胞相互作用的新的方向和观点,以及对结核病免疫学发病机制的新认识。方法选用不同毒力的结核分枝杆菌H37Ra、H37Rv及北京基因型敏感菌株(BJTB)分别感染人的巨噬细胞THP-1细胞株,模拟细胞体外感染的过程。以流式细胞仪检测细胞凋亡水平,免疫荧光检测细胞的凋亡蛋白的分布,末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记染色检测细胞晚期凋亡的变化,台盼兰染色检测细胞死亡水平的变化。结果H37Ra引起THP-1细胞的凋亡水平最高,H37Rv次之,BJTB引起的凋亡水平最低。BJTB引起的死亡水平最高,H37Rv次之,H37Ra最低。结论毒力不同的结核分枝杆菌刺激细胞后和细胞的相互作用不同,毒力越高引起的凋亡水平越低,毒力越低引起的凋亡水平越高;对死亡水平的影响是毒力越高的结核分枝杆菌引起的死亡水平越高,毒力越低引起的死亡水平越低。
- 刘毅孙照刚任卫聪田苗李妍李传友
- 关键词：结核分枝杆菌北京基因型毒力
- 实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达被引量：1
- 2006年
- 目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象。利用实时定量PCR的方法．检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后。whiB7基因的表达水平变化不明显外．其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐约株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因。推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。
- 孙照刚张旭霞张健源柴利泉李妍田苗李卫民邱云青李传友
- 结核分枝杆菌天然黏附素HBHA的制备及其检测应用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨HBHA在ELISA检测结核病方面的应用。方法将BCG培养至稳定生长期将其苏通培养基上清通过CL-6B层折柱．利用含NaCL的PBS溶液梯度洗脱得到天然HBHA．然后以纯化的天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白为包被抗原分别对肺结核组、肺外结核组、PPD阳性和PPD阴性健康对照组血清各47例进行ELISA检测抗HBHA抗体水平。结果在进行梯度洗脱时含有375mMNaCL的PBS洗脱液可以获得较纯的天然HBHA蛋白。ELISA检测结果表明肺结核组和肺外结核组的血清抗体水平高于PPD阳性和PPD阴性健康对照组（x^2=36．48，P〈0．01），肺结核组和肺外结核组之间（x^2=0.27。P〉0．05）、PPD阳性和PPD阴性健康对照组之间（x^2=0．30，P〉0.05）血清抗体水平没有显著差异。结论利用天然HBHA蛋白和重组HBHA蛋白进行ELISA结核病诊断都具有较高的特异性和敏感性，可以较好地用于结核病的诊断。以天然HBHA为基础的血清学诊断方法具有更好的敏感性和特异性。
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- 关键词：结核分枝杆菌结核结核病
- 结核分枝杆菌感染巨噬细胞后Toll样受体4表达的变化
- 结核病仍然是威胁人民健康的重大公共卫生问题。近年来,由于耐多药结核(MDR-TB)和严重耐药结核(XDR-TB)发生率越来越多,加上全球人口迅速增长、人口流动加速以及人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的流行等原因,造成结核病...
- 任卫聪孙照刚刘毅田苗李妍李传友
- 文献传递
- 结核分枝杆菌天然黏附素HBHA的制备及其检测应用
- 目的探讨从BCG的苏通培养滤液中分离与纯化结核分枝杆菌天然黏附素 HBHA蛋白,以及天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白应用ELISA检测方法诊断结核病方面的效果。并比较天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白在结核...
- 张旭霞孙照刚李妍刘洋李卫民邱云青张健源端木宏瑾李传友
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测耐药菌中耐药相关基因whiB7的表达
- 目的结核分枝杆菌对链酶素的耐受已经被证明与whiB7有关,whiB7的表达异常是否与对于目前临床应用的其它一线和二线药物的耐药也相关目前还未见报道, 本研究的目的是探讨结核分枝杆菌对一线和二线类治疗药物的耐受性是否与wh...
- 孙照刚张旭霞张健源柴利泉李妍田苗李卫民邱云青李传友
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达被引量：5
- 2006年
- 目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象,利用实时定量PCR的方法,检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后,whiB7基因的表达水平变化不明显外,其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐药株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因,推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。
- 孙照刚张旭霞张健源柴利泉李妍田苗李卫民邱云青李传友
- 关键词：结核分枝杆菌耐药基因
- 观察改良的药物敏感性检测法对检出耐药结核分枝杆菌的影响被引量：2
- 2010年
- 目的利用经改良的最低抑菌浓度法(IMIC)检测结核分枝杆菌临床分离株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素和氧氟沙星的药物敏感性,观察其对耐药结核分枝杆菌检出的影响。方法利用改良的最低抑菌浓度法检测135株临床分离株对INH、RFP、EMB、SM及OFLX的敏感性。结果在相同的药物浓度中,与接种1×105/ml菌量的试验管相比135株接种1×107/ml活菌数的试管中有68.89%的结果与之相同,有31.1%的结果与之不相同。判断结果由阴性转阳性的标本共有20株,(其中耐RFP的1株、耐INH的3株、耐OFLX的3株、耐EMB的5株以及耐SM的8株)约占135株受试菌株总数的14.8%。结论利用改良的最低抑菌浓度法可发现潜在的耐药结核病患者,提高耐药菌的检出率。
- 张健源赵雁林孙照刚姜广路李妍王甦民刘毅聂理会高铁杰张治国任卫聪李传友
- 关键词：微生物敏感性试验
- 结核分枝杆菌黏附素HBHA在结核病免疫学诊断中的应用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素（Heparin—binding haemagglutinin adhesin，HBHA）在结核病免疫诊断方面的应用价值。方法将在苏通培养基中培养至稳定期的卡介苗菌株（BCG）菌体超声裂解，离心后取上清并通过CL-6B层析柱，利用含0—500mmol／L氯化钠的磷酸盐缓冲溶液（PBS）进行梯度洗脱后获得天然HBHA。以BCG基因组为模板PCR扩增结核分枝杆菌hbha基因片段，质粒pET-32a为载体，大肠杆菌作为宿主菌制备原核表达的HBHA重组蛋白。以纯化的天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白为包被抗原，分别对肺结核组、肺外结核组、PPD阳性和PPD阴性健康对照组各47例血清通过ELISA方法检测抗HBHA的抗体水平。应用SPSS11．5统计软件对各研究组数据进行方差齐性检验，然后进行t检验，并计算各研究组的敏感度和特异度。结果含有375mmol／L氯化钠的PBS洗脱液可以洗脱获得较纯的天然HBHA蛋白。利用重组HBHA所带的组氨酸标签进行特异分离、纯化。ELISA检测结果表明天然HBHA蛋白和重组HBHA蛋白、PPD阳性和PPD阴性健康对照组之间血清抗体水平差异不明显。肺结核组与肺外结核组的血清抗体ELISA检测的吸光度值在散点图中分布有明显差异，肺结核组吸光度值集中分布在0．30—0．40之间，肺外结核组吸光度值分布在0．35—0．45之间，经统计学检验结果差异具有统计学意义（t：12．224，P〈0．05）。结核组（肺结核和肺外结核）与对照组（PPD阴性，PPD阳性）吸光度值分布具有显著不同，对照组全部小于0．30，结核组吸光度值则集中分布于0．30—0．45之间。经统计学检验（t=25．909，P〈0．05）血清抗体水平具有显著性差异。结论结核分枝杆菌黏附素HBHA在结核病免疫学诊断的应用中具有较好的特异度和敏感度，有望用于结核病、尤其是肺外结核病的实验室辅助诊断。
- 张旭霞孙照刚李妍张健源端木宏谨李传友
